I. Yếu tố hĩa học 1.Nước
3. Nguồn cacbon
Malt extract: Dịch trích từ lúa đại mạch, rỉ đường, mạch nha Bột chuối nghiền; Bột khoai tây nghiền
Dich chiết cà rốt, cà chua, khĩm; Dịch chiết nấm men Dich thuỷ phân casein, casein hydrolysat.
Các phức chất tự nhiện
Nước dừa
Được sử dụng thường xuyên trong nuơi cấy mơ tế bào
Thành phần phức tạp, khơng ổn định tuỳ theo mùa, độ tuổi của cây, nguồn gốc của cây Tuy vậy cĩ tác dụng rất tốt trong nuơi cấy mơ tế bào
Thành phần hố học: Kích thích sinh trưởng-kinetin, auxin, acid amin tự do, protein, peptid, đường, axit hữu cơ, myo-inositol …
I. Yếu tố hĩa học
Amino acid
Kích thích sự tăng trưởng của tế bào Nguồn cung cấp nitrogen
I. Yếu tố hĩa học
Auxin: Tự nhiên (AIA – Acid Indol Acetic), Nhân tạo (AIB, ANA, 2,4-D) Cytokinin: Adenin, Kinetin, BA, BAP
Gibberellin (GA3, GA1, GA4, GA7) Ethylene, Acid Abscisic (ABA)… Chất điều hịa sinh trưởng
thực vật
Than hoạt tính
Kích thích tăng trưởng và biệt hĩa: phong lan, hành, cà rốt, cà chua, trường xuân Gây ức chế: thuốc lá, đậu
Tác dụng: Giảm độc tố bằng cách đào thải các hợp chất độc, cho phép tế bào sinh trưởng bình thường Hút các hợp chất cản, chất điều hịa sinh trưởng hoặc làm đen mơi trường
Giá thể
Thạch (Agar) là giá thể phổ biến
Là một loại polysacharide chiết xuất từ tảo. Hồ tan ở trong 80oC.
ở 40oC trở về trạng thái gel- nửa cứng
Ngồi ra cịn cĩ một số chất giá thể khác như phytagel, agarose... Nồng độ: 0.6 – 1%
pH MƠI TRƯỜNG
Là yếu tố cực kỳ quan trọng trong mơi trường. pH ảnh hưởng đến các yếu tố sau:
• Sự tương tác giữa các chất, đặc biệt là trong quá trình khử trùng.
• Rất quan trọng đối vơi việc thuỷ phân agar. pH càng thấp thì mơi trường càng lỏng.
• Ảnh hưởng đến các vitamin và các chất hữu cơ.
• Trước khử trùng: pH = 5.5 – 5,7 (trừ các thí nghiệm đặc biệt).
• Sử dụng KOH, NaOH để điều chỉnh độ pH.
• Trong quá trình nuơi cây pH giảm dần (mơi trường chua hố)
Ánh sáng
Địi hỏi đối với nguồn sáng
Phát sinh cơ quan, hình thành cây Cường độ 2800 - 3000 lux Chu kỳ chiếu sáng 16/24; hoặc 18/24 Chất lượng quang phổ: dải tần 230-780 nm
Bĩng tối đối với một số trường hợp
như tạo củ, tạo callus