PHẦN 2 THỰC iNGHIỆM VÀ KẾT QUẢ
2.3. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM
2.3.1. Kết quả NC ảnh hưởng của pH và chất tăng độ nhớt đến độ tan của norýloxacin trong dung dịch thuốc nhỏ mắt 0,3%
2.3.1.1 Ảnh hưởng của pH
Tiến hành như đã nêu ở mục 2.2.2.1 thu được kết quả như ghi ở bảng 1
Bảng 1: Ảnh hưởng của pH đến độ tan của noríloxađn trong dung dịch thuốc nhỏ mắt 0,3%
Công thức CT1 CT2 CT3 CT4 CT5
pH 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5
Cảm quan Trong Trong Trong Kết tủa Kết tủa
Nhận x é t: Độ tan của noríloxacin trong dung dịch phụ thuộc rất nhiều vào pH. Điều này hoàn toàn phù hợp với nghiên cứu của BA Fừestone và cộng sự [14]. Khi pH của dung dịch noríloxacin 0,3% nhỏ hơn hoặc bằng 5,5 (CT1, CT2, CT3) thì độ tan của noríloxacin không giảm khi để dung dịch ở nhiệt độ là 4° c (không có kết tủa xuất hiện).
Trái lại, khi pH của dung dịch > 5,5 (CT4, CT5) ở nhiệt độ 4° c có xuất hiện kết tủa trong dung dịch, chứng tỏ độ tan của Nor bị giảm. Như vậy, không nên pha thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% có pH >5,5.
2.3.1.2. Ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt
Tiến hành như đã nêu ở mục 2.2.22 thu được kết quả như ghi ở bảng 2 và biểu đồ hình 3.
Bảng 2: Ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt đến độ tan của norAoxacin trong dung dịch thuốc nhỏ mắt 0,3% (n=3)
CT CT6 CT7 CT8 CT9
Chất tăng độ nhớt Không có Manitol
4,6%
PVA 1,4%
HPMC 0,5%
Hàm lượng Nor khi pH = 5,2 (mg/ml)
3,05 3,12 3,06 3,07
Hàm lượng Nor sau khi điều chỉnh pH = 7.4 và lọc (mg/ml)
0,41 0,44 0,72 0,64
0.8/1 0.6
mg/ml 0.4 0.2
0 CT6 CT7 CT8 CT9
B Hàm lượng Nor sau khi điều chỉnh pH
= 7.4 và lọc (mg/ml)
Hình 3 : Biểu đồ so sánh ảnh hưỏng của chất tảng độ nhốt đến độ tan của norfIoxacin
Kết quả nghiên cứu cho thấy: PVA và HPMC có khả năng làm giảm kết tinh trở lại của noiíloxacin đáng kể khi đưa pH của dung dịch về 7,4 giống như khi nhỏ vào mắt, trong khi đó manitol thì gần như không có tác dụng này. Do đó, chúng tôi chọn PVA và HPMC để nghiên cứu tiếp ảnh hưởng của các chất làm tăng độ nhớt đến độ ổn đính của dung dịch thuốc nhỏ mắt noríloxacin 0,3%-
Các chất làm tăng độ nhớt làm giảm khả năng kết tinh trở lại của dược chất là do dung dịch có độ nhớt cao hơn đã làm giảm khả năng hình thành mầm kết tinh. Như vậy, với các dung dịch thuốc nhỏ mắt có thành phần dược chất ít tan như Nor và khi pha chế phải dùng biện pháp cưỡng bức hoà tan bằng cách điều chỉnh pH, thì việc thêm các chất làm tăng độ nhớt, không những có tác dụng kéo dài thời gian lưu thuốc ở vùng trước giác mạc, mà còn có tác dụng lăm giảm kết tinh trở lại của dược chất sau khi nhỏ vào mắt, đảm bảo an toàn và SKD của thuốc.
2.3.2. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt norýĩoxacin 0,3%
2.3.2.1. Ảnh hưởng của ánh sáng
Pha thuốc nhỏ mắt có thành phần như CT* (đệm acetat, pH khoảng 5,2) và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.2.3.1 thu được kết quả như ghi ở bảng 3 và biểu đồ hình 4.
