3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2. Khảo sát khả năng tạo chồi trên môi trường MS bổ sung các chất điều hòa sinh
3.2.3. Môi trường MS có bổ sung kết hợp IAA và BA
Sau 4 tuần nuôi cấy, đoạn thân Bắp in vitro trên các nghiệm thức trong môi trường MS có bổ sung IAA kết hợp với BA ở nồng độ thay đổi đã cho thấy tác động của sự kết hợp này với những tỷ lệ khác nhau lên sự hình thành số lượng chồi, chiều cao chồi khác nhau ở từng nghiệm thức. Giữa các thí nghiệm có sự khác biệt có ý nghĩa. Chồi phát triển rất tốt sau 4 tuần nuôi cấy trong các nghiệm thức có bổ sung IAA và BA với nồng độ thay đổi cho thấy tác động kích thích phát triển của sự kết hợp này lên mẫu cấy. Nghiệm thức I2B3 (MS + IAA 0,35 mg/l+ BA 0,75 mg/l) cho nhiều chồi với số chồi là 3 chồi/mẫu và chiều cao chồi là 25,8 mm/mẫu khác biệt có ý nghĩa so với các nghiệm thức còn lại trong cùng điều kiện và thời gian 4 tuần nuôi cấy (bảng 3.6, hình 3.6).
35
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với IAA trong quá trình tạo chồi từ đoạn thân cây Bắp (chẻ đôi đoạn thân, 4 tuần tuổi)
Nghiệm thức Số chồi
(chồi/mẫu)
Chiều cao chồi (mm)
Đặc điểm chồi
DC (MS)
1,00d 10,8de Chồi cao trung bình, có rễ, số rễ >3
I1B1
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,50d 9,7e Chồi thấp, một số chồi có rễ, số rễ <3
I1B2
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,67cd 13,3cde Chồi thấp, một số chồi có rễ, rễ ngắn, số rễ <3 I1B3
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
2,33b 21,7ab Chồi cao, một số chồi có rễ, rễ ngắn, số rễ <3
I2B1
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,50d 9,2e Chồi thấp, không có rễ
I2B2
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,50d 15,8cd Chồi cao trung bình, không có rễ
I2B3
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
3,00a 25,8a Chồi cao, không có rễ
I3B1
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,33d 9,2e Chồi thấp, không có rễ
I3B2
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,50d 16,7bc Chồi cao trung bình, không có rễ I3B3
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
2,17bc 25,8a Chồi cao, không có rễ
cv%= 28,95% cv%= 27,84
(những chữ cái khác nhau thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa thống kê P ≤ 0,05)
36
A
Hình 3.6. Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với IAA trong quá trình tạo chồi từ đoạn thân cây Bắp (chẻ đôi đoạn thân, 4 tuần tuổi)
(Lưu ý: sự phát triển của chồi bên được chỉ thị bằng dấu mũi tên) B
C
F
G
D
E
H
I K
37 Chú thích:
A: Mẫu đối chứng trên môi trường MS
B: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA C: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA D: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA E: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA F: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA G: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA H: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA I: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA K: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA
Kết quả từ bảng 3.6 cho thấy chồi tăng trưởng tốt trên môi trường MS có bổ sung 0,35 mg/l IAA kết hợp với 0,75 mg/l BA, chứng tỏ nồng độ IAA và BA này thích hợp cho việc tạo cụm chồi. Nghiệm thức I1B1 (MS+ IAA 0,2 mg/l+
BA 0,25 mg/l), I2B1 (MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,25 mg/l), I2B2 (MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,5 mg/l) và I3B2 (MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,5 mg/l), tạo ra ít chồi, chồi hình thành thấp chứng tỏ nồng độ kết hợp này không thích hợp cho sự phát triển của chồi Bắp. Nghiệm thức đối chứng, không bổ sung chất điều hòa sinh trưởng thực vật nên không có khả năng tạo chồi mà chỉ phát triển như bình thường, một chồi và có rễ.
