STT Mã
ch ng
Cách b t màu Hình d ng Cách s p x p
1 TL1 Màu h ng, Gram (-) Tr c, không bào t Riêng l
2 TL2 Màu h ng, Gram (-) Tr c, không bào t Riêng l
3 TL3 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
4 TL4 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
5 TL5 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 48
7 TL7 Màu h ng, Gram (-) C u, không bào t T
8 TL8 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
9 TL9 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
10 TL10 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
11 TL11 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
12 TL12 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
13 TL13 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
14 TL14 Màu h ng, Gram (-) C u, không bào t Riêng l
15 TL15 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
16 TL16 Màu h ng, Gram (-) Tr c, không bào t Riêng l
17 TL17 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
18 TL18 Màu tím, Gram (+) C u, không bào t T
19 TL19 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
20 TL20 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Riêng l
21 TL21 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
22 TL22 Màu tím, Gram (+) C u, không bào t Riêng l
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 49
24 TL24 Màu tím, Gram (+) C u, không bào t Riêng l
25 TL25 Màu tím, Gram (+) Tr c, có bào t Chu i
26 TL26 Màu tím, Gram (+) Tr c, không bào t Chu i
Hình 3. 3 Hình nh quan sát vi th m t s ch ng vi khu n n i sinh d i v t kính 100X
3.2 PHÂN L P N M COLLECTOTRICHUM SP. GÂY B NH
THÁNăTH ăTRểNăCỂYă T
3.2.1 K t qu thu th p m u b nh
D aă vƠoă cácă đ că đi m mô t b nh m c 1.1.2, chúng tôi ti n hành tìm ki m các m u trái t b nhi m b nh t i các ru ng t Ch G o ậ Ti n Giang và
ph ng Phú M - Thành ph Th D u M t - BìnhăD ng.ăThuăđ c 4 m u b nh
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 50
Hình 3.4 M t s m u b nh thu th păđ c
3.2.2 K t qu phân l p n m b nh
M u b nhăđ c phân l pătrênămôiătr ng PDA sau 3 ậ 5 ngày thì xu t hi n
t ăn m. Dùng que c y móc nh năđưăđ c kh trùng h t nh đnh s i n m r i c y
sangăđ aăpetriăćăch aămôiătr ng PDA.
K t qu phân l p cho th y m u b nh Ti n Giang cho k t qu hình thái n m b nhăt ngăt nh ăn m gây b nh thánăth ăCollectotrichum sp.
Sau khi n m m c, ti n hành c yăsangămôiătr ng m i. Ti n hành c yăđ nă
bào t đ t o khóm n măđ ng nh t.
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 51
Sauă khiă ćă đ c khóm n mă đ ng nh t, chúng tôi ti n hành làm tiêu b n n măvƠăquanăsátăd i kính hi n vi quang h c. k t qu trình bày hình 3.5:
Hình 3.6 Bào t n m b nhăquanăsátăd i kính hi n vi
K t qu phân l p cho th y m u n m b nh phân l păđ c t i t nh Ti n Giang (mã ch ng TG1 v i TG là kí hi uăđ i di năchoăn iăphơnăl p) cho k t qu hình thái n m b nhăt ngăt nh ăn m gây b nhăthánăth ăCollectotrichum sp: t n n măđ u tiên có màu tr ng sau chuy n d năthƠnhăxámătrênămôiătr ng PDA. S i n m m n,
đơmănhánh,ăđaăbƠo,màu tr ngăđ n xám t i trên b m t t n n m.Bào t phân sinh hình tr ,ăđ uăh iăt̀,ăđ nhătròn,ăkhôngăćăváchăng n,ăćăm t gi t d u gi a.
3.2.3 K t qu th nghi m lây b nh nhân t o
Khi ti n hành lây b nh nhân t o trên trái t kh e, sau 7 ngày lây nhi m nh ng trái tăđ u b các tri u ch ng c a b nh thán th
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 52
T ănh ngăđ căđi mănghiênăc uăđ căchúngătôiănh năth yăh uăh tăcácăđ că tínhăc aăch ngăn măphơnăl păđ căt ngăt nh ăn m Collectotrichum sp. đ c mô t tr căđơyăb i các tác gi V ăTri u Mân (2007), Ph mă ìnhăQuơnă(2009),ăTr n Th Miên (2008) và có kh n ngăgơyăb nhăthánăth .ăDoăđ́ăchúngătôiăćăth k t lu n ch ng n m phân l păđ c thu c vi n m Collectotrichum sp.
3.3 K T QU XÁCă NH KH N NGăC NHăNIT ăPHỂNă
T
T 26 ch ng vi khu n n i sinh phân l p đ c, chúng tôi ti năhƠnhăxácăđ nh kh n ngă c đ nhnit ă phơnă t . K t qu đnh tính có 8 ch ng (TL2, TL4, TL8, TL11, TL15, TL18, TL21, TL26) có kh n ngăphátătri nătrênămôiătr ngăvôăđ m Ashby.
Hình 3. 8 Kh n ngăphátătri n c a ch ng TL2 trênămôiătr ngăvôăđ m Ashby
Trong m t nghiên c uăc̀ngăh ng c a Allu và c ng s , (2014), phân l p
đ c 10 ch ng vi khu n c đ nhăđ m trong t ng s 19 ch ng vi khu n n i sinh phân l păđ c t trái tăđ (theoăph ngăphápăc a Cappuccino và Sherman, 1992).
3.4 K T QU XÁCă NH KH N NGăHÒAăTANăLỂN
3.4.1 nh tính kh n ng hòa tan lân
T các ch ngăđ c làm thu n, chúng tôi ti năhƠnhăxácăđ nh ho t tính hòa tan lân. K t qu đ nhă tínhă hòaă tană lơnă trênă môiă tr ng Pikovskaya cho th y 3
SVTH: Nguy n Th Thùy Linh 53 ch ng (TL4, TL19, TL25)ăđưăphơnăl p có kh n ngăt o vòng trong xung quanh khu n l c (hình 3.5).
Hình 3. 9 Kh n ngăhòaătanălơnăc a ch ng TL4 trênămôiătr ng Pikovskaya
Trong m t nghiên c uăc̀ngăh ng c a Allu và c ng s , (2014), phân l p
đ c 10 ch ng vi khu n hòa tan lân trong t ng s 19 ch ng vi khu n n i sinh phân l păđ c t trái tăđ (theoăph ngăphápăc a Wasyudi và c ng s , 2011).
3.4.2 K t qu đ nh l ng hòa tan lân c a các ch ng vi khu n th nghi m
Sauăkhiăđnh tính kh n ngăcácăch ng có kh hòa tan lân, chúng tôi ti n
hƠnhăxácăđnh ho t tính hòa tan lân d aătrênăhƠmăl ng phospho tan trong d ch nuôi c y sinh ra d a trên k t qu OD600nm (ph l c 4, b ng 4.2 ) và so v iăđ ng chu n (ph l c 4, bi uăđ 4.1 ), x lý th ng kê (ph l c 4 ), k t qu đ c trình bày
b ng 3.3 và bi uăđ 3.1.