2.2 Phương pháp thí nghiệm 12
2.2.2 Khảo sỏt ủặc ủiểm vi khuẩn gõy bệnh 12
Cắt mẫu bệnh thành từng ủoạn nhỏ khoảng vài mm, nơi cú tiếp giỏp giữa mụ bệnh và mụ khoẻ. Sau ủú dựng dao mổ cắt thành từng lỏt mỏng cho vào lame cú chứa giọt nước cất, dựng lammelle ủậy lại và quan sỏt nhanh dưới kớnh hiển vi. Nếu bệnh do vi khuẩn gây ra sẽ tìm thấy dịch vi khuẩn tuôn ra từ lát cắt.
Phõn lập vi khuẩn: Cắt mẫu bệnh thành những ủoạn nhỏ (5mm), thanh trựng mặt ngoài bằng Chlorine 1% và rửa lại nhiều lần bằng nước cất vụ trựng. Sau ủú nuụi cấy trong môi trường King’s B. Sau khi nuôi cấy khoảng 24 giờ, vi khuẩn sẽ phát triển xung quanh rỡa mụ bệnh, tiến hành phõn lập vi khuẩn. Dựng ủũa cấy vi khuẩn ủể phõn lập vi khuẩn và vạch theo ủường zớc-zắc lờn ủĩa petri cú chứa mụi trường
Nhận dạng vi khuẩn dựa vào cỏc ủặc ủiểm như hỡnh dạng (trũn, dẹt…), màu sắc (vàng, trắng, kem sữa,…), ủặc ủiểm bề mặt khuẩn lạc (trơn, nhẵn, búng,….), ủường rỡa xung quanh (gợn súng, thẳng,…), ủộ nổi của khuẩn lạc (phẳng, nhụ,…).
Quan sỏt hỡnh dạng vi khuẩn bằng phương phỏp nhuộm ủơn. Mẫu vi khuẩn ủược nuụi cấy 1-2 ngày, nhuộm với Crystal violet (1-5 phỳt), rửa nước, ủể khụ và quan sỏt dưới kớnh hiển vi cú ủộ phúng ủại X100.
Khảo sỏt ủặc tớnh Gram của vi khuẩn bằng phương phỏp nhuộm Gram. Vi khuẩn ủược nuụi cấy trong thời gian từ 18-24 giờ. Cỏc bước thực hiện như sau: ủầu tiờn vi khuẩn ủược nhuộm Ammonium oxalate crystal violet (1-2 phỳt), rửa nước, nhuộm lugol trong 1 phỳt, tẩy màu với alcol 950 (cho ủến khi màu tớm tan hết), rửa nước và ủể khụ tự nhiờn trong khụng khớ, nhuộm Carbon fuchsin (1 phỳt), rửa nước, ủể khụ và quan sỏt ở vật kớnh X100. Vi khuẩn Gram õm cú màu hồng, vi khuẩn Gram dương có màu tím xanh.
Quan sỏt capsule của vi khuẩn ủược thực hiện như sau: dựng lame sạch, nhỏ một giọt vi khuẩn, ủể khụ tự nhiờn, sau ủú nhuộm màu khoảng 6 phỳt, rửa bằng dung dịch sulfate ủồng 20 % (cho bớt màu), dựng giấy thấm chậm phần nước thừa ở xung quanh. Quan sỏt dưới kớnh hiển vi ở vật kớnh cú ủộ phúng ủại X40 hoặc X100, tế bào vi khuẩn có màu tím và xung quanh tế bào vi khuẩn có một vòng màu xanh (màu xanh của CuSO4.5H2O), ủú là capsule.
Khảo sát chiên mao của vi khuẩn bằng cách nhuộm chiên mao. Chọn mẽ vi khuẩn nuụi cấy trong thời gian từ 18-24 giờ, ủầu tiờn nhuộm với dung dịch Leifson (10 phỳt), rửa nước, ủể khụ sau ủú nhuộm với Methylene blue (5 phỳt), rửa nước, ủể khô và quan sát dưới vật kính X100.
