Laccase là enzyme rất phổ biến trong tự nhiên, chúng được tìm thấy cả trong vi khuẩn, nấm, thực vật và côn trùng.
1.1.5.1. Laccase từ thực vật
Yoshida lần đầu tiên mô tả về laccase thực vật vào năm 1883 khi ông lấy nó từ dịch tiết của cây gỗ lacquer (Rhus vernicifera). Laccase cũng được sản xuất bởi Acer pseudoplatanus[8]. Ngoài ra, laccase còn hiện diện trong lá của loài Aesculus parviflora. Bên cạnh đó, laccase còn được chiết xuất từ chồi của cây trà xanh. Sau những nghiên cứu về laccase từ R. vernicifera, nhiều nghiên cứu tập trung vào đặc trưng của laccase được sản xuất bởi thực vật bậc cao khác như Zea mays, Populus euramericana, Nicotiana tobacco, Lolium perenne, và Arabidopsis thaliana [33].
Laccase thực vật tham gia vào phân hủy lignin hoặc phòng ngừa stress, tiêu diệt nấm thực vật. Sau đó, laccase còn được thu nhận từ bắp cải, củ cải, củ cải đường, táo, măng tây, khoai tây, quả lê và các loại rau quả khác (Janusz và cs, 2020).
1.1.5.2. Laccase từ nấm
Lignin là thành phần chính cấu tạo nên gỗ và là dạng hợp chất carbon vòng thơm phổ biến nhất trên trái đất. Lignin làm cho thân thực vật dạng gỗ có chứa khí khổng trở nên cứng chắc do chất này đóng vai trò như chất keo, gắn chặt mạch cellulose và
hermicellulose. Hơn nữa, lignin còn tạo nên một hàng rào tấn công của vi sinh vật phân hủy gỗ và bảo vệ hợp chất đường dễ bị phân hủy [14]. Về mặt hóa học, lignin dị hợp chất dạng polymer, không hoạt động hóa học, chứa các tiểu phần phenylpropanoid, các tiểu phần này lại gắn chặt với nhau nhờ những liên kết hóa trị.
Do cấu trúc phức tạp và liên kết hóa học bền nên lignin không bị phân hủy theo cơ chế thủy phân như hầu hết các polymer có trong tự nhiên. Hầu hết nấm men có nguồn gốc từ các loài chủ yếu thuộc Basidiomycota và Ascomycota [17]. Chức năng chính của nấm laccase là phân hủy sinh học lignocellulose và do đó góp phần vào chu trình carbon trong sinh quyển (Janusz và cs, 2017).
Năm 1896, laccase được chứng minh có mặt ở nấm lần đầu tiên bởi Bertrand và Laborde. Laccase từ nấm được nghiên cứu và khảo sát rất kỹ đặc biệt là laccase từ nấm đảm Basidomyces [45]. Ngoài ra, các các loại nấm như Ascomyces, Deuteromyces, Basidomyces và các loài nấm có khả năng phân hủy ligincellulose như Agaricus bisporus, Botrytis cinerea, Chaetomium themophilum, Coprius cinereus, Neurospora crassa, Phlebia radiate, Pleurotus ostrotus ostreatus, Pycnoporus cinnabarius, T. versicolor (Morsi và cs, 2020).
Trong quá trình sản xuất laccase, một số nấm đảm Basidiomycota được nuôi trên môi trường lỏng hoặc rắn. Hoạt tính cao nhất thu được khi nuôi trong môi trường lỏng có loài Polyporus sp. và Ganoderma lucidum. Các mức độ phân hủy lignin khác nhau của laccase đối với các nguồn nguyên liệu có thành phần gỗ khác nhau phụ thuộc vào điều kiện môi trường và các loài nấm[50]. Chưa có chứng minh cụ thể về cơ chế quá trình phân hủy hoặc loại bỏ lignin mà mỗi enzyme thu được từ các vi sinh vật khác nhau có cơ chế hoạt động khác nhau. Ở thực vật, laccase ảnh hưởng tới sự hóa gỗ, trong khi ở nấm laccase còn liên quan đến nhiều quá trình tế bào, bao gồm cả loại bỏ các hợp chất lignin, hình thành bào tử, sản xuất sắc tố, sự hình thành quả thể và gây bệnh ở thực vật. Laccase chủ yếu được biết đến là một enzyme ngoại bào nhưng cũng có những tài liệu chứng minh về sự xuất hiện của laccase nội bào của nấm mục trắng. Trong đó laccase nội bào có chức năng như một tiền thân cho laccase ngoại bào và không có sự khác biệt giữa hai loại laccase này (Theerachat và cs, 2019).
