2.1. Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài
Thời gian: Từ tháng 11/2021 đến tháng 4/2022
Địa điểm: Phòng khám Thú Y Pet Home 648 Nguyễn Duy Trinh, Bình Trưng Tây, Tp. Thủ Đức; Phòng khám Thú Y L39 số 2 lô 33, Phạm Thế Hiển, phường 4,
Quận 8.
2.2. Đối tượng khảo sát
2.2.1. Cách chọn chó khảo sát
2.2.1.1. Nguồn chó
Chó được đưa đến khám và điều trị tại 2 phòng khám Thú Y (phòng khám Thú
Y Pet Home, phòng khám Thú Y L39).
2.2.1.2. Khảo sát chó nhiễm bệnh Carré, Parvovirus
Chọn chó có các biéu hiện triệu chứng bệnh do nhiễm Carré, Parvovirus và có
kết quả dương tính với các xét nghiệm test nhanh.
2.2.2. Mẫu khảo sát
Mẫu máu: được lấy vào budi sáng, lúc chó chưa ăn uống và đựng trong lọ vô
trùng.
Máu kháng đông: 2ml máu trong ống chứa 0.6 mg heparin hoặc 1% EDTA (do công ty Nam Khoa cung cấp).
Huyết tương: không dung huyết, ly tâm 3000 vòng/ phút trong 5 phút, hút
phần bên trên đề đo các chỉ tiêu sinh hóa.
2.3. Vật liệu và thiết bị
Huyết thanh không dung huyết, máu kháng đông với EDTA hoặc heparin.
Que test nhanh bệnh Carré: CDV Ag test .
Que test nhanh bénh Parvovirus: CPV Ag test .
Máy sinh hoá tự động Mindray BS 240 (Trung Quốc) được sử dụng dé xét nghiệm tat cả các thông số sinh hoá máu.
May Mindray BC-5000 (Trung Quốc) được sử dụng dé xét nghiệm tat cả các
chỉ tiêu sinh lý máu.
2.4. Nội dung và chỉ tiêu theo đõi
Nội dung 1
Khảo sát tỷ lệ chó nhiễm Carré, Parvovirus dựa trên triệu chứng lâm sang và
cận lâm sảng.
Mục tiéu
Xác định tỷ lệ chó nhiễm Carré, Parvovirus trên số chó nghi nhiễm bằng test
nhanh.
Chỉ tiêu theo dõi
Tỷ lệ chó nghi bệnh do Parvovirus, Carré (%)= (số ca nghi bệnh với Carré, Parvovirus /tong số ca nghĩ nhiễm) X 100
Tỷ lệ chó dương tinh với Carré, Parvovirus (%)= (số ca dương tính với Carré, Parvovirus /tông số ca có triệu chứng tiêu chảy máu) X 100
Ty lệ chó dương tính với Carré, Parvovirus theo giống, tuổi, giới tính (%)=
(Số chó bệnh do Carré, Parvovirus theo tuôi, giống, giới tinh/Téng số chó bệnh do
Carré, Parvovirus) X 100
Tan suat xuat hiện các triệu chứng lâm sang trên chó nhiễm Carré, Parvovirus
(%)= (Số chó có biéu hiện bệnh/số chó dương tính với Carré, Parvovirus) X 100
Khảo sát sự thay đôi các chỉ sô sinh lý, sinh hóa máu tăng hoặc giảm dựa trên các dâu hiệu lâm sang (%)
Hệ sô tương quan các triệu chứng bệnh với các chỉ sô sinh lý, sinh hóa máu chó bị nhiễm Carré và Parvovirus.
Phan bô mau
Xét nghiệm những con chó được dua đến phòng khám để khám, điều trị có biểu hiện lâm sàng và triệu chứng đặc trưng của bệnh.
Nội dung 2
Đánh giá kết quả điều trị.
Mục tiêu:
Theo dõi tỷ lệ khỏi bệnh và ty lệ điều trị.