Hỡnh 2.1 Sơ ủồ giỏm ủịnh bệnh do vi khuẩn gõy ra Triệu chứng
Quan sỏt mẫu cắt ủể
phát hiện vi khuẩn Nuôi cấy, tách
ròng
Kết quả Nhuộm
ủơn
Nhuộm Gram
Nhuộm chiên mao Quan sát
khuẩn lạc
Nhuộm capsule
Thực hiện bước thứ 3 trong quy trình Koch: Tiêm chủng trở lại trên cây hoa hồng khỏe mạnh. Tiếp tục theo dõi và khảo sát triệu chứng bệnh xuất hiện, so sánh với triệu chứng ban ủầu.
Cuối cựng, tỏi phõn lập lại từ vết bệnh tiờm chủng nhõn tạo. Xỏc ủịnh lại cỏc ủặc tớnh của vi sinh vật nầy. So sỏnh với vi sinh vật ủó khảo sỏt ban ủầu ở bước 2.
2.2.3 Khảo sỏt hiệu quả của một số loại thuốc hoỏ học ủối với vi khuẩn gõy bệnh ủốm lỏ trờn hồng trong ủiều kiện phũng thớ nghiệm
* Mục ủớch của thớ nghiệm
Bước ủầu ủỏnh giỏ hiệu quả của cỏc loại thuốc ủối với vi khuẩn gõy bệnh ủốm lá trên hồng trong phòng thí nghiệm.
* Bố trí thí nghiệm
Thớ nghiệm ủược bố trớ theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiờn, sỏu nghiệm thức tương ứng năm loại thuốc và một ủối chứng, với bốn lặp lại.
Các nghiệm thức bao gồm các loại thuốc Starner 20WP, Physan 20L, Coc 85WP, Kasumin 2L, nước vụi và một nghiệm thức ủối chứng là nước cất. Mỗi loại thuốc ủược sử dụng ở 3 nồng ủộ khỏc nhau.
Chủng vi khuẩn sử dụng trong thớ nghiệm là 2 chủng vi khuẩn ủược phõn lập và tỏch rũng trờn giống hồng lửa và hồng tỉ muội vàng trong thời gian giỏm ủịnh bệnh ủốm lỏ.
Bảng 2.1. Nồng ủộ của cỏc loại thuốc sử dụng trong thớ nghiệm
STT Tờn thuốc Nồng ủộ thấp hơn khuyến cáo (%)
Nồng ủộ khuyến cáo (%)
Nồng ủộ gấp ủụi khuyến cáo (%)
1 Kasumin 2L 0,125 0,25 0,5
2 Coc 85 WP 0,0625 0,125 0,25
3 Nước vôi 6,25 12,5 25
4 Starner 20WP 0,0625 0,125 0,25
5 Physan 20L 0,05 0,1 0,2
* Tiến hành thí nghiệm
Giấy thấm Whatman ủược bấm thành từng khoanh nhỏ ủường kớnh 5 mm và ủược thanh trựng khụ ở nhiệt ủộ 1600C, 2 giờ. Nước cất sử dụng trong toàn bộ thớ
Hai chủng vi khuẩn phõn lập ủược ủem nhõn nuụi trong mụi trường King’ B 36 giờ. Sau ủú, hoà hai chủng vi khuẩn này vào nước cất thanh trựng thành huyền phự vi khuẩn (HPVK) với mật số 1010 cfu/ml. Sử dụng 100 àl HPVK của mỗi chủng vi khuẩn chà ủều trờn mặt ủĩa Petri.
Mỗi loại thuốc ủược pha ở ba nồng ủộ chứa trong ống nghiệm. Sau ủú ủổ ra ủĩa petri, cho cỏc khoanh giấy thấm vào và ủể giấy thấm rỏo hết nước khoảng 5 phỳt.
