PHẦN 3 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM
3. Khảo sát tính kháng khuẩn của cao thô Diệp hạ châu đắng trên các chủng vi
3.1. Thử tính kháng khuẩn của cao thô Diệp hạ châu đắng
Sau khi tiến hành khảo sát tính kháng khuẩn của cao thô Diệp hạ châu đắng trên các chủng vi khuẩn S. aureus ATCC, B. subtilis ATCC, S. pyogenes ATCC, S. typhimurium ATCC, S. flexerneri ATCC, kết quả thí nghiệm ghi nhận được trình bày trong Bảng 4.
Qua Bảng 4, cho thấy rằng cao thô Diệp hạ châu đắng có khả năng ức chế các chủng vi khuẩn Gram âm và Gram dương. Ở nồng độ 50 mg/ml đến nồng độ 12,5 mg/ml cao thô
Diệp hạ châu đắng ức chế 100 % sự phát triển của các chủng vi khuẩn, ở các nồng độ thấp hơn, khả năng ức chế của cao thô giảm dần và đến nồng độ 3,125 mg/ml khả năng ức chế của cao thô < 25 % trên các chủng vi khuẩn. Riêng đối với S. aureus ATCC ở nồng độ 3,125 mg/ml cao thô không còn khả năng ức chế, như vậy khả năng ức chế của cao thô đối với S. aureus ATCC yếu hơn so với các chủng vi khuẩn còn lại.
Kết quả ghi nhận được cao thô Diệp hạ châu đắng có tính kháng khuẩn trên các chủng vi khuẩn Gram âm và Gram dương. Điều này phù hợp với kết quả nghiên cứu của Flora và Folasade (2008); Đỗ Huy Bích và ctv (2004); ETTA và ctv (2011) rằng cao thô Diệp hạ châu đắng có khả năng ức chế các chủng vi khuẩn Gram dương: S. aureus ATCC, B.
subtilis ATCC, S. pyogenes ATCC và Gram âm S. typhimurium ATCC, S.flexerneri ATCC.
Việc phát hiện ra hoạt tính kháng khuẩn của Diệp hạ châu đắng trên các chủng vi khuẩn phù hợp với kinh nghiệm dân gian: dùng cây Diệp hạ châu đắng để trị mụn nhọt, lở loét, trị rối loạn đường ruột, tiêu chảy và đã cho thấy triển vọng trong việc phòng trị bằng dược liệu tự nhiên.
Bảng 4. Khả năng ức chế (%) của cao thô Diệp hạ châu đắng trên các chủng vi khuẩn Gram âm và Gram dương
Vi khuẩn
Khả năng ức chế đến các chủng vi khuẩn khảo sát ở các nồng độ cao thô khác nhau
50 25 12,5 6,25 3,25 1,561
Gram + S. aureus ++++ ++++ ++++ + - -
B. subtilis ++++ ++++ ++++ +++ + -
S. pyogenes ++++ ++++ ++++ +++ + -
Gram - S. typhimurium ++++ ++++ ++++ + + -
S. flexerneri ++++ ++++ ++++ +++ + -
++++: ức chế 75 – 100 %, +++: ức chế 50 – 75 %, ++: ức chế 25 – 50 %, +: ức chế < 25 %, -:
không còn khả năng ức chế. Gram +: Gram dương, Gram - : Gram âm.
Hình 10. B. subtilis ở MIC 3,125 mg/ml và MBC 12,5 mg/ml trên MHA
(1): Nồng độ 50 mg/ml, (2) Nồng độ 25 mg/ml, (3) Nồng độ 12,5 mg/ml, (4) Nồng độ 6,25 mg/ml, (5) Nồng độ 3,125 mg/ml, (6) Nồng độ 1,561 mg/ml
Hình 11. S. typhimurium ATCC ở MIC 3,125 mg/ml và MBC 12,5 mg/ml trong MHA (1): Nồng độ 50 mg/ml, (2) Nồng độ 25 mg/ml, (3) Nồng độ 12,5 mg/ml, (4) Nồng độ 6,25 mg/ml, (5) Nồng độ 3,125 mg/ml, (6) Nồng độ 1,561 mg/m
Hình 12. S. aureus ATCC ở MIC 3,125 mg/ml và MBC 12,5 mg/ml trong BHI
(1): Nồng độ 50 mg/ml, (2) Nồng độ 25 mg/ml, (3) Nồng độ 12,5 mg/ml, (4) Nồng độ 6,25 mg/ml, (5) Nồng độ 3,125 mg/ml, (6) Nồng độ 1,561 mg/ml
Hình 13. S. pyogenes ở MBC 12,5 mg/ml trên NA
Khuẩn lạc S. pyogenes
Hình 14. Đối chứng + (bên trái) và đối chứng - (bên phải) của B. subtilis trong MHA
Qua Bảng 5, có thể thấy cao thô Diệp hạ châu đắng có khả năng ức chế các chủng vi khuẩn Gram âm và Gram dương. Kết quả này phù hợp với kết quả thí nghiệm thử tính kháng khuẩn của cao thô Diệp hạ châu đắng. Bên cạnh đó, có thể thấy cao thô Diệp hạ châu đắng ức chế mạnh S. aureus ATCC ở MIC >3,125 mg/ml, B. subtilis ATCC, S.
pyogenes ATCC, S. typhimurium ATCC, S. flexerneri ATCC ở MIC 3,125 mg/ml và ở MBC 12,5 mg/ml. MIC 3,125 mg/ml, MBC 12,5 mg/ml trên S. aureus ATCC của cao thô
Diệp hạ châu đắng trong nghiên cứu cao hơn so với kết quả nghiên cứu của Adegoke và ctv (2010): MIC 50 mg/ml, MBC 100 mg/ml. Qua đó cho thấy cao thô Diệp hạ châu đắng được điều chế với dung môi methanol bằng phương pháp chiết lạnh có khả năng ức chế S.
aureus ATCC mạnh hơn so với dịch chiết điều chế bằng ethanol trong nghiên cứu của Adegoke và ctv (2010). Như vậy có thể thấy phương pháp chiết, dung môi chiết xuất có ảnh hưởng rất lớn đến khả năng kháng khuẩn của cao thô Diệp hạ châu đắng. S. aureus đã có khả năng đề kháng trên nhiều kháng sinh: penicillin (Frank và Henry, 2009), tetracyline, trimethoprin + sulfamethazin, chloramphenicol, erythomycin, methicillin, ampicillin, co – trimoxaol, erythromycin, lincomycin với tỉ lệ khá cao (Nguyễn Bữu Châu, 2007) do đó việc điều trị bằng Diệp hạ châu đắng giúp hạn chế sử dụng kháng sinh, tránh hiện tượng kháng kháng sinh, gây ảnh hưởng đến sức khỏe con người và môi trường xung quanh.