2.1 Nội dung nghiên cứu
Nội dung 1: Xác định được hiện trạng của sâu đầu den hại dừa O. arenosella tại huyện Mỏ Cày Nam, tỉnh Bến Tre.
Nội dung 2: Ảnh hưởng của thuốc Bảo vệ Thực vật đến OKS nhộng 7' pupivorus.
2.2 Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Đề tài được thực hiện từ tháng 5/2022 đến tháng 10/2022 tại tỉnh Bến Tre. Các thí nghiệm được tiến hành tại phòng thí nghiệm tại Chi cục Trồng trọt va Bảo vệ Thực vật tinh Bến Tre.
2.3 Vật liệu và dụng cụ sử dụng trong phòng thí nghiệm
Vật liệu nhân nuôi: Lá cây dừa, hộp nhựa có kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm,
lồng mica 30 x 30 x 25 em.
Vật liệu thí nghiệm: hộp nhựa tròn đường kính 10 cm, cao 6,5 cm, hộp nhựa 17
x 11,6 x 5,6 cm, bao tay, cân tiéu ly, kep gap con trùng, hộp nhựa kích thước 28,5 x 17 x 9,2 cm, số tay ghi chép.
OKS nhộng 7' pupivorus, sâu đầu đen hai đừa O. arenosella, hoạt chất Emamectin benzoate 5% liều lượng 0,5 g/L nước, Flubendiamide 20% liều lượng 0,4 g/L nước.
Phanh gắp côn trùng chuyên dụng, cọ quét mẫu, kéo cắt cành, kéo nhỏ, bình xịt thuốc (2L), đao, kéo, bao tải, đầu cắt lưỡi liềm trên cao.
2.4 Phương pháp nghiên cứu
2.4.1 Điều tra hiện trạng sâu đầu đen hại dừa tại Bến Tre
Phương pháp nghiên cứu:
Điều tra hiện trạng sâu đầu den hại dừa O. arenosella tại 3 xã Da Phước Hội, Phước Hiệp, Tân Trung của huyện Mỏ Cay Nam, tỉnh Bến Tre. Mỗi xã điều tra 10 vườn dé đánh giá mức độ gây hại của sâu đầu đen hại dừa O. arenosella và mỗi vườn có diện tích tối thiểu là 5000 m”.
Mỗi vườn điều tra 5 điểm ngẫu nhiên trên 2 đường chéo góc của vườn điều tra, mỗi điểm điều tra 10 cây. Trên mỗi điểm chọn một cây ngẫu nhiên thu thập 30 lá chét (các lá nằm giữa tàu dừa), mỗi lá chét được kiểm tra dưới kính lúp soi nổi cầm tay để xác định số lượng (sâu non, nhộng) có trên 30 lá chét đó. Trên vườn ghi nhận số lượng dừa bị gây hại, số lượng tàu lá bị hại, đánh giá các cấp độ theo tiêu chuẩn thang phân cấp (5 cấp hại) của Cục BVTV (2020).
