* Tách chiết AND, phản ứng PCR, điện di và nhuộm bạc nh− mục II
Sàng lọc tính đa hình của bố mẹ cặp lai
ẹ .B là bố của cặp lai ICG950166 x L12. KTPT: Kí
háp
*
* Sử dụng 14 mồi đặc hiệu SSRs để chạy PCR trên mẫu ADN bố mẹ cặp lai (
* Phân tích số liệu SSRs
ới các chỉ
lai tự thụ F3 mang chỉ thị tính
kh ệnh gỉ sắt ua p SSR hân
tích tính đa hình của giống ICG950166 (mang chỉ thị kháng bệ và giống
L12 (khô mang ch kháng bệnh g ) với 8 cặp mồi SSR đ c định là
có liên kết với tính kháng bệnh gỉ sắt ở lạc.
Tính đa hình giống ICG950166 và giống L12 đ−ợc thể hiện ở sự khác
nhau về kích th−ớc phân đoạn ADN khi phân tích với các cặp mồi SSR trên gel
0,6% polyacryamid. Kết quả điện di sản phẩm PCR của hai giống ICG950166 và L12 với 8 cặp mồi SSR thì chỉ tìm thấy 4 cặp mồi L32, L38, L52 và L54 là chỉ ra
tính đa h giữa hai g bố mẹ cặp l G950166 x L12 (Hìn ng 2).
Bảng 2: K uả sàng lọ h đa hình của g ICG950166 và L12 vớ i
STT mồi Nhiệt độ
bắt m ồi
Kích th− phân
đoạn ADN lý thuyết của A/B
(bp
Kết quả phân tích đa hình
th−ớc phân
A/B (bp)
Dựa vào ảnh điện di sản phẩm PCR và sự xuất hiện các băng SSR v thị để làm cơ sở cho việc phân tích số liệu:
Tiêu chuẩn hoá sản phẩm PCR:
A: Xuất hiện băng SSR t−ơng đồng dòng mẹ.
B: Xuất hiện băng SSR t−ơng đồng dòng bố.
H: Dị hợp tử.
U: Không giống cả dòng mẹ và dòng bố.