Bảng 3: Kết quả đánh giá ảnh hưởng của ánh sáng đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3 % (n = 3)
Chỉ tiêu
Điều kiện Cảm quan pH Hàm lượng (%)
t = 0 t = 8 tuần
t = 0 t = 8 tuần
oII+-ằ t = 8
tuần Treo ngoài
cửa sổ (bọc)
Trong, không màu
Trong, không màu
5,27 5,26 100,0 98,5
Treo ngoài cửa sổ
Trong, không màu
Trong, vàng
5,27 5,17 100,0 87,0
Trong phòng (bọc)
Trong, không màu
Trong, không màu
5,27 5,25 100,0 99,0
Trong phòng
Trong, không màu
Trong, không màu
5,27 5,27 100,0 97,0
100
95
% Nor còn lại
85 80
Hình 4: Biểu đồ so sánh ảnh hưởng của ánh sáng đến hàm lượng norfloxacin trong dung dịch thuốc nhỏ mắt
Kết quả thí nghiệm cho thấy:
- Về cảm quan: Chỉ có mẫu thuốc nhỏ mắt treo ngoài cửa sổ, không bọc giấy tránh ánh sáng là dung dịch có màu vàng sau thời gian theo dõi, các mẫu khác dung dịch vẫn trong suốt, không màu.
- Về pH: pH của các mẫu đều thay đổi khồng đáng kể trừ mẫu treo ngoài cửa sổ không bọc tránh ánh sáng.
- Về hàm lượng Nor còn lại sau thời gian bảo quản (định lượng bằng HPLC): Với cùng một mẻ pha, chỉ khác nhau về điều kiện bảo quản thì mẫu treo ngoài cửa sổ không tránh ánh sáng hàm lượng Nor bị giảm nhiều nhất (khoảng 13%), rồi đến mẫu để ở điều kiện phòng, không tránh ánh sáng (khoảng 3%). Trong khi các mẫu bảo quản tránh ánh sáng hàm lượng Nor giảm không đáng kể. Điều đó chứng tỏ dược chất Nor rất không bền dưới tác động của ánh sáng. Do đó, chúng tôi đã chọn phương pháp lão hoá cấp tốc dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% bằng cách treo ngoài cửa sổ, không tránh ánh sáng để sơ bộ đánh giá ảnh hưởng của một số yếu tố đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt noríloxacin 0,3%-
2.3.2.2. Ảnh hưởng của pH
Pha dung dịch thuốc nhỏ mắt có thành phần như CT* nhưng điều chỉnh pH ở các mức khác nhau và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.23.2 thu được kết quả như ghi ở bảng 4, bảng 5, bảng 6 và biểu đồ hình 5.
Bảng 4: Kết quả so sánh ảnh hưởng của pH đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về cảm quan
Cảm quan CT
Mới pha Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần) CT1 (pH 4,5) Trong,
không màu
Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, vàng
CT2 (pH 5,0) Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, vàng
CT3 (pH 5,5) Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, vàng
Bảng 5: Kết quả so sánh ảnh hưởng của pH đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về pH
pH CT
Mới pha Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT1 (pH 4,5) 4,55 4,54 4,59 4,57
CT2 (pH 5,0) 5,10 5,10 5,11 5,07
CT3 (pH 5,5) 5,45 5,44 5,43 5,38
Bảne 6: Kết quả so sánh ảnh hưởng của pH đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về hàm lượng (n = 3)
Hàm lượng (%) CT
Mới pha
Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c ' (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT1 (pH 4,5) 100,0 96,7 97,6 92,8
CT2 (pH 5,0) 100,0 95,6 97,4 91,0
CT3 (pH 5,5) 100,0 98,0 97,8 93,0
Hình 5: Biểu đồ so sánh ảnh hưởng của pH đến hàm lượng Nor trong dung dịch thuốc nhỏ mắt norAoxacỉn 0,3%
Nhận xét:
- Về cảm quan: Cả 3 CT thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% pha ở các pH khác nhau, khi bảo quản ở điều kiện phòng và tủ ấm sau 2 tháng đều không bị biến màu, nhưng đều bị vàng sau khi treo ngoàỉ cửa sổ 2 tuần.
- Về pH: pH của các dung dịch thuốc nhỏ mắt khi bảo quản ở 3 điều kiện đều thay đổi không đáng kể.
- Về hàm lượng:
+ Hàm lượng Nor của cùng một CT khi bảo quản ở tủ ấm bị giảm ít hơn khi bảo quản ở điều kiện phòng và ít hơn nhiều khi treo ngoài cửa sổ. Có thể do để ở tủ ấm 50° c, mặc dù nhiệt độ cao nhưng vì không có ánh sáng tác động, nên dung dịch ổn định hơn. Điều này một lần nữa cho thấy: Bảo quản thuốc nhỏ mắt Nor tránh ánh sáng là hết sức cần thiết, để đảm bảo độ ổn định của thuốc.
