Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.2. Hoàn thiện kỹ thuật giải đông – rửa loại bỏ glycerol và đặc điểm của HCĐL
3.2.1. Thời gian đông lạnh hồng cầu
Đến thời điểm kết thúc nghiên cứu toàn bộ 210 túi HCĐL đã đƣợc giải đông ở nhiệt độ 36 ± 10C trong bồn giải đông với thời gian trung bình là 10 phút. Thời gian đông lạnh của các túi HC theo bảng 3.18
Bảng 3. 18.Thời gian lưu trữ HCĐL đến lúc giải đông
Thời gian
Số lƣợng đơn vị HCL
đông lạnh
Tỷ lệ Trung bình
>3-6 tháng 99 47,14%
15,18±1,05 tháng (455 ngày)
>6-12 tháng 63 30,00%
>12-18 tháng 34 16,19%
>24 tháng 9 4,29%
đến 32 tháng 5 2,38%
Tổng cộng 210 100%
Nhận xét:
Thời gian lưu trữ trung bình là: 15,18 ± 1,05 tháng (455 ngày). Lưu trữ và bảo quản đông lạnh lâu nhất là 32 tháng (995ngày).
3.2.2. Tiến hành rửa túi HCĐL đã đƣợc giải đông
Sau khi đƣợc giải đông, tất cả các túi HCĐL trong nghiên cứu đều đƣợc rửa bằng hệ thống máy ACP215. Quy trình thực hiện rửa HCĐL đƣợc mô tả chi tiết theo phụ lục 6
3.2.3. Kết quả sản phẩm HCĐL sau rửa glycerol
Qua quá trình đông lạnh, giải đông và rửa loại bỏ glycerol các thông số của túi HCĐL sau rửa sẽ có sự thay đổi so với túi HCL sau glycerol hóa. Các đặc điểm này đƣợc mô tả trong các bảng kết quả sau.
Bảng 3. 19. Kết quả theo tham số thể tích và Hct của túi HCĐL sau rửa Thể tích
MTP
Thể tích HCĐL
Hct (%) Trung bình
Mức Hct (%) Số Thấp nhất Cao nhất mẫu
250ml 172,29 ± 10,79 60,55 ± 2,91 57,1 64,7 16 350ml 232,27 ± 10,94 60,94 ± 2,31 55,5 65 131 450ml 330,41 ± 10,12 61,20 ± 2,88 55,6 64,8 63 Nhận xét:
HCĐL sau rửa loại bỏ glycerol có thể tích tăng dần theo thể tích túi máu lấy ban đầu tuy nhiên Hct trung bình không khác nhau.
Bảng 3. 20.Kết quả theo tham số Hb của túi HCĐL sau rửa
Thể tích MTP
Lƣợng Hb của túi HCL (g/túi) Trung
bình
Độ lệch chuẩn
Thấp
nhất Cao nhất
250ml 25,18 ± 1,92 23,3 28,1
350ml 40,62 ± 2,43 32,3 45,6
450ml 52,05 ± 3,66 41,8 58,7
Nhận xét:
Lƣợng Hb trung bình của túi HCĐL sau rửa tăng dần theo thể tích máu lấy ban đầu, cao nhất là 52,05 g/túi đối với loại thể tích 450ml.
Bảng 3. 21.So sánh Hb của túi HCĐL sau glycerol và sau giải đông – rửa
Thể tích MTP
Lƣợng Hb (g/túi) HCL sau P
glycerol hóa
HCL sau đông lạnh giải đông - rửa
Hao hụt
% 250ml 27,93 ± 2,09 25,18 ± 1,92 2,75 ± 0,41
(9,85) P < 0,001 350ml 43,58 ± 2,41 40,62 ± 2,43 2,96 ± 0,59
(6,79) P < 0,001 450ml 55,13 ± 3,64 52,05 ± 3,66 3,08 ± 0,66
(5,58) P < 0,001 Nhận xét:
Mức Hb của túi HCĐL sau giải đông – rửa so với Hb trước đông lạnh có giảm, mức ở túi máu có thể tích nhỏ nhƣ loại 250ml là 9,85%, cao hơn túi máu 350ml và 450ml. Mức hao hụt Hb của túi HCĐL khác biệt có ý nghĩa thống kê.
Bảng 3. 22.SLBC của túi HCĐL Thể tích
MTP
SLBC (x108)/ túi HCL
Trung bình Độ lệch chuẩn Thấp nhất Cao nhất
250ml 0,39 ± 0,34 0,01 0,73
350ml 0,37 ± 0,35 0,01 0,74
450ml 0,42 ± 0,36 0,01 0,74
Trung bình 0,39 ± 0,35 0,01 0,74
Nhận xét:
SLBC trong túi HCĐL cao nhất là 0,74x108/túi, và thấp nhất 0,01x108/túi.
