3.1. Khảo sát cấu trúc hợp chất 1
Hợp chat 1 dược phân lập từ phân đoạn MI.3 với một số tính chất như sau:
- Là chất rắn có đạng bột trắng, tan tốt trong dung môi chloroform.
- Vết của hợp chất 1 trên TLC không hấp thụ UV.
- Sắc kí lớp mỏng hợp chat 1 giải li với hệ dung môi n-hexane — ethyl acetate
§:2, cho vết hiện hình bằng dung dịch sulfuric acid 20%, sấy nóng thì xuất hiện vết mau hỏng tươi.
- Phê 'H-NMR (chloroform-d, 600 MHz) (Phụ lục 1, Bang 3.1)
- Pho C-NMR (chloroform-d, 150 MHz) (Phụ lục 2, Bang 3.1)
Biện luận cấu trúc
Trên phô 'H-NMR xuất hiện một tín hiệu của proton olefin tai én 5.24 (1H, 4,7
= 1.2 Hz, H-12), một tin hiệu của proton methine gắn trên carbon mang oxygen (—O-CH<) tại ồn 4.50 (1H, dd, J = 6.0/3.6 Hz, H-3). Ngoài ra còn xuất hiện tin hiệu proton của tám nhóm methyl, trong đó có một nhóm methyl liên kết với nguyên tử
carbon nhóm carboxyl (CH:-COO) ở Sy 2.04 (3H, s, H-2') va bảy nhóm methyl con
lại ở vùng từ trường cao dy 1.10 — 0.75, gồm năm mũi đơn và hai mũi đôi [ồu 1.08
(s, H-27), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, H-29), 0.96 (s, H-26), 0.87 (s, H-23), 0.86 (d, J = 6.0 Hz, H-30), 0.85 (s, H-24), 0.78 (s, H-25)].
Pho "C-NMR xuất hiện 32 tin hiệu của carbon. Trong đó xuất hiện hai tin hiệu cua carbon nhóm carboxyl tại dc 182.8 (C-28) va 171.0 (C-1)). Ở vùng carbon olefin ghi nhận hai tín hiệu ở dc 138.0 (C-13) và 125.8 (C-12) chứng tỏ hợp chất có một nỗi
đôi dang -CH=C<. Ngoai ra còn có một carbon mang oxygen cho tín hiệu ở dc §1.0
(C-3).
Từ những dit liệu NMR trên có thé dự đoán hợp chat 1 là một triterpenoid có cấu trúc tương tự ursolic acid mang một nhóm acetyl.
14
Kết hợp so sánh với dit liệu pho '"°C-NMR và 'H-NMR của 3/-0-acetylursolic acid [17] thấy cú sự tương đồng. Do đú hợp chat 1 được đẻ nghị là 3/-ỉ-acetylursolic
acid.
Hình 3.1. Cấu trúc hoá học của hợp chất 1
Bảng 3.1. Dữ liệu phố NMR của hợp chat 1 với 3/-ỉ-acetylursolie acid [17].
Hop chat 1 (chloroform-d) 3/-O-acetylursolic acid (pyridine-ds
383 | 8A
_ 236, | ____ | 244 | |
| 81.0 | 4.50 (dd, 10.8/5.4) | 809 | 447(44113⁄43) |
| 37 | | 30 | - `
—————18.2 18.6
| 329 | | 8S
| 395 | - | 40 | — - — |
45s | | 49 | |
138.0 139.4 42.6 28.1 28.8 24.1 25.0 48.0 48.2
52.6 2.18 (d, 10.8) 53.6 2.62 (d, 11.3 38.8 39.5
39.0 39.6 30.6 31.2
15
22 | 369 | | 37⁄6 —|
23 0.89 (s)
24 0.86 (s
25 0.81 (s)
26 1.00 (s
28 182.8 = 180.1 —
29 0.95 (¿, 6.0 1.00 (á, 6.4
30 0.86 (d, 6.0) 0.95 (đ, 5.5)
DI | 1710 | = | 707 =
2 | 212 2.05 (s) 213 2.05 (s)
3.2. Khảo sát hợp chất 2
Hợp chất 2 được phân lập từ phân đoạn M1.4 với một số tính chất như sau:
- Là chất rắn có đạng bột trắng, tan tốt trong dung môi acetone.
- Vết của hợp chất 2 trên TLC không hấp thụ UV.
- Sắc kí lớp mỏng hợp chất 2 giải li với hệ dung môi n-hexane — ethyl acetate 8:2, cho vết hiện hình bang dung dịch sulfuric acid 20%, sấy nóng thì xuất hiện vết màu hồng tươi.