+ Mặc đù thời gian theo dõi còn ngắn (2 tháng), bước đầu nhận thấy pH có ảnh hưởng đến độ ổn định của đung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3%ô Dung dịch cú pH = 5,5 ổn định hơn dung dịch cú pH =5,0 và 4,5.
2.3.2.3. Ảnh hưởiig của hệ đệm và nồng độ đệm Ảnh hưởng của hệ đệm:
Pha các dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% có thành phần như CT* nhưng điều chỉnh pH bằng các hệ đệm khác nhau và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.2.2.3. Bước đầu thu được kết quả như ghi ở bảng 7
Bảng 7: Ảnh hưởng của hệ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về độ trong
CT CT10 CT11 CT12 CT13 CT14
Hệ đệm
Acetat 0,1M
Borat 0,3M
Lactat 0,1M
Phosphat 0,1M
Citrat 0,1M Cảm
quan
Trong suốt
Trong suốt
Trong suốt
Có kết tủa
Có kết tủa
Sau một thời gian theo dõi chúng tôi nhận thấy: Dùng hệ đệm phosphat và đệm citrat để pha thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% có xuất hiện kết tủa trong dung dịch, có thể do có tương kỵ với Nor, còn các hệ đệm acetat, borat, lactat thì dung dịch vẫn trong suốt. Do đó các cổng thức CT10, CT11, CT12 tiếp tục được theo dõi ảnh hưởng của hệ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3%. Kết quả đánh giá các chỉ tiêu về độ ổn định của CT10, CT11,CT12 được trình bày ở bảng 8, bảng 9, bảng 10 và biểu đồ hình 6.
Bảng 8: Ảnh hưởng của hệ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mát Nor 0,3% về cảm quan
CT Cảm quan
Mới pha Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần) CT10 Trong, không
màu
Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, vàng CT11 Trong, không
màu
Trong, không màu
Trong, không màu
Trong, vàng CT12 Trong, không
màu
Trong, khổng màu
Trong, không màu
Trong, vàng Bảng 9: Ảnh hưởng của hệ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mát Nor 0,3% về pH
CT pH
Mới pha Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c
(2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT10 5,25 5,24 5,26 5,24
CT11 5,20 5,15 5,16 4,89
CT12 5,23 5,22 5,20 5,20
I
Bâng 10: Ảnh hưởng của hệ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về hàm lượng (n = 3)
CT Hàm lượng (%)
Mới pha Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT10 100,0 97,0 98,4 94,3
CTll 100,0 96,1 97,2 91,0
CT12 100,0 95,2 96,9 89,0
100
98 96 94
% Nor c ò n lạ i 92 90 88
86
84 ,
Trong Tủ ẩm Treo ở
phòng cửa sổ
Hình 6 : Biểu đồ so sánh ảnh-hưởng của hệ đệm đến hàm lượng Nor trong dung dịch thuốc nhỏ mắt
Nhận xét:
- Về cảm quan: cả 3 c r thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% pha với các hệ đệm khác nhau (pH như nhau), khi bảo quản ở điều kiện phòng và tủ
ấm sau 2 tháng đều không bị biến màu, nhưng đều bị vàng sau khi treo ngoài cửa sổ 2 tuần.
- Về pH: pH của CT10 (đệm acetat), CT12(đệm lactat) bảo quản ở cả 3 điều kiện thay đổi không đáng kể. Trong khi đó, pH của CT11 giảm rõ rệt, nhất là khi treo ngoài cửa sổ do CT11 dùng đệm borat
0,3M có khả năng đệm quá thấp.
- Về hàm lượng norũoxacin: Hàm lượng norũoxacin còn lại ở CT12 < CT11 < CT10 khi bảo quản ở cả 3 điều kiện. Điều đó chứng tỏ, dung dịch noríloxacin 0,3% pha trong đệm acetat bền vững hơn khi pha trong đệm borat hoặc đệm lactat. Do đó, chúng tôi chọn đệm acetat để nghiên cứu tiếp ảnh hưởng của nồng độ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt noríloxacin 0,3%-
Ảnh hưởng của nồng độ đệm:
Pha các dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% có thành phần như CT* có pH = 5,2 điều chỉnh pH bằng hệ đệm acetat có nồng độ khác nhau và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.2.2.3. Thu được kết quả như ghi ở bảng 11', bảng 12, bảng 13 và biểu đồ hình 7.
