Chương II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.4. Phân tích thành phần axit béo
10 mg dầu béo đƣợc hòa tan với 1 mL n-hexan, lắc kỹ trong lọ nhỏ nút kín; bổ sung 25 àL dung dịch CH3ONa trong methanol (2mol/L) và lắc kỹ trong 1 phỳt; bổ sung 1 mL nước cất vào, lắc kỹ và phân lớp bằng ly tâm 3000 vòng/phút, hút lớp sáp khụng phản ứng ở dưới loại đi; bổ sung 100 àL HCl, lắc kỹ và phõn lớp bằng ly tõm 3000 vòng/phút; loại bỏ kiệt lớp bẩn dưới đáy, lớp dung môi trên được làm khan bằng Na2SO4 và phân lớp bằng ly tâm 3000 vòng/phút.
Chuyển mẫu đã methyl hoá sang ống mẫu đem phân tích thành phần axit béo bằng máy sắc kí khí: HP-6890, ghép nối với Mass Selective Detector Agilent 5973;
Cột: HP-5MS (0,25m x 30m x 0,25mm); Khí mang He; Chương trình nhiệt độ: bắt đầu ở 80oC trong 1 phút; tăng lên 150oC với tốc độ tăng 4oC/phút; tiếp theo tăng nhiệt độ lên đến 260oC và giữ trong 10 phút với tốc độ tăng nhiệt độ 10oC/phút; Thƣ viện phổ khối: WILEY275. L và NIST 98. L theo tiêu chuẩn ISO/ FDIS 5590:1998, LB Đức và theo mô tả trong công trình của Đặng Diễm Hồng và cs., (2007) đƣợc tiến hành tại Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam.
Số liệu được xử lý theo phương pháp thống kê sinh học dựa trên các phần mềm Microsoft Office Excel 2003.
(Doan và Obbard, 2010)
39
(9-(Diethylamino)-5H benzo - -
40x106
5 àL du
quang (NIKON eclipse 80i-
450–490 nm và ánh sáng phát huỳnh quang của Nile Red có bước sóng 540-640 nm.
2.2.6. Chuyển hóa biodiesel từ sinh khối tảo (Johnson and Wen, 2009) Chlorella vulgaris HP, Tetraselmis convolutae
32 mL dung môi (một trong 3 loại dung môi chloroform, hexan, hoặc petroleum ete).
45 giây.
.
2.2.7. Tối ƣu các điều kiện phản ứng của quá trình chuyển hóa diesel sinh học 2.2.7.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ và thời gian phản ứng
900C. Tương ứng với mỗi nhiệt độ thí nghiệm, hỗn hợp chuyển hóa được đặt trong
40
điều kiện khuấy trộn liên tục và thời gian phản .
2.2.7.2.
Hỗn hợp phản ứng gồm 8 gam bột sinh khối tảo khô, 27,2 mL methanol, 4,8 mL axit sulfuric, có bổ sung dung môi (32 mL chlo
petroleum ether) hoặc không bổ sung dung môi. Thời gian và nhiệt độ phản ứng tương ứng là 3 giờ và 700C.
2.2.7.3. Ảnh hưởng của độ ẩm sinh khối vi tảo
Sinh khối tảo đƣợc sấy ở nhiệt độ 800C đến khối lƣợng không đổi đƣợc coi là sinh khối khô hoàn toàn (độ ẩm 0%) và đƣợc sử dụng làm cơ sở để tính toán độ ẩm của các mẫu sinh khối khác. Để nghiên cứu ảnh hưởng của độ ẩm lên quá trình chuyển vị ester tại chỗ, sinh khối tảo đƣợc làm khô tự nhiên ở 280C (± 10C) để thu được sinh khối tảo có độ ẩm tương ứng là 75%; 55%. Sinh khối có độ ẩm 10%; 2%;
và 0% đƣợc thu nhận bằng cách sấy ở 800C trong tủ sấy. Một lƣợng sinh khối có độ ẩm khác nhau tương đương với 8 gam sinh khối khô hoàn toàn được trộn với 27,2 mL metanol chứa 4,8 mL axit sulfuric, nhiệt độ phản ứng 700C, thời gian phản ứng là 3 giờ.
41
70 .
2.2.8. Xác định hiệu suất của quá trình chuyển hóa và thành phần axit béo của sản phẩm diesel sinh học
Hiệu suất của quá trình chuyển hóa diesel sinh học đƣợc xác định dựa trên khối lƣợng của sản phẩm diesel sinh học thu đƣợc so với hàm lƣợng lipit tổng số chứa trong sinh khối tảo (% theo khối lƣợng dầu) hoặc đƣợc xác định dựa trên khối lƣợng của sản phẩm diesel sinh học thu đƣợc so với khối lƣợng của sinh khối sử dụng để chuyển hóa (% theo khối lƣợng sinh khối tảo) (Đặng Diễm Hồng và cs., 2011).
Thành phần axit béo của sản phẩm diesel sinh học thu đƣợc sau quá trình chuyển hóa được xác định bằng phương pháp sắc ký khí (gas chromatography, GC) sử dụng máy sắc ký khí HP-6890. Các axit béo đƣợc xác định bằng cách so sánh thời gian lưu của chúng với thời gian lưu của các chất chuẩn đã biết và được định lượng bằng cách so sánh diện tích peak của chúng với chất chuẩn.
Một số chỉ tiêu chất lƣợng củ 150
ể
ả ộng sự
ố.
42
CHƯƠNG 3