CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.2. Nghiên cứu tạo chế phẩm phân hủy hợp chất hữu cơ từ vi sinh vật bản địa dạng gốc
Quy trình thí nghiệm được thực hiện như sau:
- Bước 1: Chuẩn bị vật liệu thu thập
Vật liệu thu thập (cơm) trải thành một lớp 2 - 3 cm trong khay gỗ (40x40x10cm) hoặc khay nhựa.
Hình 3.1. Vật liệu thu thập vi sinh vật bản địa - Bước 2: Đặt mẫu
Tìm nơi có tán tre hoặc tán cây rậm rạp (thường là nơi tập trung nhiều VSV nhất), đào một hố nông bằng khoảng 1/2 chiều cao khay gỗ, cho vật liệu đã chuẩn bị vào, dùng lá mục, cành khô gần ngay tại đó phủ sao cho kín, nếu sợ mưa có thể phủ lên một lớp nilon.
Hình 3.2. Cách đặt mẫu để thu vi sinh vật bản địa - Bước 3: Thu thập
Sau 5 - 6 ngày, bề mặt trong khay gỗ sẽ bị bao phủ bởi một lớp mốc trắng, đôi khi có lẫn một số mốc khác màu vào. Thu lấy lớp chứa mốc trắng (không nên hoặc hạn chế dùng đến phần chứa các mốc màu khác vì các VSV có hại có thể lẫn vào).
Hình 3.3. Thu thập phần mốc trắng chứa vi sinh vật bản địa - Bước 4: Tăng sinh khối bằng cách ủ với rỉ đường
Thu lấy lớp chứa mốc trắng đem trộn với rỉ đường theo tỷ lệ khối lượng 1 : 1, cho vào đầy khoảng 2/3 một hũ chứa sạch, dùng giấy báo niêm phong lại, để nơi râm mát trong khoảng 7 ngày.
Hình 3.4. Ủ mốc trắng với rỉ đường
- Bước 5: Thu thập chế phẩm
Sau 7 - 10 ngày, đem chắt lọc dịch lỏng lấy phần IMO gốc (lỏng).
Hình 3.5. Dịch lỏng IMO (gốc) - Bước 6: Nhân sinh khối với rỉ đường
Lấy phần lọc dịch lỏng đem trộn với rỉ đường theo tỷ lệ khối lượng 1:1, cho vào đầy khoảng 2/3 một hũ chứa sạch, dùng giấy báo niêm phong lại, để nơi râm mát trong khoảng 7 ngày.
Hình 3.6. Nhân sinh khối với rỉ đường
Môi trường dinh dưỡng là môi trường sống của VSV, ở đó chúng sinh ra, lớn lên và thực hiện mọi hoạt động của cơ thể sống. Do vậy, môi trường dinh dưỡng cần phải đầy đủ thức ăn cần thiết và phù hợp cho sự phát triển của VSV.
Đồng thời, để lên men chủng ở quy mô lớn và ứng dụng vào thực tế thì ngoài những yêu cầu trên thì môi trường dinh dưỡng còn phải dễ kiếm và rẻ tiền.
Chính vì vậy, chúng tôi chọn nuôi cấy VSV bản địa trên môi trưởng có bổ sung rỉ đường giúp cho VSV sinh trưởng và phát triển.
Trong quá trình sinh trưởng và phát triển, các vi khuẩn luôn chịu tác động của nhiều yếu tố môi trường, đó là nguồn dinh dưỡng và các điều kiện môi trường khác (nhiệt độ, pH ...). Bất cứ sự thay đổi nào của môi trường nuôi cấy đều có tác động trực tiếp đến hoạt động sống của vi khuẩn, có thể là tốt hơn hoặc cũng có thể theo chiều hướng xấu đi. Do vậy, nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố môi trường nhằm tìm ra điều kiện tốt nhất để vi khuẩn sinh trưởng và phát triển. Qua nghiên cứu, nhận thấy các chủng VSV phát triển trong khoảng nhiệt độ 20 - 50oC; trong đó nhiệt độ thích hợp nhất là từ 25 - 35oC. Ở ngoài khoảng nhiệt độ này (20, 40, 45, 50oC), vi khuẩn vẫn phát triển nhưng mật độ không cao, chứng tỏ đó không phải là nhiệt độ thích hợp cho chúng phát triển. Nguyên nhân là do nhiệt độ ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme và tốc độ của các phản ứng hóa học trong tế bào nên ảnh hưởng tới tốc độ sinh trưởng của VSV. Với loài VSV chỉ sinh trưởng được trong một khoảng nhiệt độ nhất định.
Từ kết quả nuôi cấy, đặc điểm sinh hóa có thể dự đoán tên các chủng VSV như sau: Bacillus licheniformis và Bacillus subtilis. Thông thường chế phẩm men vi sinh chứa nhóm vi khuẩn Bacillus sp. (trong đó có: B. Subtilis, B.
Licheniformis, B. Megaterium, B. Coagulans, B. Cereus, B. Pumilus, B.
Amiloliquefaciens,..v.v. ) có tác dụng phân huỷ nhanh các hợp chất hữu cơ, làm mất mùi hôi, kích thích sự phát triển các vi khuẩn có lợi, cạnh tranh môi trường sống, làm giảm số lượng vi khuẩn có hại gây bệnh, làm ổn định môi trường.
Giúp chuyển hoá các chất hữu cơ như: xác động thực vật, cặn bã thành CO2 và nước; chuyển các chất độc hại như: NH3, NO2- ... [12].
Việc sử dụng VSV có hoạt tính phân huỷ các hợp chất hữu cơ là giải pháp thân thiện, bền vững với môi trường, khả thi và kinh tế, do không gây ảnh hưởng đến chất lượng hệ sinh thái.