Bảng 11: Ảnh hưởng của nồng độ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về cảm quan
CT Nồng độ
đệm acetat
Cảm quan Mới pha Trong phòng
(2 tháng)
Tủ ấm 50°
c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần) CT15 0,10 M không màu không màu không màu Màu vàng CT16 0,05M không màu không màu không màu Màu vàng
Bảng 12: Ảnh hưởng của nồng độ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về pH
CT Nồng
độ đệm acetat
pH Mới
pha
Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT15 0,10 M 5,25 5,24 5,25 5,20
CT16 0,05M 5.21 5,20 5,20 5,15
Bảng 13: Ảnh hưởng của nồng độ đệm đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về hàm lượng (n = 3)
CT Nồng
độ đệm acetat
Hàm lượng (%) Mới pha Trong phòng
(2 tháng)
Tủ ấm 50° c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT15 0,10 M 100,0 98,1 98,7 95,5
CT16 0,05M 100,0 98,7 99,0 97,0
% Nor còn lai
99 98 97 96 95 94 93
h ipRplm Ib h i
~ wWễm S o i
's' PHI í* m i mầm
' m ầ ỳ- m M M □ CT15 aC T lổ .Jầ
trong phòng
tủ ấm ngoài cửa sổ -
Hình 7: Biểu đồ so sánh ảnh hưởng của nồng độ đệm đến hàm lượng norAoxacin trong dung dịch thuốc nhỏ mắt
Nhận xét:
- Về cảm quan: Cả hai công thức thuốc nhỏ mắt bảo quản ở điều kiện phòng và tủ ấm sau hai tháng đều không bị biến màu, nhưng đều bị vàng sau khi treo ngoài cửa sổ hai tuần.
- Về pH : pH của cả hai công thức bảo quản ở 3 điều kiện đều thay đổi không đáng kể. Điều đó chứng tỏ, đệm acetat 0,05M vẫn có khả năng đệm đủ để duy trì pH của thuốc nhỏ mắt.
- Về hàm lượng : Hàm lượng Nor còn lại ờ CT16 > CT15 khi bảo quản ở cả 3 điều kiện. Chứng tỏ, Nor trong dung dịch đệm acetat 0,05M bền vững hon trong dung dịch đệm acetat 0,1M. Do đó nên chọn dung dịch đệm acetat 0,05M để pha thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% để thuốc đỡ kích ứng khi nhỏ vào mắt, đồng thời vẫn cho độ ổn định cao và vẫn duy trì được pH ổn định trong quá trình bảo quản.
2.3.2.4. Ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt
Bảng 14: Ảnh hưởng của chất làm tãng độ nhớt đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về cảm quan
CT Chất tăng độ nhớt
Cảm quan Mới pha Để ở phòng
(2 tháng)
Tủ ấm 50° c
(2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần) CT17 PVA 0,5% Không màu Không màu Không màu Màu vàng CT18 PVA 0,25% Không màu Không màu Không màu Màu vàng CT19 HPMC 0,2% Không màu Không màu Không màu Màu vàng CT20 HPMC 0,1% Không màu Không màu Không màu Màu vàng Pha các CT thuốc nhỏ mắt có thành phần như CT*, dùng hệ đệm acetat 0,05M, pH = 5,2 nhưng có thêm các chất tăng độ nhớt ở các
nồng độ khác nhau và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.2.2A.
Thu được kết quả như ghi ở bảng 14, 15, 16 và biểu đồ hình 8.
Bảng 15: Ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về pH
CT Chất tăng độ nhớt
pH Mới
pha
Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50°c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT17 PVA 0,5% 5,21 5,20 5,20 5,13
CT18 PVA 0,25% 5,24 5,24 5,23 5,17
CT19 HPMC 0,2% 5,21 5,20 5,21 5,14
CT20 HPMC 0,1% 5,24 5,24 5,25 5,18
Bảng 16: Ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3% về hàm lượng (n = 3)
CT Chất
tăng độ nhớt
Hàm lượng(%) Mới
pha
Trong phòng (2 tháng)
Tủ ấm 50°c (2 tháng)
Ngoài cửa sổ (2 tuần)
CT17 PVA
0,5%
100,0 98,0 98,4 94,5
CT18 PVA
0,25%
100,0 98,1 98,3 95,5
CT19 HPMC
0,2%
100,0 97,9 98,4 94,5
CT20 HPMC
0,1%
100,0 97,5 98,2 96,0
Hình 8: Biểu đồ so sánh ảnh hưởng của chất làm tăng độ nhớt đến hàm lượng Nor trong dung dịch thuốc nhỏ mắt
Nhận x é t:
- Về cảm quan : Cả 4 công thức bảo quản ở điều kiến phòng và tủ ấm sau hai tháng đều không bị biến màu, nhưng đều có màu vàng sau khi treo ngoài cửa sổ hai tuần.
