3.2.1 Hiệu lực của dịch trích TXB trên ấu trùng SAT
Kết quả từ bảng 3.1 cho thấy, dịch trích ở các nồng độ khác nhau đều có hiệu lực gây chết đối với SAT tuổi 3, cụ thể:
- Ở thời điểm 1 giờ sau khi xử lý (SKXL), nghiệm thức dịch trích 2000 ppm có độ hữu hiệu cao nhất (43,3%) và khác biệt ý nghĩa ở mức 1% so với các nghiệm thức còn lại. Nghiệm thức dịch trích 1000 ppm có độ hữu hiệu cao thứ hai (14,4%), nghiệm thức dịch trích 10 ppm và dịch trích 100 ppm chưa thể hiện hiệu lực diệt sâu ở thời điểm này.
- Ở thời điểm 1 ngày sau khi xử lý (NSKXL), nghiệm thức dịch trích 2000 ppm và dịch trích 1000 ppm có độ hữu hiệu (ĐHH) tăng lên. Độ hữu hiệu của dịch trích 2000 ppm tăng cao khoảng 30% (đạt 73,3%), nhưng ĐHH của dịch trích 1000 ppm chỉ tăng nhẹ khoảng 4,5% (đạt 18,9%). Trong khi đó, hai nghiệm thức dịch trích 10 ppm và dịch trích 100 ppm vẫn chưa thể hiện hiệu lực diệt sâu.
Hình 3.1: sắc ký mỏng (TLC) của dịch trích và asarone
Bảng 3.1 Độ hữu hiệu của dịch trích TXB trên ấu trùng SAT trong điều kiện phòng thí nghiệm
S T T
Nghiệm thức
Độ hữu hiệuC (%)
1 giờ 12 giờ 1 ngày 3 ngày 5 ngày 7 ngày 9 ngày 11 ngày
1 DTB 10 ppm 0,0c 0,0c 0,0c 0,0c 0,0c 0,0c 6,7 1,9c 4,52,9c 2 DT 100 ppm 0,0c 0,0c 0,0c 0,0c 0,0c 3,33,3c 10,01,9c 7,91,2c 3 DT 1000 ppm 14,44,0b 15,64,4b 18,94,4b 18,94,4b 18,94,4b 22,24,8b 47,85,8b 48,94,6b 4 DT 2000 ppm 43,36,7a 57,87,8a 73,38,4a 73,38,4a 73,38,4a 73,38,4a 76,75,1a 77,24,3a
CV (%)A 22,7 21,2 17,9 17,9 17,9 24,9 11,4 14,4 Mức ý nghĩa ** ** ** ** ** ** ** **
Ghi chú: Trung bình được quy đổi trở lại từ A: x0,5, B: dịch trích, C: trung bình ± SE, các số trong cùng một cột có chữ số theo sau giống nhau thì không khác biệt ý nghĩa thống kê;**: khác biệt có ý nghĩa ở mức 1%.
32
T0= 26-300C, RH= 60-80%
- Ở thời điểm từ 1-5 NSKXL, nghiệm thức dịch trích 2000 ppm và dịch trích 1000 ppm có độ hữu hiệu không thay đổi, sau đó độ hữu hiệu tăng lên qua các ngày tiếp theo. Đến thời điểm 11 NSKXL, ĐHH của dịch trích 2000 ppm chỉ tăng thêm khoảng 4% (đạt 77,2%), nhưng ĐHH của dịch trích 1000 ppm tăng hơn gấp 2 lần từ 18,9% lên đến 48,9%.
- Ở thời điểm 7 NSKXL, nghiệm thức dịch trích 100 ppm bắt đầu chứng tỏ hiệu lực diệt sâu với độ hữu hiệu thấp (3,3%). ĐHH của dịch trích 100 ppm tăng dần ở các thời điểm tiếp theo và đạt 7,9% ở thời điểm 11 NSKXL. Trong khi đó, đến thời điểm 9 NSKXL, nghiệm thức dịch trích 10 ppm mới bắt đầu thể hiện hiệu lực diệt sâu với ĐHH đạt 6,7%.
Một cách tổng quan, dịch trích từ thân rễ của cây TXB đã thể hiện hiệu lực gây chết đối với ấu trùng SAT tuổi 3 và mức độ gây chết tỉ lệ thuận với nồng độ của dịch trích TXB, ở nồng độ càng cao thì hiệu lực gây chết càng lớn. Trong đó, dịch trích 2000 ppm thể hiện hiệu lực diệt sâu ở thời điểm 1 giờ SKXL và có ĐHH diệt sâu cao nhất (đạt 77,2% ở thời điểm 11 NSKXL), dịch trích 1000 ppm có ĐHH diệt sâu cao thứ hai (đạt 48,9% ở thời điểm 11 NSKXL). Dịch trích 100 ppm và 10 ppm bắt đầu có khả năng diệt sâu ở thời điểm lần lượt là 7 và 9 NSKXL và có ĐHH thấp.