Chỉ tiêu ghi nhận:
- Ty lệ (%) số cây bị hại trên vườn: = (số lượng cây bi sâu đầu đen hại dừa
gây hạ1⁄50) x 100
- Tỷ lệ (%) tàu lá bị hai = (số tàu lá bị hại / tong số tàu lá điều tra) x 100 - Phan cấp đánh giá mức độ hại như sau:
CO: Tau lá không bi hại
15
C1: Tau lá có < 20% lá chét bị hai C2: Tàu lá có 21 — 40% lá chét bị hại C3: Tàu lá có 41 — 60% lá chét bị hại C4: Tàu lá có 61 — 80% lá chét bị hai C5: Tàu lá có > 80% lá chét bị hại
- Chỉ số hại (%) =[(NI x 1) + (N2 x 2) +... (N5x 5)]/(N x5) x 100
- Trong đó:
NI là số tàu lá bị hại ở cấp 1 N2 là số tàu lá bị hại ở cấp 2 N3 là số tàu lá bị hại ở cấp 3 N4 là số tàu lá bị hại ở cấp 4 N5 là số tàu lá bị hại ở cấp 5
5 là cấp hại cao nhất của thang phân cấp N là tổng số tàu lá điều tra
Mật số sâu non sâu đầu đen hại đừa (con/30 lá chét) Mật số nhộng sâu đầu đen hại dừa (nhộng/30 lá chét)
Hình 2.2 Nhân nguồn nhộng sâu đầu đen O. arenosella
Thu thập nguồn sâu đầu den O. arenosella trên các vườn dita bị hại tại tỉnh Bến Tre. Sâu đầu đen sẽ được cho vào hộp nhân nuôi có dé sẵn lá dừa trong phòng thí nghiệm tai Chi cục Trồng trọt và BVTV tỉnh Bến Tre (trong điều kiện nhiệt độ 28 +
2°C, am độ 70 + 5%, thời gian chiếu sáng là 12 giờ). Nuôi cho đến khi sâu hóa nhộng cho vào lồng nhân nuôi côn trùng (kích thước 30 x 30x 25 cm) dé sâu vũ hóa, đẻ trứng tiếp tục nuôi trứng (thé hệ F1) cho đến khi số sâu F1 hóa nhộng đủ số lượng dé làm thi nghiệm. Thay lá dừa từ 2 — 3 ngày một lần nhằm đảm bảo có đủ nguồn thức ăn cho sâu.
Thu thập nguồn 7: pupivorus, sau đó cho 10 cặp 7 pupivorus tiếp xúc với 50 nhộng sâu đầu đen F1 (trong 24 giờ) cho ong ký sinh đẻ trứng. Sau đó tách riêng số nhộng đã được ký sinh và đợi ong ký sinh vũ hóa, thu F1 tiếp tục lấy F1 nhân nuôi và thu F2 lấy nguồn dé làm thí nghiệm.
Hình 2.3 Nhân nguồn OKS nhộng 7. pupivorus
2.4.3 Sử dung nhộng sâu đầu đen O. arenosella và lá dừa tam thuốc BVTV
Phương pháp thực hiện
Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố với 3 nghiệm thức thức, 3 lần lặp lại, trong đó 2 nghiệm thức sử dụng 2 loại thuốc BVTV là Flubendiamide (liều lượng 0,4 g/L nước) và Emamectin benzoate (liều lượng 0,5 g/L nước), 1 nghiệm thức đối chứng nước. Mỗi nghiệm thức sử dụng 20 nhộng sâu đầu đen (3 ngảy tuổi) và theo déi 50 cá thé OKS nhộng 7: pupivorus (1 ngày tuôi).
Chuẩn bị lá dừa cho thí nghiệm, lá được thu về từ vườn chưa phun thuốc ở Bến Tre, lá được lau sạch lại với nước và dé khô tự nhiên, kế tiếp cắt lá dừa với chiều dai 10 — 13 cm, nhúng lá và nhộng vào dung dịch có hoạt chất tương ứng với từng nghiệm
17
thức trong 3 giây, sau đó dùng kẹp vớt ra để khô tự nhiên rồi xếp đều vào các hộp nhựa kích thước 17 x 11,6 x 5,6 cm, mỗi hộp nhựa chứa 7 lá dừa đã nhúng dung dịch.
Sau đó thả OKS 7: pupivorus và nhộng sâu đầu đen vào hộp nhựa có chứa lá dừa đã nhúng dung dịch, cho 50 cá thé OKS nhộng 7: pupivorus tiếp xúc với 20 nhộng sâu dau đen đã được nhúng thuốc BVTV có chứa hai hoạt chất là Emamectin benzoate 5%
liều lượng 0,5 g/L nước và hoạt chất Flubendiamide 20% liều lượng 0,4 g/L nước trước đó. Thí nghiệm được theo dõi hàng ngày đến thế hệ OKS tiếp theo.
Chỉ tiêu theo dõi
- Số ong ký sinh chết hàng ngày tại các thời điểm theo đối (con/ngày) - _ Số lượng ong ký sinh vũ hóa thé hệ tiếp theo (con)
- Vong đời (ngày)
- Kha năng gây chết ong ký sinh được tính theo công thức của Abbott:
Kha năng gây chết (%) = ((Ca — Ta)/Ca)x100
- Trong đó:
Ta: Số ong ký sinh sống ở nghiệm thức sau xử lý
Ca: Số ong ký sinh sống ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý.
