3.1. Đối t−ợng nghiên cứu
Thành phần sâu hại, rệp sáp hại mía trên các ruộng mía có điều kiện canh tác khác nhau, các giống mía khác nhau và xác định thành phần của một số loài thiên địch chủ yếu của rệp sáp hại mía.
3.2. Địa điểm và thời gian nghiên cứu 3.2.1. Địa điểm
- Nghiên cứu các đặc điểm hình thái và sinh học của rệp đ−ợc tiến hành chủ yếu tại nhà l−ới và phòng thí nghiệm cứu côn trùng- Viện bảo vệ thực vật.
- Điều tra thu thập thành phần sâu hại, thành phần thiên địch rệp sáp, nghiên cứu các đặc điểm sinh thái của rệp sáp đ−ợc thực hiện vùng mía trọng
điểm Thạch Thành, Nông tr−ờng Hà Trung – Thanh Hoá.
- Biện pháp phòng trừ trong nhà l−ới đ−ợc tiến hành tại Viện Bảo vệ thực vật, phòng trừ ngoài đồng đ−ợc tiến hành tại Thạch Thành- Thanh Hoá.
3.2.2. Thời gian nghiên cứu
Thời gian nghiên cứu: từ năm 2005 đến tháng7 năm 2006 3.3. Dụng cụ và vật liệu nghiên cứu
- Các giống mía đ−ợc trồng trong sản xuất
- Các loài rệp và thiên địch của chúng, các loài sâu hại mía,
- Túi ni lông, chổi lông, lọ thuỷ tinh, hộp nhựa ,ống tuýp, kim mũi nhọn, panh.
- Xô nhựa trồng cây, lồng l−ới nuôi sâu, các giống mía nuôi sâu - Tủ sấy, kính lúp, kính lúp soi nổi, buồng sinh thái.
- Thuốc trừ sâu hoá học và sinh học.
- Dụng cụ thử nghiệm thuốc: ống Pipet, ống đong, xylanh, bình bơm tay 1l, bình bơm 8l.
3.4. Nội dung nghiên cứu
- Điều tra thành phần sâu hại mía, rệp sáp hại mía
- Nghiên cứu đặc điểm sinh học của rệp sáp hồng S.sacchari
- Điều tra diễn biến mật độ rệp, tỷ lệ cây hại, chỉ số hại của loài rệp hại mía quan trọng
- ảnh hưởng của kỹ thuật canh tác đến tỷ lệ và chỉ số hại
- Xác định thành phần một số loài thiên địch chính của thiên địch của rệp sáp - Thử hiệu lực phòng trừ của một số thuốc bảo vệ thực vật
3.5. Ph−ơng pháp nghiên cứu 3.5.1. Điều tra thành phần
Điều tra 10-15 ngày 1 lần, điều tra tự do không cố định điểm .Tiến hành thu thập toàn bộ mẫu vật sâu hại, rệp sáp hại mía và kẻ thù tự nhiên của loài rệp hại chính bắt gặp trong quá trình điều tra. Riêng đối với mẫu vật là sâu non tiến hành nuôi tới trưởng thành để phân loại. đối với mẫu vật bị ký sinh hoặc nghi ký sinh chúng tôi cho vào ống nghiệm sạch theo dõi tiếp cho tới khi tr−ởng thành ký sinh xuất hiện [17]
+ Thu mẫu, làm mẫu đ−ợc giám định tại phòng côn trùng Viện bảo Vệ thực vật, một số mẫu được gửi đi nước ngoài để định loại.
+ Điều tra mức độ gây hại các loài rệp sáp quan trọng.
3.5.2. Nghiên cứu một số đặc điểm hình thái và sinh học của rệp sáp 3.5.2.1. Đặc điểm hình thái
Đo kích th−ớc trứng ,rệp vừa lột xác ở mỗi tuổi. Mỗi loại giai đoạn phát dục của sâu tiến hành đo 20 -30 cá thể và mô tả đặc điểm về hình thái.
3.5.2.2. Đặc điểm sinh học
- Tiến hành bắt rệp trưởng thành bằng bút lông sau đó dùng bút lông chuyển sang cây trong lồng lưới để theo dõi các đặc điểm sinh học hàng ngày theo dõi lột xác của rệp để tiến hành xác định tuổi của rệp. Toàn bộ số liệu thu
đ−ợc ghi vào bảng nuôi sinh học rệp. Bảng nuôi sinh học của rệp sẽ xác định các chỉ tiêu sau:
+ Thời gian phát dục của rệp qua các tuổi.
+ Ngày bắt đầu đẻ ra trứng, ngày chết sinh lý.