3.2.3.2. Hủy đỉnh sinh trưởng
Sau 4 tuần nuôi cấy, đoạn thân Bắp in vitro trên các nghiệm thức trong môi trường MS có bổ sung IAA kết hợp với BA ở nồng độ thay đổi đã cho thấy tác động của sự kết hợp này với những tỷ lệ khác nhau lên sự hình thành số lượng chồi, chiều cao chồi khác nhau ở từng nghiệm thức. Giữa các thí nghiệm có sự khác biệt có ý nghĩa. Nghiệm thức I2B3 (MS + IAA 0,35 mg/l+ BA 0,75 mg/l) cho nhiều chồi với số chồi là 2,83 chồi/mẫu và chiều cao chồi là 20,8 mm/mẫu khác biệt có ý nghĩa so với các nghiệm thức còn lại trong cùng điều kiện và thời gian 4 tuần nuôi cấy (bảng 3.7, hình 3.7).
38
Nghiệm thức Số chồi
(chồi/mẫu)
Chiều cao chồi
(mm)
Đặc điểm chồi
ĐC (MS)
0,83d 15,0bcd Chồi cao, xanh, rễ dài, số rễ >3
I1B1
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,33cd 12,5cd Chồi thấp, xanh, một số mẫu có rễ ngắn, số rễ <3 I1B2
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,33cd 15,8abcd Chồi cao, xanh, một số
mẫu có rễ ngắn, số rễ <3 I1B3
(MS+ IAA 0,2 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
2,00b 16,7abcd Chồi cao, xanh, một số
mẫu có rễ ngắn, số rễ <3 I2B1
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,17d 13,3bcd Chồi cao trung bình, xanh, rễ ngắn, số rễ <3 I2B2
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,83bc 17,5abc Chồi cao, xanh, một số mẫu có rễ ngắn, số rẽ <3 I2B3
(MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
2,83a 20,8a Chồi cao, xanh, một số mẫu có rễ ngắn, số rễ <3 I3B1
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,25 mg/l)
1,00d 11,7d Chồi thấp, rễ ngắn, số rễ
<3 I3B2
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,5 mg/l)
1,83bc 14,2bcd Chồi cao trung bình, một số mẫu có rễ ngắn, số rễ
<3 I3B3
(MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,75 mg/l)
1,83bc 18,3ab Chồi cao, một số mẫu có rễ ngắn, số rễ <3 cv%= 30,19% cv%= 25,2%
(những chữ cái khác nhau thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa thống kê P ≤ 0,05) Bảng 3.7 Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với IAA trong quá trình tạo chồi
từ đoạn thân cây Bắp (hủy đỉnh sinh trưởng, 4 tuần tuổi)
39
Hình 3.7. Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với IAA trong quá trình tạo chồi từ đoạn thân cây Bắp (hủy đỉnh sinh trưởng, 4 tuần tuổi)
(Lưu ý: sự phát triển của chồi bên được chỉ thị bằng dấu mũi tên) A
C D
E F
G H
I K
B
40 Chú thích:
A: Mẫu đối chứng trên môi trường MS
B: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA C: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA D: Chồi trên môi trường MS+ 0,2 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA E: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA F: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA G: Chồi trên môi trường MS+ 0,35 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA H: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,25 mg/l BA I: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,5 mg/l BA K: Chồi trên môi trường MS+ 0,5 mg/l IAA+ 0,75 mg/l BA
Kết quả từ bảng 3.7 cho thấy chồi tăng trưởng tốt trên môi trường MS có bổ sung 0,35 mg/l IAA và 0,75 mg/l BA. Nghiệm thức I1B3 (MS+ IAA 0,2 mg/l+
BA 0,75 mg/l); I2B2 (MS+ IAA 0,35 mg/l+ BA 0,5 mg/l); I3B2 (MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,5 mg/l) và I3B3 (MS+ IAA 0,5 mg/l+ BA 0,75 mg/l), chồi hình thành nhiều lá, cao. Nghiệm thức đối chứng (MS) do không bổ sung chất điều hòa sinh trưởng thực vật nên không có khả năng tạo chồi mà chỉ phát triển như bình thường, một chồi và có rễ.
41
42
4. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