Dựng kẹp gấp lần lượt cỏc khoanh giấy thấm thuốc ủặt lờn mụi trường agar trong ủĩa Petri theo thứ tự nghiệm thức ủối chứng ủến cỏc nghiệm thức cú xử lý thuốc khỏc. Mỗi lần thay ủổi loại thuốc phải thay kẹp hoặc rửa sạch lại bằng nước cất.
ðem cỏc ủĩa Petri ủó bố trớ ủặt vào tủ ỳm rồi tiến hành theo dừi và quan sỏt ủể lấy chỉ tiêu.
* Chỉ tiêu ghi nhận, xử lý số liệu và thống kê
Chỉ tiờu ghi nhận bằng cỏch ủo bỏn kớnh vũng vụ khuẩn của mỗi nghiệm thức sau 24, 36 và 48 giờ sau khi bố trớ cỏc khoanh giấy thấm vào ủĩa Petri.
Xử lý số liệu: số liệu ghi nhận ban ủầu ủược chuyển ủổi sang x+0,5 Phõn tớch thống kờ số liệu thu thập ủược bằng phần mềm MSTATC
Hỡnh 2.2: Sơ ủồ thử nghiệm hiệu quả của thuốc ủối với vi khuẩn gõy bệnh ủốm lỏ vi khuẩn Ghi chú ðC: khoanh giấy thấm nước cất.
1, 2, 3, 4, 5 : Khoanh giấy thấm có tẩm thuốc trong thí nghiệm ( Starner 20WP, Physan 20L, Coc 85WP, Kasumin 2L, Nuớc vôi)
25 mm Khoanh giấy thấm
nước cất (ðC)
100 àl huyền phự vi khuẩn gây bệnh
ðC 5
4
3
2 1
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 KẾT QUẢ GIÁM ðỊNH BỆNH ðỐM LÁ GÂY BỆNH TRÊN HỒNG (Rosa sp.)
3.1.1 Quan sát và mô tả triệu chứng bệnh
Bệnh ủược ghi nhận trờn cỏc giống hồng như hồng lửa, hồng tỉ muội vàng, hồng nhung, hồng vàng... Bệnh gõy hại trờn lỏ là chủ yếu, từ lỏ non ủến lỏ trưởng thành. Tuỳ theo từng giống hoa hồng, ủặc ủiểm vết bệnh thể hiện khỏc nhau.
Trờn giống hồng lửa (Hỡnh 3.1 C và D): vết bệnh ban ủầu chỉ là một chấm nhỏ, màu nõu nhạt. Sau ủú vết bệnh phỏt triển theo cỏc gõn lỏ thành dạng ủốm cú gúc cạnh. Kớch thước vết bệnh thay ủổi cú khi lờn tới 20 mm. Sự hỡnh thành quầng vàng nhạt xung quanh vết bệnh, ủốm nhỏ riờng rẽ là một triệu chứng dễ quan sỏt. Quan sỏt mặt dưới lỏ, vết bệnh giới hạn và nhỡn thấy phần thịt lỏ màu nõu ủen, nhũn nước bờn trong lớp vỏch tế bào lỏ và khụng thấy rừ ủược những ủường gúc cạnh (Hỡnh 3.2 E và F). . Về sau nhiều ủốm nhỏ cú thể liờn kết lại với nhau tạo thành vết bệnh lớn bị hoại tử, có màu nâu rộng hơn và phần giữa vết bệnh có màu xám trắng.
Trên giống hồng nhung và hồng tỉ muội vàng (Hình 3.1 A và B): vết bệnh cũng cú một số ủặc ủiểm cơ bản như trờn giống hồng lửa nhưng kớch thước vết bệnh nhỏ hơn và khoảng 1-10 mm, ủường viền màu vàng xung quanh vết bệnh thể hiện không rõ.
