1.2. Tổng quan về loài Murdannia bracteata
1.2.4. Tác dụng sinh học của Murdannia bracteata
➢ Tác dụng kháng Helicobacter pylori
Năm 2005, Wang Yuan Chuen cùng cộng sự đã thử nghiệm và sàng lọc tác dụng kháng Helicobacter pylori của dịch chiết 50 loài thảo dược Đài Loan. Dung môi chiết được sử dụng là ethanol 95%. Thử nghiệm thực hiện trên 10 chủng Hp: BCRC 17021, BCRC 17023, BCRC 17026, BCRC 17027, BCRC 15415, QU 108, QU 141, QU 144, QU 150 và QU 181.
Theo đó, dịch chiết của M. bracteata cho hoạt tính kháng Hp trung bình với khả năng ức chế 8/10 chủng thử nghiệm. [47]
➢ Tác dụng chống viêm
Khi các đại thực bào được hoạt hóa, việc sản sinh quá mức nitơ oxit (NO) thông qua NO synthase cảm ứng (iNOS) là một trong những yếu tố gây viêm. Để làm sáng tỏ tác dụng chống viêm của M. bracteata, năm 2006, Wang Guei Jane cùng các cộng sự đã tiến hành nghiên cứu phân lập các hoạt chất và thử tác dụng trên iNOS ở các đại thực bào được hoạt hóa bởi lipopolysaccharid (LPS).
Dịch chiết methanol của M. bracteata được phân đoạn bằng chiết lỏng- lỏng, sử dụng các dung môi n-hexan, ethyl acetat, n-butanol và H2O. Trong đó, phân đoạn ethyl acetat cho hoạt tính ức chế mạnh nhất trên iNOS. Phân đoạn này sau đó được sắc ký bằng cột Sephadex LH-20 và HPLC, phân lập được 4 hợp chất (1 – 4). Hai hydroxybutenolid và isovitexin cho thấy tác dụng ức chế tổng hợp NO ở các đại thực bào RAW 264.7 được kích thích bởi LPS. Trong số đó, hoạt tính của bracteanolid A (1) là mạnh nhất. Tác dụng ức chế tổng hợp NO có liên quan đến giảm hoạt động của protein iNOS.
Tác dụng điều hòa hoạt động iNOS là chọn lọc, vì nó không ảnh hưởng đến quá trình giãn mạch do giải phóng NO nội mạc khi bị kích thích bởi acetylcholin, đặc trưng cho hoạt động của NO synthase nội mạc (eNOS).
Nghiên cứu này cung cấp bằng chứng khoa học cho việc sử dụng M.
bracteata với tác dụng chống viêm trong y học cổ truyền. Ngoài ra, hoạt tính ức chế chọn lọc iNOS của bracteanolid A có tiềm năng để phát triển thành thuốc ức chế chọn lọc iNOS phục vụ điều trị trong tương lai. [46]
14
➢ Tác dụng bảo vệ gan
Năm 2010, Yam Mun Fei cùng các cộng sự đã nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan của dịch chiết methanol toàn cây M. bracteata. Dịch chiết methanol của M. bracteata (ME) có tác dụng bảo vệ gan có thể do các đặc tính chống oxy hóa và dọn gốc tự do. [49]
Thử nghiệm in vitro cho thấy ME có khả năng ức chế hình thành gốc tự do 2,2’-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) với EC50 = 2,82 ± 0,009 mg/mL.
Ngoài ra, khi cho chuột uống ME (liều 500mg/kg hoặc 1000mg/kg) trước khi gây nhiễm độc gan bằng CCl4, quan sát thấy hoại tử mô ở gan giảm. Sự tăng hoạt độ men gan (AST và ALT huyết thanh) và nồng độ malondialdehyd (MDA) trong huyết tương cũng bị ức chế đáng kể. ME còn ức chế peroxid hóa lipid trong mô gan với EC50 = 1,785 mg/mL 0,01 mg/mL. Tác dụng bảo vệ gan của dịch chiết có thể được giải thích do hàm lượng 10% các hợp chất chứa nhóm phenol, bởi nhiều hợp chất trong nhóm này đã được chứng minh về hoạt tính chống oxy hóa và bảo vệ gan.
