2.1. Dối t trọng nghiên cứu
Đỗi tưọng nghiên cửu bao gồm 33 bộnh nhân được chân đoán xác định CLL lần đẩu tại khoa Huyết hục - Truyẻn màu. Bệnh viện Bạch Mai trong thời gian từ tháng 3/2013 đến thảng 11/2014.
2.1.1. Tiêu chuún ỉựa chọn dơi tưựng
• Tuòi từ 16 trơ lên
- Chưa được diều tri dộc hiệu
- Có hồ sơ bệnh án ghi chép đầy dù
- Dáp img tiêu chuân chân đoán xác định CLL ( theo Viện Ung thư lloa KỳNCI-XVG nảnt 1996) [12]:
1 Dẩu hiệu làm sảng: Lách to. gan to. hụch to.
2. Net nghiệm tẻ bão máu ngoại vi: Tảng số lượng bạch cầu lymphocyte
> 5G/1.
3. Các té bao lymphocyte rói loạn hình thái > 55%.
4. Tề bao lymphocyte > 30% các tế bào có nhàn trong tuy xương.
2.1.2. riêu chuẩn lơụi trừ dơi tượng
• Các bệnh có tang bach cầu lympho ớ máu ngoại vi:
• Bênh táng sinh bạch cầu lympbo phán ứng: số lượng tẻ bào lyinpho tâng nhưng < 50/1. chu yếu là lymphocyte. Tố bào lymphocyte non hơn. lành tính hơn vả chi thoang qua (chi vài ngày, vải tuần rồi trơ lại bính thường).
• Bênh lao: Ho kéo dái. sớt vè chiều, ra mồ hôi trộm... dưực xét nghiêm chấn đoán lao bang PCR.
• l.ơ xớ mi cấp: Diễn biến cáp linh, lãng lé bảo non ác tinh dong ỉympho.
•W.- .ZtiW <€ 4* HỄ?
- ư lyinpho ác tinh hodgkin vã non hodglãn: số lượng te bảo lympho tâng nhưng < 5G/I, dicn biền cấp lính him, phân biệt báng xét nghiệm hạch đố và sinh thiết hạch.
- Cac bệnh thuộc hội chững láng sinh lympho:
• Đa u tủy xương: Tàng sinh ác tính tề bào dõng plasmo.
• Lơ xê mi té bào lóc: Tăng sinh ác tính tế báo lóc. tế bao cỏ hình dạng đặc biột. bề một cỏ nhiều "lông” kéo dâi như sợi tóc. tế bảo to (10- 15um). nguyên sinh chất bắt màu kiềm nhụt, có hạt nhãn.
• Macro Globulinemia: Tâng sinh tế bảo dạng lymphoplasmo.
2.2. Ph trưng pháp nghiên cứu 2.2 J. ỉhiềt kể nghiên cứu
Đè tài sư dụng thiết kể nghiên cữu loại mô tã cẳt ngang (hồi cúu. tiên cữu).
2.2.2. Các bicn sấ nghiên CÚ1I
2.2.2. ĩ. i)ậc điêni ỉáin sàng: thu thập tíieo bệnh an mầu gồm các dặc điểm:
• Tuổi
• Giới
• Tien sử
• Lỹ do vào viện
• Thiếu mâu: một moi. hoa mảt, chóng mặt. da xanh, niêm mục nhợt, hồi hộp. đánh trổng ngực, nhíp tim nhanh...
• SÔI: nhiệt dộ cơ tlìẽ trên 37.5°c (G)p nhiệt độ tại nách)
• Nhiêm trúng: xiêm lợi. viêm phe quan, viêm da...
• Xuất huyết
• Hạch to: nhận dinh hựch ngoai biên: qua kham lain sàng.
• Lách to: qua kliãm làm sarg vùng hạ sườn trải và siêu ám ô bụng. Các móc đê IUÕ ta kích thước cua ládi: bỡ dưới cua lách tính theo em dưới bờ sườn lioậc theo dộ lach to.
•W.- .?TớCa: <€ 4ằ HỄ?
Độ I: 2 cm diri'yi bờ sưừn.
Độ 11:4 cm đười bờ suôn.
Độ III: Ngang rón.
Độ IV: Quá rốn.
• Gan to: qua khâm lãm sàng MÌng hụ sườn và siêu àm ò bụng.
2.22.2. Dệc íĩiêni xét ngltiệttt
• Huyết đồ:
- Sổ lượng HC, HST. Hematocrit. MCV. MCH, MCHC. RDW. HC lưới.
- So lượng bạch câu. còng thức bạch câu.
- Sổ lượng tiêu cầu.
• Túy đồ:
- Sô lượng tê bào tuy xương.