Trung bình SLBC là từ 0,39 ± 0,35 (x108)/túi. Có sự dao động nhiều về SLBC trong các túi HCĐL.
Bảng 3. 23.So sánh SLBC của HCĐL sau glycerol hóa và sau giải đông –rửa Thể tích
MTP ban đầu
SLBC toàn bộ/túi (x108/) HCL sau
glycerol hóa
HCL sau giải đông - rửa
Hao hụt Tỷ lệ % P
250ml 5,43 ± 1,79 0,39 ± 0,34 5,04 ± 1,53 92,90 P < 0,001 350ml 6,52 ± 2,00 0,37 ± 0,35 6,15 ± 1,79 94,33 P < 0,001 450ml 6,97 ± 2,17 0,42 ± 0,36 6,54 ± 2,00 93,85 P < 0,001 Nhận xét:
SLBC của túi HCĐL sau giải đông và rửa so với HC sau glycerol hóa đã giảm đến ≥ 92.90%.
Bảng 3. 24.Nồng độ K+, Hct, pH, glycerol của túi HCĐL giải đông -rửa
Đặc điểm Trung
bình
Độ lệch chuẩn
Thấp nhất Cao nhất
Tỉ lệ Hct túi máu (%) 60,99 ± 2,54 55,5 65,0
Độ pH 6,90 ± 0,10 6,8 7,1
Nồng độ K+ ngoại bào (mEq/L) 1,23 ± 0,65 0,5 1,8 Nồng độ glycerol còn lại 1,3335 0,00001 1,3335 1,3335
Cấy máu Âm tính
Nhận xét:
Mức Hct của túi máu là 60,99 ± 2,54%, nồng độ K+ ngoại bào là 1,23 ± 0,65 mEq/l, độ pH 6,90 ± 0,10, cấy máu âm tính trên 210 mẫu, nồng độ glycerol còn lại 1,3335 tương đương <1g%.
Bảng 3. 25.So sánh đặc điểm nồng độ K+, pH, Hct của túi HCĐL sau glycerol và sau giải đông – rửa
Tham số Hct % K+ ngoại bào
(mEq/L) pH Cấy
máu
N 210
HCL sau glycerol hóa 59,69 ± 4,78 5,02 ± 0,85 7,00 ± 0,20 Âm tính HCL sau giải đông- rửa 60,99 ± 2,54 1,23 ± 0,65 6,90 ± 0,10 Âm tính
P P > 0,05 P < 0,001 P > 0,05
Nhận xét:
Đặc điểm chung của túi HCĐL đƣợc giải đông và rửa có mức Hct và độ pH không thay đổi, nhƣng nồng độ K+ ngoại bào giảm nhiều từ 5,02 ± 0,85 mEq/L xuống còn 1,23 ± 0,65 mEq/L.
Bảng 3. 26.Lƣợng Hb, Hct, thể tích túi HCĐL theo thể tích máu lấy ban đầu Loại chế phẩm
HCĐL Chỉ số Hb
(g/túi)
Hct Thể tích túi máu HCL điều chế từ MTP 250 mL ≥ 22 0,55-0,65 172,29±10,79 HCL điều chế từ MTP 350 mL ≥ 31 0,55-0,65 232,27±10,94 HCL điều chế từ MTP 450 mL ≥ 40 0,55-0,65 330,41±10,12
Nhận xét:
HCL đƣợc điều chế từ thể tích máu toàn phần (MTP) sau giải đông - rửa có mức Hb dao động từ ≥ 22g đến ≥ 40g/túi. Có Hct trung bình từ 55% đến 65% và thể tích túi máu từ 172,29 ml đến 330,41ml.
Hình hồng cầu trước, trong bảo quản đông lạnh và sau rửa
Hình 3.1. Trước đông lạnh
Hình 3.2. Sau đông lạnh
Hình 3.3. Sau rửa
Nhận xét: Hồng cầu có hình dạng bình thường trước, sau đông lạnh và sau rửa.
3.2.4. So sánh các tham số trong quá trình xử lý đông lạnh hồng cầu
Bảng 3. 27.Lượng Hb hao hụt sau giải đông rửa so với trước glycerol hóa của túi HCĐL
Thể tích MTP ban
đầu
Hb toàn bộ (g/túi) Hb trước glycerol
hóa
Hb sau giải
đông và rửa Hao hụt toàn bộ P 250ml 28,55 ± 2,08 25,18 ± 1,92 3,37 ± 0,38 P < 0,001 350ml 44,20 ± 2,40 40,62 ± 2,43 3,58 ± 0,60 P < 0,001 450ml 55,82 ± 3,60 52,05 ± 3,66 3,77 ± 0,66 P < 0,001
Nhận xét:
Lượng Hb hao hụt sau giải đông và rửa so với trước glycerol hóa của túi máu loại thể tích 250 ml (nhóm 1) là 3,37 ± 0,38g/túi, túi máu loại thể tích 350 ml (nhóm 2) là 3,58 ± 0,60g/túi và cao nhất đối với túi máu loại thể tích 450 ml (nhóm 3) là 3,77 ± 0,66g/ túi.