Phân hủy lignocellulose đóng một vai trò quan trọng trong việc phân hủy các mảnh vụn gỗ. Sự phân hủy lignin do nấm mục trắng liên quan đến laccase - enzyme được sản xuất trong quá trình trao đổi chất thứ cấp. Một loạt các nghiên cứu chỉ ra rằng, việc sản xuất các laccase phụ thuộc vào việc lựa chọn sinh vật sản xuất mới có hiệu quả phân hủy lignin cao hơn[60]. Laccase từ nấm có khả năng oxy hóa khử cao hơn so với laccase từ vi khuẩn hoặc thực vật (lên đến 800 mV) và các quá trình diễn ra trong tự nhiên của chúng có khả năng ứng dụng quan trọng trong lĩnh vực Công nghệ sinh học. Như vậy, laccase thu được từ nấm mốc có liên quan đến sự phân hủy lignin hoặc loại bỏ các phenol. Ngoài ra, có giả thuyết cho rằng laccase từ nấm còn tham gia vào sự tổng hợp melanin dihydroxynaphthalene (Shraddha và cs, 2011).
Theo kết quả nghiên cứu của Chhaya và Gupte, (2019), khi gây đột biến chủng F. icnatum LD-3 bằng tia UV và cho tiếp xúc với EMS (ethyl methane sulfonate) thì lượng laccase sản xuất ra nhiều hơn gấp 3 lần so với chủng tự nhiên. Ngoài ra, cũng theo nghiên cứu này, khi nuôi cấy các chủng đột biến, sử dụng rơm lúa mì và cám gạo thì năng suất laccase tăng gấp 2 lần so với chủng tự nhiên.
1.1.5.3. Laccase từ vi khuẩn
Laccase vi khuẩn lần đầu tiên được phân lập từ Azospirillum sp. vào năm 1993 ở vùng rễ của cây lúa. Sau đó, laccase được phát hiện từ nhiều loại vi khuẩn khác nhau, như vi khuẩn Gram dương, bao gồm Geobacterial, Staphylococcus, Lysinibacillus, Aquisalibacillus và vi khuẩn Gram âm, bao gồm Pseudomonas, Delfia, Enterobacter, Proteobacterium và Alteromonas. Các CotA-laccase đặc trưng nhất là từ Bacillus, như B. subtilis, B. pumilus, B. licheniformis, B. halodurans, Bacillus sp. HR03 (Janusz và cs, 2017).
Ngoài ra, theo Guan và cs (2018), laccase cũng tồn tại trong nhiều loài khác nhau, chẳng hạn như Streptomyces coelicolor, S. cyaneus, S. psammoticus, S.
ipomoea, S. sviceus, S. bikiniensis, S. violaceusniger, S. lividans, S. lavendulae
…Ngoài ra, hoạt tính laccase cũng đã được tìm thấy trong một số ít trường hợp như ở Azospirillum lipoferum, B. subtilis, S. lavendulae, S. cyaneus và Marinomonas mediterranea. Tuy nhiên, tất cả các laccase hay protein tương tự laccase được tìm thấy ở vi khuẩn đều là nội bào hay vùng ngoại vi tế bào chất (periplasm) khác với các
laccase ở nấm mốc và thực vật bậc cao đều được tiết ra môi trường bên ngoài. Laccase ở vi khuẩn không chỉ phổ biến ở Actinobacter mà còn được tìm thấy trong a-b-và g- Proteobacteria, laccase từ S. coelicolor.
Li và cs (2014) đã phân lập nấm từ các hệ sinh thái ven biển của châu thổ sông Châu, Trung Quốc. Dựa trên phân tích chuỗi gen rRNA của chúng, 74% số nấm phân lập thuộc Ascomycota, 23% là Basidiomycota và chỉ có 3% là thuộc loài Zygomycota.
Trong đó, khoảng 38% có khả năng sản xuất laccase. Các chủng sản xuất laccase tốt nhất là PKU F16 phân lập từ Cladosporium sp. và PKU F18 phân lập từ Ascomycota sp. hoạt động laccase trên hợp chất trung gian là ABTS thu được 14,6 U/mL và 10,5 U/mL, sau 6 ngày ủ.
Mainardia và cs (2018) đã báo cáo, việc sản xuất các enzyme có hoạt tính phân hủy lignin như laccase, mangan peroxidase (MnP) và lignin peroxidase (LIP), thu được từ nấm Aspergillus sclerotiorum CBMAI 849, Cladosporium cladosporioides CBMAI 857 và Mucor racemosus CBMAI 847. Laccase thu từ nấm đảm Basidiomycota (Marasmiellus sp. CBMAI 1062, Peniophora sp. CBMAI 1063 và Tinctoporellus sp. CBMAI 1061) sản xuất được nhiều chuỗi laccase tương đồng với 73-90% DNA của laccase từ nấm đảm Basidiomycota ở trên cạn.