- Đặc diem dòng hông câu.
- Đặc diêm dòng bạch cẩu hạt.
- Dậc diêm dòng màu liêu cầu.
- Đặc diêm te bào dòng lympho.
- So với giá trị bính thường đê tính tỳ' lệ bệnh nhân tăng, giam các dòng [35], [36]. [37].
• Sinh thiết tuy xương (STTX): so sánh với hĩnh anh STTX người binh thường [35]. [36]. [37] đê xâc định ling, giam cua mật dộ tế bào vả các dòng tế bão trong khoang sinh máu,
• Xét nghiêm dòng mảu cơ ban: PT. INR, AP1*T, D - Dimmer.
Fibrinogen: tính giâ tri trung bính của nhóm nghiên cửu và tý số so với bính thường, và so với giá tri bính thường [38], [39] đê xác dịnh tý lệ bênh nhãn có rối loạn.
• Xét nghiêm sinh hoa: Ute. Creatinin. GOT. GPT. Protein TP. Albumin.
Bilirubin TT và GT: tính giá tri trong binh cũa nhóm nghiên cứu, so
•W.- .-Tớ ca: <€ 4ằ HỄ?
sảnh giá tri người Việt Nam bính thường, lính ty lộ bệnh nhân có thay đói [38].
• Xét nghiệm xác định một số bât thường di truyền bang kf thuật FISH:
del(13q).del(l"p).
• Xct nghiệm cỏng thức bộ NST: xác định cóng thức bộ NST cũa các bệnh nhân trong nhóm nghiên cứu. lính lý lộ bệnh nhân có bat thưởng NST.
2.2.2.3. Dục điểm ĩheogĩai đoạn bệnh
- Dựa vào phân loại cua Rai: cân cứ làm satẹ và xét nghiộm chia làm 5 giai đoạn tứ giai đoạn 0 đen giai đoạn IV (bang 1.1).
- Phát loặ cua nhóm lam việc Quốc tế (Binett va CT. 1981): các tác gia này dira vào 3 tiêu chuân: cơ quan phí đại. luọng HST. sỗ lưựng tiêu cầu (bang 1.2).
2.23. ỉ'ật lỉỷtt nghiên cứu
• Máu ngoại vi:
■ I ml I1UU tính mạch có chống dông bâng EDTA K3 dê phân tích các chi số huyết học máu ngoại vi vả lãm tiêu ban máu đán.
• 2 ml máu linh mạch có chống dòng bằng Natricitratc 3.8% đẽ làm các xct nghiệm đông máu.
■ 3 ml máu không chống dóng làm xét nghiệm sinh hóa.
■ I ml mâu linh mạch cùa bệnh nhân cỏ chống dỏng bảng Heparin dê làm xét nghiệm phân tích công thức NST.
• Dịch hút túy xương cũa bệnh nhãn:
- 0.5 ml dịch túy cỏ chống đông bàng EDTA K3 đẽ phàn tích chi số huyết học. làm tiêu ban tủy dồ.
- 1 ml dịch hút túy xương chống dòng bảng Heparin đé làm xét nghiệm FISII.
2.2.4. Phưưng tiện dụng cụ nghiên cứu
• Bộ sát trùng tụi chỗ: cồn lod 5%. còn 70°. bóng...
•W.- .-Tớ ca: <€ 4ằ HỄ?
• Kim chọc tủy
• Bơm liêm 5-10 mi
• Thuốc gày tẽ Xylocain 2%
• Óngnghiệm có EDTA K3
• Óng nghiệm có Heparin
• Óng nghiệm có Natricitratc 3.8%
• Máy xét nghiệm đông mâu ACL 100 cua llalia.
• Bộ dụng làm liêu ban mau. tiêu ban tuy. thuốc nhuộm Cỉìcmsa. thuốc nhuộm hồng cầu lưới.
• Mây dèm te bào lự dộng XT 2(XM)i cua Nhật Ban.
• Máy xét nghiệm sinh hỏa lự dộng Hitachi 902.
• Kính hiên vi quang học Nikon vâ kính hiên vi huỳnh quang cua Nhật Ban 2.2J. Các kírhiiật úng đụng trũng nghiên cứu
r Xét nghiệm huyết dồ
- Tiền hành theo quy trình tiêu chuãn cua khoa Huyết học Truyẽn mau. Bộnh viện Bạch Mai.
- Lay máu tinh mạch lãm tiêu ban máu dàn. nhuộm Giemsa, nhuộm hống câu lười.
- Đem các chi sổ huyết học bang mây đèm te bào lự dộng.
