Quá trình nhân nhanh chồi là giai đoạn tăng hệ số nhân, tạo được số lượng cây giống nhiều nhất nhằm hạ giá thành sản xuất. Hệ số nhân nhanh tuỳ thuộc vào nồng độ chất kích thích sinh trưởng và mơi trường thích hợp. Theo kết quả nghiên cứu trong thí nghiệm 4 cho thấy: nồng độ 1.5 mg/l BA; nồng độ 1 mg/l kinitine;
nồng độ 0.4 mg/l TDZ cho hệ số nhân chồi cao nhất. Tuy nhiên, khi tổ hợp các nồng độ các chất điều hồ sinh trưởng tối ưu thì khả năng tạo được hệ số nhân nhanh cao hơn khi sử dụng đơn lẻ. Chính vì vậy, trong thí nghiệm này chúng tơi
nghiên cứu vấn đề này. Kết quả nghiên cứu được thể hiện bảng 3.10.
Bảng 3.10. Khảo sát quá trình nhân nhanh
Qua bảng 3.10 ta thấy:
- Khi kết hợp BA và TDZ; kinitine và TDZ; BA, kinitine và TDZ kết quả cho 2 loại hình thái chồi: chồi và protocorm. Số lượng protocorm cao hơn dạng chồi và chất lượng protocorm tốt hơn.
- Khi kết hợp BA và kinitine kết quả thu đuợc 01 dạng chồi với số lượng là 08 chồi và số đốt/chồi là 03 đốt. Kết quả nghiên cứu này cao hơn khi dùng 1.5 mg/l BA (7 chồi và 3 đốt/chồi); 1 mg/l kinitine (8 chồi và 02 đốt/chồi) và chất lượng chồi tốt hơn khi dùng các chất điều hồ sinh trưởng riêng rẻ. Như vậy, BA và kinitien cĩ tác dụng hỗ trợ nhau giúp tạo nhiều chồi hơn, số đốt/chồi cao hơn và chiều dài lĩng/đốt kéo dài hơn (Hình 3.8.b).
Nghiệm thức
Chồi
Protocorm Đặc điểm chồi Số chồi/mẫu Số đốt/mẫu
NT1 3 1 8 Chồi vàng, xanh
NT2 8 3 Chồi xanh, to khỏe
NT3 2 2 5 Chồi vàng, trắng
Hình 3.8. Khảo sát quá trình nhân nhanh
(a) Mơi trường cĩ BA+TDZ (b) Mơi trường cĩ BA+kinetine
(c) Mơi trường cĩ kinetin+TDZ (d) Mơi trường cĩ BA+TDZ+ kinetin - Khi kết hợp BA, kinitin và TDZ thì kết quả tạo nhiều protocorm nhất, đạt 15 protocorm/mẫu và chất lượng tốt hơn khi dùng dạng TDZ riêng lẻ. Kết quả này mở ra hướng nhân nhanh lan gấm thơng qua nhân nhanh protocorm. Đây là hướng nhân nhanh thường áp dụng phổ biến cho các loại lan.
Do thời gian thực hiện đề tài ngắn nên trong phạm vi nghiên cứu chúng tơi tiến hành khảo sát nhân nhanh protocorm trên mơi trường Knudson C cĩ bổ sung các chất điều hồ sinh trưởng là 1.5 mg/l BA+1 mg/l kinitine + 0.4 mg/l TDZ, kết quả quan sát sau 4 tuần nuơi cấy số lượng protocorm tạo ra là 25-30 protocorm/cụm
chồi. Tiếp tục thử nghiệm chuyển protocorm sang mơi trường Knudson C cĩ bổ sung 1.5 mg/l BA + 0.2 mg/l NAA, kết quả sau 4 tuần nuơi cấy mẫu chuyển thành chồi cây (hình 3.9).
Hình 3.9. Khảo sát quá trình nhân nhanh protocorm
Kết luận: sự kết hợp BA và kinitine cho số lượng chồi cao nhất là 8 chồi với 03 đốt/chồi nên tạo đuợc hệ số nhân là 24 lần. Khi kết hợp BA + kinitine + TDZ khả năng nhân chồi dạng protocorm cao, với hệ số nhân là 25-30 lần.