+ Số trứng đẻ trên mỗi cá thể cái.
2.5.3. Điều tra biến động số l−ợng rệp sáp , chỉ số hại, tỷ lệ cây bị hại Chọn 3 ruộng mía đại diện trong đó các điều kiện sinh thái, canh tác tương tự như nhau. Điều tra định kỳ từ 10-15 ngày một lần theo phương pháp
điều tra của Nguyễn Công Thuật [31]
Trên mỗi ruộng điều tra 5 điểm theo 2 đ−ờng chéo góc. Mỗi điểm điều tra 15 cây, tiến hành đếm số cây bị rệp hại. Trên mỗi cây chúng tôi qui định chỉ điều tra ở 6 đốt mía ở trên cùng gần ngọn mía, còn khi mía ở giai đoạn còn nhỏ chúng tôi điều tra tất cả các bộ phận của cây, nếu có rệp thì tiến hành phân cấp đếm số l−ợng các cấp rệp.Việc điều tra số l−ợng rệp sáp đ−ợc thực hiện theo ph−ơng pháp điều tra cơ bản sâu hại phân theo 5 cấp.
Cấp 0: không có sâu
Cấp 1: Có lẻ tẻ rải rác, không quá 1/4 diện tích bộ phận hại bị nhiễm rệp.
Cấp 2: Diện tích bộ phận hại do rệp từ 1/4 đến 1/2 , mật ch−a độ dầy đặc.
Cấp 3: Diện tích có rệp 1/2 đến 3/4 , mật độ dầy đặc
Cấp 4: Diện tích có rệp quá 3/4, mật độ dày đặc, bị hại rất nặng.
2.5.4. Vai trò của biện pháp bóc lá mía
Địa điểm điều tra: huyện Thạch Thành- Thanh Hoá .
Ph−ơng pháp điều tra: Điều tra 4 lần vào giai đoạn cây mía mẫn cảm nhất với loài rệp này. Các ruộng mía đ−ợc bóc lá định kỳ và không bóc lá. Điều tra 3 ruộng , mỗi ruộng điều tra 200 cây.
Chỉ tiêu theo dõi: Tính tỷ lệ cây bị rệp của mỗi biện pháp.
2.5.5. ảnh hưởng của các chân đất khác nhau
Địa điểm điều tra: huyện Thạch Thành- Thanh Hoá .
Ph−ơng pháp điều tra: Điều tra 4 lần vào giai đoạn cây mía v−ơn lóng.
Điều tra 3 ruộng , mỗi ruộng điều tra 200 cây.
Chỉ tiêu theo dõi: Tính tỷ lệ cây bị rệp của mỗi biện pháp.
2.5.6. Điều tra tỷ lệ ký sinh ngoài tự nhiên của rệp sáp hồng S. sacchari Chúng tôi tiến hành song song cùng với các ruộng điều tra diễn biến (3 ruộng) và chỉ số hại. Mỗi ruộng chúng tôi điều tra 5 điểm, mỗi điểm điều tra 3 c©y.
2.5.7. Điều tra Phổ ký chủ của rệp sáp
- Ph−ơng pháp điều tra : Điều tra tất cả các loại cây trồng khác nhau xung quanh hoặc gần khu vực trồng mía, các cây cỏ trên ruộng mía.
- Chỉ tiêu theo dõi : Ghi nhận và đánh giá mức độ phổ biến của rệp sáp trên mỗi loại cây mà rệp c− trú và gây hại.
2.5.8. Nghiên cứu biện pháp phòng trừ rệp sáp bằng thuốc bảo vệ thực vật 2.5.8.1 Thử hiệu lực thuốc trong nhà l−ới
* Thuốc bảo vệ thực vật: thí nghiệm gồm 4 công thức, bố trí mỗi công thức phun 3 lần, mỗi lần 3 cây mía trồng trong chậu. Tiến hành thả rệp cái vào các cây mía, sau 5 ngày thì theo dõi số rệp trên mỗi cây, khống chế số l−ợng rệp thí nghiệm là 50 con/ cây thì tiến hành phun.
2.5.8.2 Thử hiệu lực thuốc ngoài đồng
+ Ngoài đồng: Xây dựng thí nghiệm áp dụng các kết quả của thử nghiệm diện hẹp của các biện pháp có hiệu quả cao.
Một thí nghiệm từ 4 công thức, mỗi công thức 3 lần nhắc lại Thí nghiệm bố trí theo kiểu RCB, diện tích ô thí nghiệm 70m2 (gồm 5 hàng mía dài 14 m, khoảng cách hàng 1m) 3 lần nhắc lại, đối chứng không phun thuốc. Mỗi công thức theo dõi 5 điểm, mỗi điểm 5 cây, nhắc lại 3 lần.