Chỉ tiêu theo dõi
Tỷ lệ điều trị khỏi bệnh chó bệnh do Parvovirus (%) = (Số chó khỏi bệnh đo Parvovirus/Số chó bệnh đo Parvovirus) X 100
Tỷ lệ chó chết do bệnh do Parvovirus (%) = (Tổng số chó bệnh do Parvovirus chét/Téng số chó bệnh do Parvovirus) X 100
Tỷ lệ chó khỏi bệnh theo thời gian điều trị (%) = (Tổng số chó khỏi bệnh theo thời gian điều trị/Tổng số chó điều trị trong thời gian tương ứng) X 100
Phân bố mẫu
Chọn những mẫu chó dương tính qua test nhanh và còn sống.
2.5. Phương pháp nghiên cứu
2.5.1. Phương pháp chan đoán lâm sàng
Lập hồ sơ bệnh án theo dõi ghi nhận thông tin vật nuôi: hỏi bệnh bằng việc tiễn hành hỏi thăm và ghi nhận thông tin về tên, giới tính và tuổi của chó, tổng số chó
nuôi, số con biéu hiện bệnh, hỏi về cách chăm sóc nuôi dưỡng, tình trạng tiêm phòng, tình trạng số giun. Tiến hành điều tra bệnh sử thông qua chủ nuôi biết về tiền sử bệnh trước đây, các liệu pháp đã điều trị, triệu chứng bệnh. Sau đó chúng tôi khám lâm sảng: quan sát thé trạng, cách đi đứng, tình trạng mat nước; đo thân nhiệt, sờ nan, kiểm tra niêm mạc mắt, mũi, miệng, bàn chân; nghe nhịp tim, phổi, đếm tan số hô hấp và thử các phản xạ ở mắt, cơ... Quan sát trực tiếp và ghi nhận thông tin chân đoán lâm sang dựa vào các triệu chứng điển hình của Carré: sốt cao, tiêu chảy, phân màu cà phê hoặc mau nâu, mùi tanh hôi, dịch nôn 61 có màu vàng xanh giống địch mật, nổi mụn nốt sài sốt ở da vùng bẹn bụng, mắt ri dich, một số con có biểu hiện than kinh. Triệu chứng thường gặp ở chó mắc bệnh Parvovirus: mệt mỏi, ủ rủ , nôn mửa, tiêu chảy, phân lỏng lầy nhay có lẫn máu tươi, bỏ ăn sốt. Đối với những chó có biểu hiện nghi bệnh Carré, Parvovirus kết hợp với sự chỉ định từ bác sĩ của phòng khám và sự đồng ý của chủ nuôi, chúng tôi tiến hành thử test nhanh dé chan đoán nhanh
bệnh Carré, Parvovirus trên chó,
2.5.2. Phương pháp khảo sát các chỉ tiêu sinh lý máu
Phương pháp lấy máu để kiểm tra các chỉ tiêu:
Máu của chó bệnh được lấy với chất chống đông, sau đó phân tích bằng máy Mindray BC-5000 (Trung Quốc) và máy sinh hoá BS 240 (Trung Quốc) được sử dụng dé xét nghiệm tat cả các thông số sinh hoá, sinh ly máu. Trong đó xét nghiệm các chỉ tiêu gồm: số lượng hồng cầu (RBC-red blood cell); Hàm lượng huyết sắc tô (HGB-hemoglobin); Tỷ khối hồng cầu (HCT-hematocrit); Thé tích trung bình hồng cầu (MCV-mean corpuscular volum); Lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu (MCH- mean corpuscular hemoglobin); Nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu (MCHC- mean corpuscular hemoglobin concentration); Số lượng bạch cầu (WBC-white blood cell); Bạch cầu ái toan (EOS-eosinophils); Bạch cầu ái kiềm (BASO-basophils); Bạch cầu đơn nhân (MON-monocytes); Lâm ba cầu (LYM-lymphocyte); Bach cầu đa nhân
trung tính (NEUT-neutrophils).
2.5.2.1. Số lượng hồng cầu, bạch cầu và hàm lượng hemoglobin
Đầu tiên, lay máu của thú, vào buổi sáng khi thú chưa ăn, nếu lay mau truc tiếp dé đếm thì không cần chat kháng đông, nếu không có thé ding EDTA hoặc natri
citrate tỷ lệ 3%. Các chỉ tiêu sinh ly máu được thực hiện bằng máy phân tích chỉ tiêu
sinh lý.