- Dọc tiêu ban \à lập công thức bạch cẩu. linh lý lệ % hồng cầu lưới, mô ta hình thãi lế bào hồng cầu, hình thải bạch cầu, sổ lining vả dộ lộp trung tiểu cầu vả nhùng bất ihưòng trên tiêu han.
- Hi nh thải lymphocyte trong bệnh CLL:
■ Lymphocyte nho. đồng đểu. kích thước tương tự hoặc hơi to hơn hồng cầu.
•W.- .ZtiW <€ 4* HỄ?
• Nhân tròn chiêm gân hét tê báo. cảc sợi chromatin trồng sảt nhau làm cho chất nhàn không đồng nhất, không cỏ hạt nhân, một so có hình anh nhan che. nhàn klìta.
■ Nguyên sinh clìât hẹp. đồng nhất, bất máu ba zơ nhẹ. không cô hạt đặc hiệu [35].
- Xác định ty lộ phần trảm hông càu lưới.
X Xét nghiệm tuy đồ
• Tiến hành theo quy trinh tiêu chuẩn cua khoa Huyết học Truyền máu. Bệnh viện Bạch Mai.
• Lấy dịch tuy lảm tiêu ban. nhuộm hồng cầu lười.
• Đem các chi sô huyết học bang máy dem te báo tụ động.
• Tinh tý lý phần trảm hóng cẩu lưới.
• Dọc tiêu ban: đánh giá mật độ tế bào có nhân và đặc diêm phân bố cua te báo kê ca hồng cẩu trưởng thánh, nhận định dặc diêm về sỗ lượng, hình thai tề bao va tinh trụng biệt hóa cùa mỏi đóng tẽ bào cùng như tương quan phát tricn cùa các dòng tế bão. nhừng bất thường trên tiêu ban. L-ập còng thức tùy. tính tỷ lộ phần tràm hống cầu lười [35].
> Xét nghiệm sinh thiết tùy strong
• Tien hành theo quy trinh liêu chuẩn cua khoa Huyct học Truyền máu. Bệnh viện Bạch Mai [35], [40].
• Phàn tích các đặc diem tô chức học về kích thước và số lượng các khoang tạo máu. mật độ té báo trong khoang tạo máu. càu trúc lạo mâu. mức độ lấn át cua các dòng tế bào lympho trong khoang tạo máu. tính trạng xơ hóa...[35Ị.
Xét Iighiộm xác định bộ NST
• Tien hành theo quy trinh liêu chuẩn cua phóng Di truyền, khoa Huyết học Truyền máu. Bộnh viện Bạch Mai
•W.' .-Tí Ca: <€ 4* HỄ?
• Soi tiêu ban dưới kính hiền vi quang học sau khi dược nhuộm vói các kí thuật nhuộm Giemsa hoặc nhuộm bàng đẽ phân tích chi tiết:
đem số lượng từng cụm NST. tạm xếp công thức NST. chụp anh, làm anh NST, cal NST ròi lừng chiếc và xếp theo danh pháp quốc tê. đánh giá các bất thường nếu có.
' Xét nghiệm xác định một só bát thưòiìg di truyền bang kỹ thuật FISH
• Hiện nay. tại phóng Di truyền, khoa Huyết học. Bệnh viện Bạch Mai img dụng kỳ thuật lai quỳnh quang lại chỗ FISH (Fluorescent Insitu Hybridization).
> Xét nghiệm dông máu
• Tiến hành theo quy trinh tiêu chuàn cũa khoa Huyết học Truyền máu. Bệnh viện Bạch Mai.
X Xét nghỉỳm .sinh hóa
• Tiến hành theo quy trình cua khoa Sinh hóa. Bênh viện Bạch Mai.
2.2.6. Phàn tích, xử lý sổ liệu
Các dừ liệu thu thộp dược xư lỹ theo phương pháp thống kê V học với phần mềmSTATA 10.
2.2.7. I ẩn dề dạo dire trong nghiên cứu
Mọi tliông tin thu thập đưực đàm biio bi mật cho bộnh nhân, chi phục vụ mục đích nghiên cứu.
Nghiên cứu dược sự đống ý vả phê duyệt cua hội đổng dạo đức. lành dạo khoa, lãnh đạo viện.
Kct quả nghiên cửu dược phán hồi lại cho khoa, cho viện.
Từ kết qua nghiên cứu. lựa chọn một sổ thỏng tin cần thiết và có ich cho việc điêu tri và lu vấn cho bênh nhân CLL.
•W.- .-Tớ ca: <€ 4ằ HỄ?
2.2.8. Tôm lit mò limit lighten cửu
Sa đổ 2.1. Mô hĩnh nghiên cứu
•W.- .-Tớ ca: <€ 4ằ HỄ?
CHƯƠNG3