IV. Enzyme amylase và phương pháp xác định hoạt tính.
BÀI 6 :TÁCH CÁC SẮC TỐ QUANG HỢP BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY HOẶC BẢN MỎNG
SẮC KÝ GIẤY HOẶC BẢN MỎNG
I. LÝ THUYẾT
NGUYÊN TẮC
Hổn hợp các phân tử sắc tố có thể phân tách thành các đơn chất bằng các phương pháp sắc ký , trong đó sắc ký giấy hoặc sắc ký bản mỏng là đơn giản hơn cả . Các phương pháp dựa vào khả năng tương tác khác nhau của các phân tử sắc tố với phân tử pha tĩnh và khả năng lôi kéo của dung môi .
DỤNG CỤ -HÓA CHẤT
- Dụng cụ .
- Phễu lọc.
- Giấy lọc .
- Bản mỏng nhôm phủ silica gel G254.
- Bình tam giác 250ml.
- Mao quản chấm mẫu hay micropipette đầu típ 100.
- nguyên liệu hóa chất.
- Lá rau cải bó xôi hay các loại rau xanh khác.
- Ethanol 96 %.
- Acetone.
- Ether dầu hỏa .
- Cồn 95%.
II. TIẾN HÀNH.
- Nghiền lá 10g trong 10ml ethanol 95% đun sôi 5 phút.
- Lọc.
- Cắt giấy lọc thành dải có đầu nhọn .kẻ vạch tiếp mẩu và vạch dừng.
- Thấm mẫu lên vạch bằng micropipette.
- Nhúng giấy lọc trong dung môi .
- Để dung môi chạy lên vạch dừng.
- Đánh dấu các vệt sắc tố bằng bút chì.
TÍNH KẾT QUẢ Rf=7,5/8 Rf=7,5/8
TRẢ LỜI CÂU HỎI
Câu1 :Độ phân cực của các dạng sắc tố quang hợp trong hình 6.1 làcholorophyll A và cholorophyll b có độ phân cực lớn hơn b-carotene , b-carotene có độ phân cực thấp , còn zeaxanthin có độ phân cực lớn hơn b-carotenen nhưng nhõ hơn cholorophyll A và
cholorophyll B
Câu2 :Phải dùng ethan 95% để trích ly sắc tố mà không dùng nước vì các sắc tố chỉ tan trong dung môi hữu cơ , không tan trongnước