Triệu chứng khi lây bệnh nhân tạo bằng phương pháp châm kim tạo vết thương sau ủú phun huyền phự vi khuẩn lờn mặt lỏ hồng, ủược ủặt trong phũng ủ bệnh ở nhiệt ủộ 23-250C. Sau 36 giờ trong phũng ủ bệnh, ủem ra nhà phun sương tạo ẩm ủộ cho bệnh phỏt triển. Tiến hành theo dừi ủến khi vết bệnh xuất hiện.
Trên giống hồng lửa và hồng tỉ muội vàng (Hình 3.3 C và D), khi tiêm chủng bệnh nhân tạo bằng cách châm kim tạo vết thương trên lá hồng, ngay tại vị trí châm kim khụng thấy xuất hiện ủường viền màu vàng, mà chỉ xuất hiện một ủưũng viền màu nõu ủen, nhỡn mặt trờn khụng thấy ủường gúc cạnh, kớch thước khoảng 1-2 mm.
Quan sỏt mặt dưới lỏ, ủiểm nhận dạng là giống bệnh tự nhiờn là nhũn nước. Bệnh không xuất hiện hết tất cả những vị trí châm kim mà chỉ một vì vị trí trên một lá hồng. ðiểm khác biệt giữa tiêm chủng nhân tạo và bệnh tự nhiên là vết bệnh không liên kết lại thành từng mãng lớn và không có viền màu vàng.
3.1.2 Xỏc ủịnh tỏc nhõn gõy bệnh
Bước ủầu tiờn, quan sỏt mẫu bệnh khi cắt nhỏ dưới kớnh hiển vi thấy ủược dịch vi khuẩn tuôn ra từ vết cắt ngay mô bệnh.
Tiếp theo, sau khi phát hiện sơ khởi tác nhân gây bệnh là vi khuẩn, ta tiến hành phân lập từ vết bệnh (cắt mẫu bệnh nơi có tiếp giáp giữa mô bệnh và mô khoẻ, thanh trựng mặt ngoài bằng Chlorin 1 % và rửa lại nhiều lần bằng nước cất vụ trựng), ủặt mẫu bệnh trờn mụi trường agar sau 24 giờ thấy ủược vi khuẩn phỏt triển trờn mụi trường agar tại mặt cắt của vết bệnh. Và tiến hành tách ròng trên môi trường King’s B.
Sau khi tỏch rũng vi khuẩn, tiến hành khảo sỏt một số ủặc ủiểm của mầm bệnh.
Hình dạng khuẩn lạc vi khuẩn trên môi trường King’s B có hình dạng tròn, nhô sau 24-36 giờ, sau ủú khuẩn lạc phỏt triển nhụ cao, bề mặt trơn, búng, ủường rỡa xung quanh nhẵn (Hình 3.3 A và B) và trên môi trường Wakimoto cải tiến thì vi khuẩn phát triển chậm (Agrios,2005).
Khuẩn lạc có màu vàng sáp ánh xanh sau khi nuôi cấy 24-36 giờ, màu sắc khuẩn lạc sẽ nhạt dần sau khi nuôi cấy 5 ngày(Phạm Văn Kim, 2000) .
Kết quả nhuộm Gram cho thấy chủng vi khuẩn ăn màu hồng. Theo nhà vi khuẩn học ðan Mạch Hans Christan Gram, Kết quả trên cho thấy chủng vi khuẩn này nhuộm gram âm (Hình 3.3 D).
Kết quả nhuộm capsules cho thấy vi khuẩn này có capsules nên khuẩn lạc hình thành cú ủộ trơn búng.