➢ Tác dụng gây độc tế bào ung thư gan và ức chế α-glucosidase
Nghiên cứu của Ooi Kheng Leong và các cộng sự năm 2014 được thực hiện nhằm đưa ra cơ sở khoa học cho việc sử dụng M. bracteata điều trị ung thư gan và tiểu đường trong y học cổ truyền Malaysia. Dược liệu sau khi phơi khô và xay được chiết bằng các dung môi hexan, chloroform và methanol, sau đó thử độc tính từng dịch chiết trên tế bào ung thư biểu mô gan HepG2 và hoạt tính ức chế α-glucosidase. [39]
Sàng lọc sơ bộ các dịch chiết cho thấy tác dụng ức chế tế bào HepG2 chỉ có ở dịch chiết hexan (HE), với EC50 = 37,17 1,00 μg/mL. α-tocopherol, thành phần chính của HE, đã được ghi nhận có tác dụng gây độc tế bào đối với nhiều dòng tế bào ung thư ở chuột và người [9, 10, 23]. Chất này còn có khả năng khuếch đại quá trình apoptosis bằng cách làm tăng biểu hiện caspase 3 ở một số dòng tế bào ung thư của người [34]. Hoạt tính khuếch đại apoptosis có thể giải thích do nhóm methyl, đuôi hydrocarbon, cấu trúc vòng và tính thân dầu của α-tocopherol, làm nó dễ đi vào huyết tương hoặc màng ty thể để kích hoạt biểu hiện caspase 3 [8, 11]. Bên cạnh đó, apigenin cũng đã
15
được ghi nhận tác dụng kích hoạt apoptosis thông qua hoạt hóa caspase 3, 7, 9, 10 trong các tế bào HepG2 [26]. Do đó, α-tocopherol (10) và dẫn xuất của apigenin (20) có thể là tác nhân chính gây độc tế bào và kích hoạt quá trình apoptosis của các tế bào HepG2.
HE không chỉ gây độc tế bào ung thư biểu mô gan mà còn ức chế α- glucosidase, với EC50 = 117,04 ± 2,34 g/mL. Việc ức chế enzym làm giảm hấp thu carbohydrat ở ruột non, do đó làm giảm đường huyết sau ăn. Theo nghiên cứu so sánh một số hợp chất chứa nhóm phenol của Kwon Young In và cộng sự (2008), acid caffeic là chất có khả năng ức chế α-glucosidase mạnh [29]. Do đó, hoạt tính ức chế α-glucosidase của dịch chiết hexan của M.
bracteata có thể do sự có mặt của dẫn xuất acid caffeic (21).
➢ Tác dụng giãn mạch
Năm 2016, Ch’ng Yung Sing và cộng sự đã sàng lọc tác dụng giãn mạch của 6 loài thảo dược Malaysia, trong đó có M. bracteata. Dược liệu được chiết bằng 3 loại dung môi: nước, ethanol 50% và ethanol 95%, thử tác dụng trên động mạch chủ chuột đã tách ra và cắt thành các vòng.
Nồng độ cần thiết để làm giãn 50% các vòng động mạch chủ (EC50) của mỗi dịch chiết với dung môi khác nhau là khác nhau. EC50 của dịch chiết ethanol 95% và 50% tương ứng là 31,98 ± 11,42 và 20,61 ± 10,27 mg/mL.
EC50 của dịch chiết nước cao hơn hẳn (166,91 ± 14,07mg/mL).
Qua phân tích phổ FTIR, các nhà khoa học cho rằng hàm lượng flavonoid ảnh hưởng đến hoạt tính giãn mạch của dược liệu. M. bracteata có tác dụng giãn mạch nhưng không quá mạnh. [13]
➢ Tác dụng điều trị tổn thương gan
Năm 2019, trong nghiên cứu của Shyur Lie Fen cùng các cộng sự, phân đoạn chiết giàu galactolipid của M. bracteata và dLGG (22) – hoạt chất phân lập từ phân đoạn này của MB được đánh giá tác dụng điều trị tổn thương gan.
Phân đoạn giàu galactolipid (GLE) thu được bằng quy trình: chiết dược liệu tươi bằng ethanol 95%, sau đó phân tách bằng ethyl acetat, sử dụng hệ dung môi CH2Cl2 : CH3OH (12 : 1) để rửa giải sắc ký cột thu được 10 phân đoạn
16
nhỏ, cuối cùng tinh chế phân đoạn nhỏ 6 bằng dung môi ethanol 95% rửa giải qua cột Diaion HP-20. Thử nghiệm thực hiện trên chuột bị gây tổn thương gan bằng LPS và D-galactosamin N (D-GalN).
GLE và dLGG làm giảm đáng kể sự tăng hoạt độ AST, ALT huyết thanh ở chuột tiếp nhận LPS/D-GalN, do đó hiệu quả trong điều trị tổn thương gan và viêm gan cấp do LPS/D-GalN. Sự xâm nhập của các tế bào miễn dịch, hoại tử mô và hồng cầu trong mô gan,… cũng giảm đáng kể.
Ngoài ra, dLGG còn có tác dụng bảo vệ gan nếu dùng với liều 1 hoặc 10mg/kg trước khi tiêm LPS/D-GalN cho chuột. Các kết quả cho thấy dLGG có cả tác dụng bảo vệ gan và điều trị viêm gan cấp do LPS/D-GalN. [45]