2.5.2.2. Chỉ số hematocrit
Dùng ống Wintrobe là một cột dai 10cm chia từng cm, đường kính 3mm. thé tích (phần trăm) hồng cầu được xác định bằng cách đo chiều cao của cột hồng cầu (cm) trong ống wintrobe. Dùng ống tiêm có kim dai hút máu cho vào ống wintrobe đến vạch 0. Ly tâm với tốc độ 3000 vòng/phút trong 30 phút. Kết quả tính bằng trung bình cộng giữa hai mức cao và thấp của cột bề mặt hồng cầu lắng xuống.
2.5.2.3. Công thức bạch cầu
Phết máu, cố định va nhuộm kép bằng Eosin và methylen. Đọc tiêu bản nhuộm dưới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 1000 lần. Đếm ngẫu nhiên 100 bạch cầu, phân loại bạch cầu và thành lập công thức bạch cầu theo tỷ lệ phần trăm.
2.5.2.4. Phương pháp xét nghiệm bằng test nhanh Xác định bệnh do Carré bang CDV Ag test
Cach lay mau
Dùng que lay mau phân từ trực trang của chó nghi nhiễm.
Dua que vào lọ chứa Iml dung dịch mẫu và khuấy động xoay tròn que trong chat
pha loãng
Lay mẫu phân pha loãng với 1 ống nhỏ giọt
Nhỏ 3-4 giọt mẫu vào vùng S của thiết bị xét nghiệm Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
Kết quả cần xem xét sau 10 phút
Giải thích kết quả xét nghiệm
Vach chứng C: Vạch này sẽ luôn luôn xuất hiện bat kể có sự hiện diện hay không của virus Carré. Nếu vạch này không xuất hiện, test xem như không có giá tri Vạch mẫu T: xác định sự hiện diện của kháng nguyên virus Carré
Âm tính: Chỉ xuất hiện vạch chứng C (không bị nhiễm)
Dương tính: Xuất hiện cả vạch mẫu T và vạch chứng C (đã bị nhiễm)
Làm lại xét nghiệm khi:
Cả hai vạch mẫu T và vạch chứng C đều không xuất hiện.
Chỉ có vạch mẫu T xuất hiện.
Xác định bệnh do Parvovirus bang CPV Ag test Cách lay mẫu
Lay mẫu phân từ trực tràng của chó nghi nhiễm bệnh bằng một tăm bông vô trùng Cho tăm bông đã có mẫu vào lọ chứa 1ml chat pha loãng
Khuấy động xoay tròn que trong chất pha loãng Lay mẫu phân pha loãng với 1 ống nhỏ giọt
Nhỏ 3-4 giọt mẫu vào vùng S của thiết bị xét nghiệm Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
Kết quả âm tính cần xem xét sau 10 phút.
Giải thích kết quả xét nghiệm
Vệt màu hồng sẽ xuất hiện trên vạch đối chứng C không liên quan đến kết qua xét nghiệm. Sự hiện diện của vệt khác trên vạch mẫu T xác định kết quả xét nghiệm.
Vạch chứng C: vạch này sẽ luôn luôn xuất hiện bất ké có sự hiện điện hay không của kháng nguyên Parvovirus. Nếu vạch này không xuất hiện, test xem như không có giá trị, có thé do chất pha loãng không tinh khiết và thiếu mẫu xét nghiệm.
Cần làm lại với chất pha loãng mới.
Vach mau T: xác định sự hiện diện của kháng nguyên Parvovirus Âm tính: chỉ xuất hiện vạch chứng C
Dương tính: xuất hiện cả vạch mẫu T và vạch chứng C
Làm lại xét nghiệm khi:
Cả hai vạch mẫu T và vạch chứng C đều không xuất hiện Chỉ có vạch mẫu T xuất hiện
2.5.2.5. Phương pháp xử lý số liệu
Sử dụng phần mềm Excel và Minitab đề số liệu.
Số liệu được trình bày dưới dạng X + SD.
Các bước xử lý số liệu được tóm tắt sau đây:
(1) Tính X + SD các chỉ tiêu sinh hóa, sinh ly máu. Từ đó xác định các
hang số trong khoảng X + 2SD.
(2) Đánh giá sự biến động của các chỉ tiêu sinh lý — sinh hóa máu ở chó có bệnh lý lâm sàng bằng trắc nghiệm F
Chương 3