3.1. Khi đọc kết quả phản ứng tạo vòng Formazan căn cứ vào các tiêuchuẩn sau: chuẩn sau:
3.1.1. Màu sắc của vòng dung huyết: vòng dung huyết có màu xanh đậm của
Formazan chứng tỏ cơ chất tham gia phản ứng đã phản ứng hết .nghĩa là hoạt độ của enzym là bình thường.Vòng dung huyết có màu xan nhạt hơn là hoạt độ của enzym giảm nhẹ, trường hợp thiếu hoàn toàn thì vòng dung huyết sẽ có màu của môi trưòng thạch Agar hay màu của Hemoglobin, màu vàng nhạt hay màu đỏ nâu nhạt.
3.2.2. Kích thước của vòng dung huyết xanh:
- Lớn hơn 7 mm được đánh giá là (-): bình thưòng - Từ 5 mm đến 7 mm được đánh giá là(+): bán thiếu - Từ 3mm đến 5mm được đánh giá là (++): bán thiếu - Nhỏ hơn 3mm được đánh giá là (+++): thiếu hoàn toàn.
3.2. Đánh giá các điều kiện của phản ứng Formazan
Chúng tôi tiến hành xác định các điều kiện của phản ứng Formazan với 95 mẫu thử, là những mẫu được chọn ngẫu nhiên trong tổng số đối tượng nghiên cứu trên. Những điều kiện của phản ứng Formazan là thời gian diễn ra phản ứng, nhiệt độ tiến hành của phản ứng và nồng độ cơ chất tham gia phản ứng:
- Thời gian: 8 giờ, 12 giờ, 24 giờ.
- Nhiệt độ: 250-C ( nhiệt độ phòng), 370-C (nhiệt độ sinh lý của cơ thể). - Nồng độ cơ chất: tiến hành với hai nồng độ ở khoa sinh lý bệnh trường Đại học Y và ở Viện Ký sinh trùng sốt rét. Nồng độ ở Viện Ký sinh trùng sốt rét gấp đôi ở Đại học Y ( xin xem phần đối tượng và phương pháp nhiên cứu).
Bảng 2: Kết quả thiếu hụt G6PD sau 8h đọc kết quả
Kết quả 37
oC 25oC
Viện sốt rét Đại học Y Viện sốt rét Đại học Y
Bình thường 78 82 90 90
Bán thiếu 12 8 0 0
Thiếu 5 5 5 5
Nhận xét:
Sau 8h ở 25oC thì tất cả các mẫu thiếu hoàn toàn đều đọc rõ ở cả hai nồng độ. Các mẫu bán thiếu ở cả hai nồng độ đều không đọc rõ, các quầng dung huyết chỉ hơn nhạt mầu hơn so với chứng (-) mà đường kính không nhỏ hơn hoặc ngược lại đường kính có nhỏ hơn nhưng màu xanh vẫn đậm vì vậy những mẫu này vẫn được đọc là bình thường.
Sau 8h ở 37oC ta thấy ở nồng độ thấp có 8 mẫu bán thiếu và 4 mẫu nghi ngờ. ở nồng độ cao có 12 mẫu bán thiếu (bao gồm cả 4 mẫu nghi ngờ trên vì sự so sánh với chứng (-) là rõ ràng hơn).
Bảng 3: Kết quả thiếu hụt G6PD sau 12h và 24h đọc kết quả
Kết quả 37
oC 25 oC
Viện sốt rét Đại học Y Viện sốt rét Đại học Y
Bình thường 78 78 78 78
Bán thiếu 12 12 12 12
Kết quả ở hai nồng độ và hai nhiệt độ đều tương đương nhau, tuy vậy cũng có thể rút ra nhận xét như sau:
Sau 12 giờ
- ở 25 oC hầu hết các mẫu bán thiếu đều có đường viền của vòng dung huyết không rõ ràng ở cả hai nồng độ.
- ở 37 oC các mẫu bán thiếu ở nồng độ thấp phân biệt rõ hơn.
Sau 24giờ
- ở 25 oC các mẫu bán thiếu có màu nhạt hơn hẳn so với thời điểm 8h và 12h. - ở 37 oC các mẫu bán thiếu ở nồng độ thấp có màu nhạt hơn do đó dễ phân biệt hơn.
3.3. Tần suất thiếu hụt G6PD ở dân tộc Tày và dân tộc Nùng
Bảng 3: Tỷ lệ thiếu enzym G6PD ở dân tộc Tày và Nùng
Dân tộc N Thiếu hoàn toàn Bán thiếu Tổng
Tày 130 7/130 (5,385%) 9/130 (6,923%) 12,308% Nùng 71 6/71 (8,451%) 1/71 (1,14%) 9,861% 2 dân tộc 201 13/201 (6,467%) 10/201 (4,975%) 11,442% 5.39% 8.45% 6.47% 6.92% 1.41% 5% 0% 1% 2% 3% 4% 5% 6% 7% 8% 9% Tµy Nïng Chung THIÕu B¸n THIÕu