2.4.4 Sử dụng thuốc BVTV dé phun trực tiếp
Phương pháp thực hiện
Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố với 3 nghiệm thức, 3 lần lặp lại, trong đó 2 nghiệm thức sử dụng 2 loại thuốc BVTV là Flubendiamide (liều lượng 0,4g/L nước) và Emamectin benzoate (liều lượng 0,5 g/L nước), 1 nghiệm thức đối chứng nước. Mỗi nghiệm thức sử dụng 20 nhộng sâu đầu đen ( 3 ngày tuổi) và theo đối 50 cá thể OKS nhộng 7: pupivorus (1 ngày tuổi).
Cho 20 nhộng sâu đầu đen và 50 cá thé OKS nhộng 7: pupivorus vào hộp nhựa kích thước 17 x 11,6 x 5,6 cm tồi tiến hành phun trực tiếp thuốc Emamectin benzoate với liều lượng 0,5 g/L nước và Flubendiamide liều lượng 0,4 g/L nước lên OKS nhộng T. pupivorus. Thí nghiệm được theo déi hàng ngày đến thế hệ OKS tiếp theo.
Chỉ tiêu theo dõi
- Số ong ký sinh chết hàng ngày tại các thời điểm theo đối (con/ngay) - Số lượng ong ký sinh vũ hóa thé hệ tiếp theo (con)
- Vòng đời (ngày)
- Khả năng gây chết ong ký sinh được tinh theo công thức của Abbott:
Kha năng gây chết (%) = ((Ca — Ta)/Ca)x100
- Trong đó:
Ta: Số ong ký sinh sống ở nghiệm thức sau xử lý
Ca: Số ong ký sinh sống ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý.
2.4.5 Sử dụng thuốc BVTV để xông hơi
Phương pháp thực hiện
Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố với 3 nghiệm thức, 3 lần lặp lại, trong đó 2 nghiệm thức sử dụng 2 loại thuốc BVTV là Flubendiamide (liều lượng 0,4 g/L nước) và Emamectin benzoate (liéu lượng 0,5 g/L nước), 1 nghiệm thức đối chứng nước. Mỗi nghiệm thức sử dụng 20 nhộng sâu đầu đen (3 ngày tuổi) và theo dõi 50 cá thể OKS nhộng 7 pupivorus (1 ngày tuổi).
Chuẩn bị lá dừa cho thí nghiệm, lá được thu về từ vườn chưa phun thuốc ở Bến Tre, lá được lau sạch lại với nước và dé khô tự nhiên, kế tiếp cat lá dừa với chiều dài 10 — 13 cm, rồi xếp đều vào các hộp nhựa kích thước 17 x 11,6 x 5,6 cm, mỗi hộp
nhựa chứa 7 lá dừa.
Cho 20 nhộng sâu đầu đen và 50 cá thé OKS nhộng 7 pupivorus vào trong hộp nhựa vuông có chứa lá dừa sẵn, sau đó sử dụng bông gòn có tâm dung dịch thuốc Emamectin benzoate liều lượng 0,5 g/L nước và Flubendiamide liều lượng 0,4 g/L nước bỏ vào trong hộp nhựa đã chuẩn bị. Thí nghiệm được theo dõi hàng ngày đến thế hệ OKS tiếp theo.
Chỉ tiêu theo dõi
- _ Số ong ký sinh chết hàng ngày tại các thời điểm theo dõi (con/ngay) - _ Số lượng ong ký sinh vũ hóa thé hệ tiếp theo (con)
- Vong đời (ngay)
- Kha năng gây chết ong ký sinh được tinh theo công thức của Abbott:
Khả năng gây chết (%) = ((Ca — Ta)/Ca)x100
- Trong đó:
Ta: Số ong ký sinh sống ở nghiệm thức sau xử lý
19
Ca: Số ong ký sinh sông ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý 2.5 Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu được thu thập và xử lý bằng phần mềm Microsoft Excel 2010 và xử lý thong kê bằng phần mềm Rstudio.
Chương 3