Hỡnh dạng vi khuẩn cú hỡnh que thẳng, một ủầu trũn, một ủầu nhọn, di chuyển bằng roi, cú 1 lụng roi ở một ủầu (hỡnh 3.3 C và E) (Phạm Văn Kim, 2000; Agrios, 2005). Kớch thước vi khuẩn 0,6 x 1,3-2,0 àm
Hỡnh 3.1 Triệu chứng bệnh ủốm vi khuẩn trờn cỏc giống hoa hồng Ghi chú: A: Triệu chứng bệnh trên giống Hồng nhung
B: Triệu chứng trên Hồng tỉ muội vàng C, D : Triệu chứng trên giống Hồng lửa
C D
A B
Hỡnh 3.2: Triệu chứng mặt trờn (E), mặt dưới (F) của bệnh ủốm lỏ vi khuẩn trờn cõy hoa hồng
Hỡnh 3.3 Triệu chứng bệnh ủốm lỏ trờn hồng.
A: Triệu chứng nhiễm bệnh tự nhiên trên giống hồng lửa
B: Triệu chứng nhiễm bệnh tự nhiên trên giống hồng tỉ muội vàng C: Triệu chứng lây nhiễm nhân tạo trên giống hồng lửa
D: Triệu chứng lây nhiễm nhân tạo trên giống hồng tỉ muội vàng
E F
C D
A B
Hỡnh 3.4 Tỏc nhõn Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ trờn cõy hoa hồng Ghi chú: A: Tách ròng vi khuẩn trên môi trường King’s B
B:Hình dạng khuẩn lạc của vi khuẩn C, D : Hình dạng của vi khuẩn
B H
E
D A
F C
3.2 HIỆU QUẢ CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC ðỐI VỚI VI KHUẨN GÂY BỆNH ðỐM LÁ TRÊN HỒNG TRONG ðIỀU KIỆN PHÒNG THÍ NGHIỆM
Thớ nghiệm ủược tiến hành với năm loại thuốc hoỏ học Starner 20WP, Physan 20L, Coc 85WP, Kasumin 2L và nước vụi ở ba nồng ủộ khỏc nhau và một ủối chứng là nước cất.
Nguồn bệnh ựốm lá ựược thu thập tại phường Tân Quy đông, thị xã Sa đéc, tỉnh ðồng Thỏp. Sau ủú, nguồn vi khuẩn ủược phõn lập tại bộ mụn Bảo Vệ Thực Vật, khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, trường ðại Học Cần Thơ gồm hai chủng vi khuẩn trên giống hồng lửa và hồng tỉ muội vàng.
3.2.1 Chủng vi khuẩn Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ vi khuẩn phõn lập trờn giống Hồng tỉ muội vàng
Kết quả bảng 3.1 cho thấy ở nồng ủộ thấp hơn khuyến cỏo thỡ chỉ cú 2 loại thuốc có hiệu quả là Starner 20WP và Physan 20L. ðiều này thể hiện chỉ tiêu bán kính vòng vô khuẩn của các nghiệm thức có xử lý với Starner 20WP hoặc Physan 20L lớn hơn cú ý nghĩa so với nghiệm thức ủối chứng khụng xử lý ở cả ba thời ủiểm khảo sỏt (24, 36 và 48 giờ). Tại thời ủiểm 48 giờ, bỏn kớnh vũng vụ khuẩn của Starner 20WP là 5,88 mm; của Physan 20L là 1,31 mm trong khi của ủối chứng là 0,00 mm. Trong hai loại thuốc trên, Starner 20WP cho hiệu quả cao hơn Physan 20L.
Như vậy ở nồng ủộ thấp hơn khuyến cỏo, thuốc Starner 20WP cú hiệu quả tốt nhất trong việc hạn chế sự phỏt triển của vi khuẩn gõy bệnh ủốm lỏ hoa hồng trong ủiều kiện phũng thớ nghiệm, kế ủến là thuốc Physan 20L .
Bảng 3.1 Hiệu quả của 5 loại thuốc (thấp hơn nồng ủộ khuyến cỏo) ủối với vi khuẩn Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ trờn giống hồng tỉ muội vàng trong ủiều kiện phũng thớ nghiệm.