- Về pH: pH của cả 4 công thức bảo quản ở 3 điều kiện đều thay đổi không đáng kể.
- Về hàm lượng : Hàm lượng Nor còn lại ở 4 CT chênh lệch nhau không đáng kể, chứng tỏ chất tăng độ nhớt ít ảnh hưởng đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3%-
2.3.2.5. Ảnh hưởng của chất sát khuẩn
Pha các CT thuốc nhỏ mắt có thành phần như CT*, dùng hệ đệm acetat 0,05M, pH = 5,2, nhưng có chất sát khuẩn khác nhau và tiến hành đánh giá như đã nêu ở mục 2.22.5. Kết quả đánh giá các chỉ tiêu
I
về độ ổn định sau khi treo ngoài cửa sổ 2 tuần được trình bày ồ bảng 17.
Bảng 17: Ảnh hưởng của chất sát khuẩn đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3%
CT Chất sát
khuẩn
Chỉ tiêu
Cảm quan pH % hàm lượng
t = 0 t = 2 tuần
t = 0 t = 2 tuần
t = 0 t = 2 tuần CT21 Benzalko-
nium clorid
Không màu
Màu vàng
5,25 5,20 100,0 94,0
CT 22 Thimerosal Không màu
Màu vàng
5,23 5,21 100,0 93,4
Nhận xét:
- Về cảm quan: Cả 2 CT đều bị biến màu sau 2 tuần treo ngoài cửa sổ.
- Về pH: pH của 2 CT thay đổi không đáng kể.
- Về hàm lượng: Hàm lượng noríloxacin còn lại ở 2 CT chênh lệch nhau không nhiều, chứng tỏ chất sát khuẩn ít ảnh hưởng đến độ ổn định của dung dịch thuốc nhỏ mắt norAoxacin 0,3%. Nhưng benzalkonium clorid ngoài tác dụng sát khuẩn còn có tính diện hoạt, do đó nên dùng benzalkonium clorid làm chất sát khuẩn.
23.2.6. Ảnh hưởng của chất chống oxy hoá
Tiến hành như đã nêu ở mục 2.2.2.6. Mẫu sau khi pha chế được treo ngoài cửa sổ 2 tuần đã nhận thấy: Dung dịch pha theo CT có thêm chất chống oxy hoá có màu vàng nhanh và đậm hơn dung dịch pha
theo CT không có chất chống oxy hóa. Chứng tỏ norlloxacin bị phân huỷ không phải do phản ứng oxy hoá, đồng thời rất có thể chất chống oxy hoá thêm vào CT thúc đẩy phản ứng quang hoá phân huỷ norAoxacin. Như vậy, không thêm chất chống oxy hoá vào dung dịch thuốc nhỏ mắt Nor 0,3%.
2.3.2. Kết quả nghiên cứu thử tác ílụng trên in vitro của một số công thức thuốc nhỏ mătNor 0,3%
Việc đánh giá tác dụng sinh học trên in vitro của thuốc nhỏ mắt hiện gặp rất nhiều khó khăn. Với mục đích làm thế nào để có thể so sánh được ảnh hưởng của các chất thêm vào trong một CT thuốc nhỏ mắt có tác động đến tác dụng sinh học của thuốc như thế nào, chúng tôi thử áp dụng phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu của một vài dung dịch thuốc nhỏ mắt norfloxacin trên 2 chủng vi khuẩn kiểm định. Tiến hành như đã trình bày ở mục 2.2.4 trên 4 CT có thành phần như ghi ở bảng 18.
Bảng 18: Các công thức thử in vitro :
CT / thành phần Borat Acetat PVA
CT23 (pH 5,2) — + +
CT 24 (pH 6,0) — + +
CT 25 (pH 5,2) + — +
Biệt dược Noríìox
Kết quả xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của các công thức trên 2 vi khuẩn Pseudomonas aeruginossa và Staphylococcus aureus được trình bày ở bảng 19, bảng 20.