2.5.9. Ph−ơng pháp làm mẫu và bảo quản mẫu
* Làm mẫu:
- Mẫu lame: Đối với rệp sáp để dễ định loaị thì phải để mẫu lame để soi qua kính hiển vi. Ph−ơng pháp đ−ợc tiến hành nh− sau:
1. Cho mẫu vào 10% KOH đun nóng nhẹ để làm mềm và tan các chất sáp bao bọc thân thể côn trùng.
2. Rửa bằng nước cất, dùng kim châm 2 bên thân để lấy các chất trong thân thể ra ngoài.
3. Làm trong bằng cồn acid tối thiểu 1 giờ. Dung dịch gồm acidacetic; 20 phần + cồn 50 phần.
4. Nhuộm mẫu bằng acid fuschine ít nhất trong 2 giờ.
5. Rửa bớt thuốc nhuộm trong cồn 950 trong 2 phút.
6. Chuyển sang cồn tuyệt đối để làm khô (3 lần) 7. Nhỏ dầu đinh h−ơng trong 15 phút.
8. Cố định trên lame và gắn lamelle.
* Bảo quản mẫu:
- Bảo quản mẫu khô: Trưởng thành thuộc bộ cánh cứng, cho vào lọ độc sau đó cố định càng cánh bằng kim cắm, sấy khô rồi cho vào hộp kim ghi nh$n và địa điểm thu.
- Bảo quản mẫu −ớt: Cho các pha sâu non thu đ−ợc vào fooc mon 5%
đối với rệp thì bảo quản ở cồn 700C.
* Mô tả hình thái :
Để có thể mô tả kích th−ớc của rệp, hình dạng thân, râu đầu, và màu sắc biến
đỏi của rệp ở các tuổi khác nhau chúng tôi đ$ quan sát mô tả trên kính lúp soi nổi. Riêng về kích th−ớc chiều dài và rộng thân rệp thì chúng tôi tiến hành đo 20 cá thể một pha khi chúng vừa lột xác.
2.5.10. Ph−ơng pháp tính toán:
*Kích th−ớc trung bình cơ thể:
X =
Trong đó:
X : kích th−ớc trung bình của cơ thể Xi: giá trị kích th−ớc của cá thể i n: tổng cá thể theo dõi
* Thời gian phát dục trung bình của cá thể đ−ợc tính theo công thức:
N ; n x =∑Xi i
N X t
X δ
±
=
Trong đó:
X : Thời gian phát dục trung bình
Xi: Thời gian phát dục của n cá thể trong ngày thứ i ni: Số cá thể lột xác trong ngày thứ i
N: Tổng cá thể thí nghiệm.
* Khả năng đẻ trứng (số trứng/1 con cái) Số trứng của 1 con cái =
∑
∑
cái con
dẻ trứng sè
§iÓm cã s©u
* Mức độ phổ biến(%) = x100
Tổng điểm điều tra
∑ Xi ---
n
* Chỉ số hại (%)= .100
. . T N
b
∑a
Trong đó: a: Số l−ợng cá thể bị hại ở mỗi cấp
b: số đốt có cấp rệp tương ứng 0, 1, 2, 3, 4 N: Tổng số đốt mía điều tra
T: cấp rệp hại cao nhất
∑ số cây nhiễm rệp
* Tỷ lệ cây nhiễm rệp = x 100%
∑ sè c©y ®iÒu tra
* Xác định mức độ ảnh hưởng của thuốc hoá học.
- Hiệu lực thuốc hoá học trong phòng thí nghiệm đ−ợc tính theo công thức Abbott.
E(%) = .100
C T C −
Trong đó:
E (%) : Hiệu lực của thuốc
C: Số rệp sống ở công thức đối chứng.
T: Số rệp sống ở công thức thí nghiệm.
Hiệu lực của thuốc hoá học ngoài đồng ruộng đ−ợc tính theo công thức của Henderson – Tilton.
Hiệu lực (%) = . 100
. 1
−
b a
b a
T C
xC T
Trong đó:H: Hiệu lực của thuốc
Ta: Số rệp sống ở công thức thí nghiệm sau khi phun Tb: Số rệp sống ở công thức tr−ớc khi phun
Ca: Số rệp sống ở công thức đối chứng sau khi phun Cb: Số rệp sống ở công thức đối chứng trước xử lý.
• Xử lý số liệu thống kê các chỉ tiêu đ−ợc xử lý thống kê theo ch−ơng tr×nh IRRISTAT, EXCELL, SAS.