Furfurol tác dụng với anilin trong môi trường acid acetic cho sản phẩm màu đỏ. độ hấp thụ quang của sản phẩm này trên máy UV-VIS ở bước sóng ٨ = 510nm cùng với dãy chuẩn và định lượng furfurol trong cùng điều kiện.
b.Thiết bị, dụng cụ:
•Máy đo quang phổ UV-VIS
•Cân phân tích độ chính xác tới 0,1 mg
•Bộ chưng cất rượu
•Bình định mức 10 ml , 50 ml, 100 ml, 1000 ml
•Cốc có mỏ dung tích 100 ml
•Pipet chính xác các loại (1 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml)
•Đá bọt
•Cồn kế, khắc vạch 10
c. Hoá chất, thuốc thử
Tất cả các hoá chất đều là loại tinh khiết phân tích – TKPT
•Ethanol tinh khiết 99,8%.
•Furfurol tinh khiết 99%.
•Ethanol 50% pha từ ethanol tinh khiết
•Anilin trong suốt, không màu, d = 1,03 (nếu có màu phải cất lại:
Phương pháp cất: Tiến hành chưng cất (trên bộ chưng cất với sinh hàn không khí). Lấy khoảng 200ml anilin cho vào bình cầu có dung tích 300 – 500ml của dụng cụ cất và vài viên đá bọt.
Tiến hành chưng cất với tốc độ đều cho đến khi hết hoàn toàn nước trong mẫu sau đó thu thập dịch cất ở phân đoạn 180 – 1850C,
thu được anilin tinh khiết).
•Acid acetic đặc, tinh khiết không màu (98%).
d.Các bước tiến hành
+ Chuẩn bị dung dịch chuẩn
Dung dịch furfurol chuẩn gốc (chứa trong bình thủy tinh tối màu bảo quản trong tủ lạnh dùng trong 1 tuần): Cân thật chính xác 0,05g furfurol. Hòa tan vào ethanol 50% cho đến khi tan hoàn toàn, chuyển vào bình định mức 1000 ml, thêm ethanol 50% vừa đủ 1000 ml, được chuẩn nồng độ 50 mg/lít.
Dung dịch furfurol chuẩn (chỉ pha trước khi dùng): Hút 5 ml dung dịch fururol chuẩn gốc cho vào bình định mức 50 ml, làm vừa đủ đến vạch mức bằng ethanol 50%.1 ml dung dịch này có 5 mg fururol.
+Chuẩn bị mẫu
- Rượu trắng hoặc cồn:
- Rượu màu:Tiến hành chưng cất (trên bộ chưng cất): Lấy 150 ml mẫu cho vào bình cầu có dung tích 300 – 500 ml của dụng cụ cất và vài viên đá bọt. Tiến hành chưng cất với tốc độ đều cho đến khi bình hứng được khoảng 70 ml trong thời gian 40 – 60 phút. Để cồn bay hơi ra không bị mất, cho đầu ống sừng bò cắm vào trong 20 ml nước cất, ống sinh hàn dài được làm lạnh bằng nước lạnh và đặt bình hứng trong chậu thửy tinh chứa hỗn hợp nước và nước đá để làm lạnh. Để nguội về nhiệt độ phòng và thêm nước cho vừa đủ 150 ml.
Tiến hành so màu
Cho vào 7 bình định mức cỡ 10ml lần lượt như sau:
Bình 1 Bình 2 Bình 3 Bình 4 Bình 5 Bình 6 Bình 7
Mẫu thử (ml) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 5,0
Dung dịch furfurol chuẩn (ml) 0,0 1,0 2,0 4,0 6,0 8,0 0,0
Anilin (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Acid acetic (ml) 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
Ethanol 50% (ml) Vừa đủ 10 ml
Hàm lượng furfurol (mg/l) 0,0 0,5 1,0 2,0 3,0 4,0
Lắc đều và để yên trong 1 phút, đem đo ngay trên máy UV- VIS ở bước sóng l = 510 nm, ghi độ hấp thụ quang của từng ống mẫu chuẩn và mẫu phân tích. (Điều kiện nhiệt độ của quá trình tạo phức và đo quang được tiến hành ở nhiệt độ phòng)
+ Tính toán kết quả
Dựng đồ thị mối liên hệ giữa nồng độ và độ hấp thụ quang đo được.
Độ hấp thụ Abs
A3 AX A2 A1
C1 C2 CX C3 Nồng độ
Phát hiện hàm lượng CX của furfurol (mg/l) trong rượu thử nhờ đồ thị chuẩn
- Hàm lượng furfurol CA (mg) trong 1lít rượu thử được tính theo công thức sau:
CA (mg/l) = CX x độ pha loãng x k Trong đó:
k: hệ số thu hồi sau cất mẫu (chỉ áp dụng đối với rượu chưa qua chưng cất)
Ví dụ: Độ thu hồi của quá trình chưng cất là 87% thì hệ số thu hồi k = 100/87 = 1,149
Cx: số mg furfurol trong 1l rượu thử
- Hàm lượng furfurol trong mẫu rượu thử quy về độ cồn 100
% được tính theo công thức sau:
C (mg/l) = (CA x 100)/độ cồn của mẫu đo được.
Chú ý: Hàm lượng furfurol trong mẫu thử cũng có thể được tính dựa trên đường chuẩn gồm ba điểm (áp dụng trong phân tích mẫu hàng ngày).
•Phương pháp định tính Frufurol : làm như quy trình trên nếu mẫu không lên màu thì là âm tính nếu lên màu là dương tính. Những mẫu âm tính sẽ trả không phát hiện, những mẫu dương tính sẽ đem đi dịnh lượng.
+ Kiểm soát chất lượng
Kết quả cuối cùng bằng giá trị trung bình của hai lần thử song song. Giá trị thu được từ hai lần thử song song không được chênh lệch nhau quá 5 % so với giá trị trung bình.