Nghiệm thức Nồng ủộ (%)
Bán kính vòng vô khuẩn (mm)
24 giờ 36 giờ 48 giờ
Kasumin 2L Coc 85WP Nước Vôi Starner 20WP Physan 20L ðối chứng
0,125 0,0625
6,25 0,0625
0,05
0,00 c 0,00 c 0,00 c 5,75 a 1,50 b 0,00 c
0,00 c 0,00 c 0,00 c 5,50 a 1,50 b 0,00 c
0,00 c 0,00 c 0,00 c 5,88 a 1,31 b 0,00 c
Mức ý nghĩa * * *
CV (%) 9,80 10,55 6,87
Ghi chỳ: Số liệu cú chuyển ủổi sang x+0,5 khi thống kờ.
* Khác biệt mức ý nghĩa 5%
Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5%.
Qua bảng 3.2, ta thấy ở nồng ủộ khuyến cỏo, cỏc nghiệm thức ủược xử lý với cỏc húa chất Starner 20WP, Physan 20L và Coc 85WP ủều cho bỏn kớnh vũng vụ khuẩn lớn hơn cú ý nghĩa so với ủối chứng khụng xử lý ở tất cả cỏc thời ủiểm quan sỏt. Tại thời ủiểm quan sỏt 48 giờ, bỏn kớnh vũng vụ khuẩn của cỏc nghiệm thức xử lý với Starner 20WP, Physan 20L và Coc 85WP lần lượt là 7,63 mm, 1,38 mm và 1,25 mm. Trong số ba loại thuốc hóa học trên, Thuốc Starner 20WP cho hiệu quả cao nhất trong việc ức chế sự phỏt triển của vi khuẩn gõy bệnh ủốm lỏ trờn hồng. Kế ủến là thuốc Physan 20L và Coc 85WP cho hiệu quả phũng trị vi khuẩn gõy bệnh ủốm lỏ trong ủĩa Petri. Cuối cựng là nước vụi 12,5% cho hiệu quả kộm nhất.
Bảng 3.2 Hiệu quả của 5 loại thuốc (nồng ủộ khuyến cỏo) ủối với vi khuẩn Xanthomonas sp.
gõy bệnh ủốm lỏ trờn hồng tỉ muội vàng trong ủiều kiện phũng thớ nghiệm
Nghiệm thức Nồng ủộ (%)
Bán kính vòng vô khuẩn (mm)
24 giờ 36 giờ 48 giờ
Kasumin 2L Coc 85 WP Nước Vôi Starner 20WP Physan 20L ðối chứng
0,25 0,125
12,5 0,125
0,1
0,00 c 1,38 b 0,00 c 7,25 a 1,25 b 0,00 c
0,00 d 1,44 b 0,50 c 6,88 a 1,38 b 0,00 d
0,00 c 1,25 b 0,38 c
7,63 a 1,38 b 0,00 c
Mức ý nghĩa * * *
CV (%) 8,31 11,21 10,60
Ghi chỳ: Số liệu cú chuyển ủổi sang x+0,5 khi thống kờ.
* khác biệt mức ý nghĩa 5%
Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5%.
Nhỡn chung ở nồng ủộ gấp ủụi khuyến cỏo (Bảng 3.3),Thuốc Starner 20WP cú ảnh hưởng và hiệu quả mạnh nhất ủến sự phỏt triển của vi khuẩn trong ủĩa Petri.