Bảng 3. 28.Lƣợng Hb hao hụt trong toàn bộ quá trình xử lý
Tham số túi HCL Hb hao hụt (g/túi) P
250ml (1) 350ml (2) 450ml (3) HCL trước
và sau Glycerol
hóa
Hb (g/túi) (%)
0,61 ± 0,29 (2,16)
0,62 ± 0,24 (1,40)
0,70 ± 0,26 (1,25)
(1) và (2) P = 0,95 (2) và (3) P = 0,30 (1) và (3) P = 0,21 HCL trước
và sau giải đông- rửa
Hb (g/túi) (%)
2,75 ± 0,41 (9,85)
2,96 ± 0,59 (6,79)
3,08 ± 0,66 (5,58)
(1) và (2) P = 0,83 (2) và (3) P = 0,86 (1) và (3) P = 0,76 Hb mất đi
trong toàn bộ quá trình
xử lý
Hb (g/túi) (%)
3,37 ± 0,38 (11,8)
3,58 ± 0,60 (8,09)
3,77 ± 0,66 (6,76)
(1) và (2) P = 0,82 (2) và (3) P = 0,25 (1) và (3) P = 0,38 Tỷ lệ % Hb còn lại sau
cùng 88,2 91,91 93,24 P < 0,05
Lƣợng Hb hao hụt
trung bình (g/túi) 3,62g/túi
Tỷ lệ % Hb hao hụt 7,78%
Tỷ lệ % Hb còn lại 92,22%
Nhận xét:
Mặc dù lƣợng Hb hao hụt nhiều ở túi máu có thể tích 450ml nhƣng tỷ lệ % Hb hao hụt trong các giai đoạn của toàn bộ quá trình xử lý lại thấp nhất ở túi máu thể tích 450ml và cao nhất ở túi máu thể tích 250ml. Do đó lƣợng Hb còn lại trong túi máu thể tích 450ml có tỷ lệ cao nhất, và thấp nhất lại ở túi máu thể tích 250ml.
Hao hụt Hb trung bình là 3,62g/túi chiếm 7,78%, % Hb còn lại là 92,22%. Lƣợng Hb hao hụt giữa các nhóm trong cùng giai đoạn không có sự khác biệt.
Biểu đồ 3. 4. Tỷ lệ Hb còn lại sau giải đông rửa loại bỏ glycerol của HCĐL Nhận xét: tỷ lệ Hb còn lại của sản phẩm đạt 92,22%.
Bảng 3. 29.So sánh SLBC qua các giai đoạn của quá trình xử lý Tham số
SLBC toàn bộ/túi (x108/) Loại thể tích
250ml
Loại thể tích 350ml
Loại thể tích 450ml Trước glycerol
hóa
6,14
± 0,73 P < 0,05 7,12
± 1,15 P < 0,05 7,64
± 0,93 P < 0,05 Sau glycerol
hóa
5,43
± 1,79 P < 0,05 6,52
± 2,0 P < 0,05 6,97
± 2,17 P < 0,05 Sau giải đông
và rửa
0,39
± 0,34 P < 0,05 0,37
± 0,35 P < 0,05 0,42
± 0,36 P < 0,05
% mất đi sau
cùng 93,73 94,81 94,39
% SLBC trung
bình mất đi 94,60%
SLBC còn lại 0,39 ± 0,35 (x108)/túi
Nhận xét:
Số lƣợng bạch cầu giảm theo từng giai đoạn của quá trình đông lạnh hồng cầu.
Giai đọan rửa loại đƣợc hầu hết bạch cầu, trong túi máu còn lại 0,39±0,35x108 /túi.
100% 92.22%
Hb túi HCL Hb túi HCĐL sau rửa
Bảng 3. 30.So sánh kết quả chỉ số Hct, K+, và pH của HCĐL Hct % K+ ngoại bào
(mEq/L)
pH Cấy máu
N 210
HCL trước glycerol
hóa 74,11 ± 4,82 4,29 ± 1,12 7,1 ± 0,2 Âm tính HCL sau giải đông-
rửa 60,99 ± 2,54 1,23 ± 0,65 6,9 ± 0,1 Âm tính P P < 0,005 P < 0,005 P > 0,05
Nhận xét:
Nồng độ K+ ngoài tế bào sau rửa giảm so với trước glycerol hóa, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với P < 0,005. Không có sự thay đổi độ pH túi HCĐL trước sau giải đông - rửa HC, Hct của túi máu có thay đổi giải từ 74.11 ± 4,82% xuống còn 60,99 ± 2,54% sau giải đông – rửa.