Giống như phương pháp ELISA, phương pháp này sử dụng kháng thể với các protein khác nhau gắn vào bề mặt vật rắn. các mẫu thử nghiệm được phân lập và đánh dấu bằng huỳnh quang.
Tiến hành trong hai điều kiện:
Mẫu 1 dán nhãn với Cy3, phát huỳnh quang màu xanh lá cây Mẫu 2 dán nhãn với Cy5, phát huỳnh quang màu đỏ
Thêm vào mẫu các kháng thể, protein, bổ sung liên kết với các kháng thể thích hợp, cùng nguồn gốc
Nếu cả hai mẫu giống nhau, đều gắn với kháng thể ở vị trí tương tự thì huỳnh quang sẽ phát ra màu vàng
Nếu mẫu 1 có protein đó, và mẫu 2 không có vị trí sẽ có màu xanh
Ngược lại, nếu mẫu 2 có, mà mẫu 1 không có thì vị trí sẽ có màu đỏ. Phương pháp này dùng để so sánh các biểu hiện protein trong hai điều kiện khác nhau
Nhiều kháng thể phản ứng chéo với các protein khác của tế bào, tạo ra dương tính giả. Ngoài ra, protein liên kết với hỗ trợ vững chắc có thể không thực sự đại diện các điều kiện bên trong tế bào. Các protein không tinh khiết hoặc ly thân, do đó, các mẫu chứa Thư viện của protein rất đa dạng. Một số protein sẽ liên kết protein gắn thẻ nhanh hơn và tốt hơn so với những người khác. Ngoài ra, protein thấp sự phong phú có thể không cạnh tranh cho các vị trí liên kết. Một vấn đề khác là nhiều protein được tìm thấy
trong khu phức hợp, protein rất khác trong khu phức hợp + có thể che dấu các vị trí gắn kết kháng thể.
Kết luận
Protein có vai trò rất quan trọng đối với cuộc sống của mỗi chúng ta, và còn rất nhiều điều bí ẩn về nó mà chúng ta chưa khám phá ra hết.
Có rất nhiều phương pháp để nghiên cứu cấu trúc và chức năng của chúng, mỗi phương pháp có những ưu điểm và hạn chế riêng, tuy nhiên nhờ vậy mà chúng ta mới khám phá được chức năng của protein.
Tài liệu tham khảo : http://archimede.bibl.ulaval.ca/archimede/fichiers/21738/ http://fr.wikipedia.org/wiki/R%C3%A9sonance_magn%C3%A9tique_nucl %C3%A9aire http://glycobase.univ-lille1.fr/documents/livreRMN.PDF http://www.cours-medecine.info/biochimie/structure-proteines.html
http://en.wikipedia.org/wiki/Yeast_two-hybrid_system
Công cụ hỗ trợ:
https://www.google.com.vn/ http://translate.google.com.vn/