Kết quả ly trích bằng kỹ thuật ngưng tụ (SDE) và phân tích bằng kỹ thuật sắc ký khối phổi (GC/MS) ghi nhận, tinh dầu của cây TXB Acorus calamus ở châu Á và châu Âu có chứa hơn 90 hợp chất dễ bay hơi; trong đó, β-asarone và α-asarone là các thành phần chính chiếm tỉ lệ lần lượt là khoảng 46,8-85,6% và 6,8-9,7% (Giacomo, 1985;
Raina et al., 2002; Gyawali và Kim, 2009) tùy theo thời điểm thu thập trong năm và khu vực sinh thái. Bên cạnh đó, theo kết quả đánh giá của Koul et al. (1990), đối với ấu trùng của một số loài côn trùng thuộc bộ cánh vảy (Lepidoptera), chất β-asarone vừa gây độc vừa gây sự chán ăn, trong khi chất α-asarone chỉ gây ra sự chán ăn mà không gây độc. Hơn nữa, kết quả của thí nghiệm cho thấy (Bảng 3.1), ở nồng độ cao (dịch trích 1000 ppm và 2000 ppm) thì dịch trích đã có hiệu quả diệt sâu ngay ở thời điểm 1 giờ SKXL; và ĐHH của dịch trích 2000 ppm chủ yếu có hiệu lực ở điểm 1 NSKXL (ĐHH đạt 73%), sau đó chỉ tăng nhẹ ở các thời điểm tiếp theo. Điều này chứng tỏ, trong mẫu dịch trích TXB có chứa thành phần β-asarone gây ra tác động độc hại đến sự sống của SAT khi SAT tiếp xúc với dịch trích TXB thời điểm 1 giờ SKXL.
Bên cạnh đó, ở thời điểm từ ngày thứ 1-7 SKXL, ĐHH của tất cả các nghiệm thức thí nghiệm không thay đổi. Qua quá trình thí nghiệm ghi nhận, một số ấu trùng SAT ở giai đoạn này có những biểu hiện như biếng ăn, chậm lớn, ít di chuyển hơn so với đối chứng. Điều này chứng tỏ, thành phần α-asarone và β-asarone trong mẫu dịch trích đã
gây ra sự chán ăn cho ấu trùng SAT. Kết quả này tương tự với ghi nhận của Koul et al.
(1990) và Balakumbahan et al. (2010), chất asarone ly trích từ thân rễ TXB Acorus calamus có khả năng ức chế lên sự tăng trưởng, gây chán ăn ở một số ấu trùng của bộ cánh vẩy thuộc ngài đêm (Lepidoptera: Noctuidae).
3.1.2 Khả năng hóa nhộng của ấu trùng SAT
Bảng 3.2 Tỷ lệ (%) số ấu trùng SAT hóa nhộng thành công sau khi xử lý dịch trích TXB trong điều kiện phòng thí nghiệm
Ghi chú: A:trung bìnhSE, các số trong cùng một cột có chữ số theo sau giống nhau thì không khác biệt ý nghĩa thống kê;**: khác biệt có ý nghĩa ở mức 1%.
Kết quả thí nghiệm ghi nhận, toàn bộ ấu trùng SAT còn sống ở các nghiệm thức đều hóa nhộng và vũ hóa thành công. Kết quả Bảng 3.2 cho thấy, ở nghiệm thức dịch trích 10 ppm và nghiệm thức dịch 100 ppm có tỉ lệ (%) số ấu trùng SAT hóa nhộng thành công rất cao đạt hơn 90% (lần lượt là 93,3% và 91,1%) không khác biệt với nghiệm thức đối chứng (97,8%), vì ở các nồng độ này, dịch trích chưa thể hiện hiệu quả diệt sâu cao (Bảng 3.1). Từ đó, khả năng hóa nhộng của SAT chưa bị ảnh hưởng lớn. Bên cạnh đó, nghiệm thức dịch trích 1000 ppm và dịch trích 2000 ppm thì có hiệu lực diệt sâu cao nên số ấu trùng SAT hóa nhộng thành công thấp (lần lượt 50% và 22,2%).
STT Nghiệm thức Tỉ lệ (%) ấu trùng SAT hóa nhộng thành côngA lần lặp lại 1 lần lặp lại 2 lần lặp lại 3 Trung bình
1 Dịch trích 10 ppm 90,0 96,7 93,3 93,33,3a
2 Dịch trích 100 ppm 93,3 93,3 86,7 91,13,8a
3 Dịch trích 1000 ppm 60,0 46,7 43,3 50,08,8b
4 Dịch trích 2000 ppm 16,7 20,0 30,0 22,26,9c
5 Đối chứng 100,0 96,7 96,7 97,81,9a
CV (%) 7,9
Mức ý nghĩa **
T0= 26-300C, RH= 60-80%