- Pho 'H-NMR (acetone-ds, 600 MHz) (Phụ lục 3, Bang 3.2)
- Pho C-NMR (acetone-ds, 150 MHz) (Phụ lục 4, Bảng 3.2) - Phổ HSQC (acetone-ds) (Phu luc 5)
- Phố HMBC (acetone-ds) (Phụ lục 6)
Biện luận cấu trúc
Trên phô 'H-NMR xuat hiện hai tin hiệu của proton olefin tại ồu 6.02 (1H, dd,
J = 10.8/1.2 Hz, H-11) và ôn 5.57 (1H, dd, J = 10.8/3.0 Hz, H-12), một tín hiệu của
proton methine gắn trên carbon mang oxygen (-O-CH<) tại ồn 3.16 (1H, dd, J =
11.4/4.8 Hz, H-3). Ngoài ra có những tín hiệu proton của bảy nhóm methyl tai vùng
từ trường cao dy 1.25 — 0.75, gồm năm mũi đơn và hai mũi đôi [54 1.22 (s, H-27),
1.03 (s, H-26), 1.02 (d, J = 6.0 Hz, H-30), 0.98 (s, H-24), 0.94 (d, J = 6.0 Hz, H-29), 0.92 (s, H-25), 0.78 (s, H-23)].
Phô !3C-NMR kết hợp với phô HSQC xuất hiện 30 tín hiệu của carbon, trong đó có bay carbon bậc bốn, tám carbon methine (CH), tam carbon methylene (CH2),
bay carbon methyl (CH:). O vùng carbon nhóm carboxyl ghi nhận được một tín hiệu ở Sc 179.4 (C-28). Ở vùng carbon olefin ghi nhận hai tín hiệu ở S¢ 133.9 (C-11) va ở 3c 129.9 (C-12) chứng tỏ trong hợp chat có một nỗi đôi dạng -CH=CH-. Ngoài ra có
hai tín hiệu carbon mang oxygen gdm một carbon bậc bốn (O-C) có tín hiệu ở ồc 89.6
(C-13) và một carbon methine (-O-CH<) có tín hiệu ở dc 78.4 (C-3).
Từ những dữ liệu NMR trên kết hợp với phô HMBC có thé dự đoán hợp chất 2 có cầu trúc của một triterpenoid khung ursane. Trong đó proton ồu 0.98 (s, H-23) và
0.78 (s, H-24) có tương quan với carbon của nhau [dc 16.7 (C-24), 28.0 (C-23)], cùng
cho tương quan với một carbon bậc bốn Sc 39.6 (C-4) và một carbon methine mang
oxygen dc 78.4 (C-3) giúp dự đoán có một nhóm hydroxy ở vi trí C-3. Proton của
nhóm methyl có ðu 1.22 (s, H-27) cho tương quan với carbon bậc bốn mang oxygen
dc 89.6 (C-13) giúp dự đoán nhóm hydroxy thứ hai ở vị trí C-13. Proton của hai nhóm methyl mũi đơn còn lại [ồn 1.03 (s, H-26), 0.92 (s, H-25)] và hai proton olefin [ồn 6.02 (dd, 10.8/1.2, H-11), 5.57 (dd, 10.8/3.0, H-12)] có tương quan với carbon
methine Sc 53.6 (C-9). Mặt khác cả hai proton olefin H-11 và H-12 đều có tương
quan với carbon C-13 và một carbon methine dc 61.1 (C-18) giúp dự đoán vị trí của
noi đôi là giữa hai carbon C-11 và C-12. Ngoài ra proton methine 54 1.63 (m, H-18)
có tương quan với carbon của nhóm carboxyl C-28 giúp dự đoán vị trí của nhóm carboxyl là ở C- L7.
Kết hợp so sánh với dit liệu phổ của 3/813/đ-đihydroxyurs-lI-en-2§-oic acid [18] thấy có sự tương đồng. Do đó hợp chất 2 được đẻ nghị là 3/,13/&dihydroxyurs-
11-en-28-oic acid,
17
Hình 3.2. Cấu trúc hoá học và một số tương quan HMBC của hợp chất 2
Bảng 3.2. Dữ liệu pho NMR của hợp chat 2 với 3/4,13/+dihydroxyurs-11-en-28-
oic acid [18].
3.16 (dd, 11.4/4.8)
18
| 3/213/-dihydroxyurs-l1-en-28-ọc
79.
39.1
55.0 17.9 29.9 _— 41,9 533
acid (chloroform-d)
dn (ppm) (J-Hz
0 | 371 | = |} 366 | — =_ | ul
12
3 | 896 | = | 89 J = |
4 | 47 | = | 42 | = | 5 | 26/2 || 25⁄8 | ______ |
l6 | 235 | |} 230 |]
j7 | 4⁄6 | -= | 43 | = |
8 | 61Ð fT
J9 | 386 | 7; KS
20 | 409 | j 45 | |
21 | 314đ fo |} 3Q |) —]
2 | 32232 | | GT |
23 | 282 | 0986 | 280 | 0946
244 | 156 | 0786 j 151 | 078 `
25
26
28 179.4 - 180.1 =
29 | 181 | 10260) 180 | 100(đ63)
30
19