Nghiệm thức ủược xử lý với Starner 20WP cú bỏn kớnh vũng vụ khuẩn lớn hơn cú ý nghĩa so với cỏc nghiệm thức cũn lại ở tất cả cỏc thời ủiểm khảo sỏt. Kế ủến là Physan 20L cũng có khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn nhưng kém hơn thuốc Starner 20WP. Hai nghiệm thức ủược xử lý với nước vụi 25% và Coc 85WP cú bỏn kớnh vũng vụ khuẩn lớn hơn so với ủối chứng khụng xử lý. ðiều này cho thấy, ngoại trừ Kasumin 2L, tất cả cỏc nghiệm thức ủược xử lý thuốc ủều ủạt hiệu quả mong muốn. Tại thời ủiểm ghi nhận chỉ tiờu 48 giờ sau khi bố trớ cỏc khoanh giấy
85WP và nước vôi 25% với bán kính vòng vô khuẩn lần lượt là 7,13 mm, 1,88 mm, 1,25 mm và 1,63 mm.
Bảng 3.3 Hiệu quả của 5 loại thuốc (gấp ủụi nồng ủộ khuyến cỏo) ủối với vi khuẩn
Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ trờn hồng tỉ muội vàng trong ủiều kiện phũng thớ nghiệm.
Nghiệm thức Nồng ủộ (%)
Bán kính vòng vô khuẩn (mm)
24 giờ 36 giờ 48 giờ
Kasumin 2L Coc 85WP Nước Vôi Starner 20WP Physan 20L ðối chứng
0,5 0,25 25 0,25
0,2
0,50 d 1,25 c 1,13 c 7,63 a 2,06 b 0,00 d
0,50 c 1,38 b 1,44 b 6,75 a 1,75 b 0,00 c
0,50 c 1,25 b 1,63 b 7,13 a 1,88 b 0,00 c
Mức ý nghĩa * * *
CV (%) 12,05 12,84 13,92
Ghi chỳ: Số liệu cú chuyển ủổi sang x+0,5 khi thống kờ.
* khác biệt mức ý nghĩa 5%
Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5%.
Túm lại, Hiệu quả của 5 loại thuốc hoỏ học ủối với chủng vi khuẩn
Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ phõn lập trờn giống hồng tỉ muội vàng cú sự khỏc biệt qua cỏc nồng ủộ thử nghiệm. Thuốc Starner 20WP (hoạt chất Oxolinic acide) cho hiệu quả cao nhất trong việc khống chế sự phỏt triển của khuẩn lạc vi khuẩn trong ủĩa Petri và thể hiện hiệu quả ở cả 3 nồng ủộ thớ nghiệm là 0.0625%; 0,125% và 0,25%.
Kế ủến là thuốc Physan 20L (Quaternary Ammonium Salts) cho hiệu quả thấp hơn. Cỏc loại thuốc Coc 85WP (Copper Oxychloride) và nước vôi cũng có khả năng khống chế sự phỏt triển trờn nhưng chỉ thể hiện hiệu quả ở cỏc nồng ủộ cao, cụ thể là Coc 85WP 0,125 % và 0,25%, nước vôi 12,5 % và 25%. Riêng Kasumin 2L (Kasugamycin) không thể hiện hiệu quả ở cỏc nồng ủộ ủó khảo sỏt.
3.2.2 Chủng vi khuẩn Xanthomonas sp. gõy bệnh ủốm lỏ vi khuẩn phõn lập trờn giống hồng lửa
Qua khảo sỏt ủường kớnh vũng vụ khuẩn ở cỏc thời ủiểm 24, 36 và 48 giờ, cỏc nghiệm thức ủược xử lý với Starner 20WP, Coc 85WP và Physan 20L ủều cho bỏn kớnh vũng vụ khuẩn lớn hơn cú ý nghĩa so với ủối chứng. Trong ủú, bỏn kớnh vũng vụ khuẩn của nghiệm thức Starner 20WP lại lớn hơn có ý nghĩa so với hai nghiệm thức Coc 85WP và Physan 20L. Như vậy, ở cỏc nồng ủộ ủang khảo sỏt, thuốc Starner 20WP cho hiệu quả ức chế sự phỏt triển của vi khuẩn cao nhất, sau ủú mới ủến Coc 85WP và Physan 20L (Bảng 3.4).