Bảng 6: Số lợng nhiễm sắc thể bò Hà - ấn cái ở lần chuyển thứ 18
Số lợng nhiễm sắc thể Số lợng phiến kỳ giữa Tỉ lệ(%)
> 60 2 1.61 60 89 71.77 60 - 55 8 6.45 55 - 50 9 7.25 50 - 45 8 6.45 45 - 40 4 3.22 40 - 35 0 0
35 - 30 4 3.22
< 30 0 0
Quá trình làm tiêu bản nhiễm sắc thể ở lần chuyển thứ 18 ta thu đợc 124 mẫu, trong đó:
_ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc > 60 nhiễm sắc thể là 2, chiếm tỉ lệ 1.61% _ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc 60 - 55 nhiễm sắc thể là 8, chiếm tỉ lệ 6.45%
_ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc 55 - 50 nhiễm sắc thể là 9, chiếm tỉ lệ 7.26%
_ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc 50-45 nhiễm sắc thể là 8, chiếm tỉ lệ 6.45% _ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc 45 - 40 nhiễm sắc thể là 4, chiếm tỉ lệ 3.23%
_ Số lợng phiến kỳ giữa đếm đợc < 40 nhiễm sắc thể là 4, chiếm tỉ lệ 3.23% _ Số lợng phiến trung kỳ giữa đợc 60 nhiễm sắc thể là 89, chiếm tỉ lệ 71.77%. Tỉ lệ này cho thấy số lợng phiến kỳ giữa có 60 nhiễm sắc thể là lớn nhất. Ta có thể kết luận rằng bộ nhiễm sắc thể tế bào bò Hà - ấn trong quá trình nuôi in vitro ở lần chuyển thứ 18 là không thay đổi (2n = 60).
Hình 7: ảnh bộ nhiễm sắc thể tế bào bò Hà - ấn cái ở lần chuyển thứ 18 Từ kết quả thu đợc ở các lần chuyển trên, ta có bảng tổng kết các lần chuyển ta đã làm thí nghiệm
Bảng 7: Bảng tổng kết các lần chuyển có số nhiễm sắc thể 2n = 60
Lần chuyển Số phiến kỳ giữa thu đợc Số phiến kỳ giữa có 2n = 60 Tỉ lệ (%) 4 92 68 73.91 6 145 109 75.17 8 140 105 75.00 10 72 54 75.00 14 101 74 73.26 18 124 89 71.77
Dùng tiêu chuẩn X2 để đánh giá tỉ lệ % giữa các lần chuyển là độc lập nhau hay phụ thuộc lẫn nhau.
Từ công thức ở mục 2.3.7.3 và 2.3.3.4 ta có đợc bảng giá trị tính toán và tiêu chuẩn X2 ở các lần chuyển.
Lần chuyển Giá trị thực tế Số phiến trung kỳ ở mỗi lần chuyển Giá trị lý thuyết X2 thành phần 4 68 92 68.11 1.77.10-4 6 109 145 107.35 0.025 8 105 140 103.65 0.017 10 54 72 53.31 8.93.10-3 14 74 101 74.78 8.14.10-3 18 89 124 91.80 0.085 Tổng 499 674 499 0.144
Với độ tin cậy 95%, tra bảng phân phối X2ta có X2 = 11.07
Ta nhận thấy rằng X2 tổng mà ta tính đợc nhỏ hơn X2 tra bảng. Từ đó ta có thể kêt luận rằng tỉ lệ % số lợng phiến kỳ giữa có 2n = 60 nhiễm sắc thể tính đợc ở các lần chuyển là độc lập nhau. Kết quả thu đợc ở các lần chuyển khác nhau một cách ngẫu nhiên. Các lần chuyển có tỉ lệ trung bình khoảng 74.5% số lợng phiến kỳ giữa có bộ nhiễm sắc thể hoàn chỉnh. Theo bài báo “Six cloned calves produced from adult fibroblast cells after long-term culture” trên trang web http://www.pnas.org/cgl/content/full/97/3/998 (1999), tác giả Chikara Kubota và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu nhiễm sắc thể tế bào fibroblas của bò trong nuôi invitro ở lần chuyển thứ 5, 10, 15. Kết quả ông thu đợc 70 - 80% số lợng phiến trung kỳ có bộ nhiễm sắc thể hoàn chỉnh (2n = 60). Với kết quả này, các tác giả đã kết luận rằng số lợng bộ nhiễm sắc thể bò trong quá trình nuôi in vitro là không thay đổi.
Tại phòng Công Nghệ Phôi - Viện Công Nghệ Sinh Học, Bùi Xuân Nguyên và cộng sự (2000) đã nhân bản phôi bò Hà - ấn bằng cấy nhân tế bào sinh dỡng, các phôi này đã phát triển đến giai đoạn phôi nang (morula). Theo các tác giả này thì các phôi này đã phát triển trong cơ thể bò mẹ một thời gian (2002). Kết quả này đợc củng cố với các công trình nhân bản đã thành công trớc đây (Well, 2001).
Trên những cơ sở đó chúng ta khẳng định rằng tỉ lệ thu đợc ở mỗi lần chuyển khoảng 74,5% số lợng phiến trung kỳ chứa bộ nhiễm sắc thể hoàn chỉnh từ trong công trình nghiên cứu này. Điều đó đã chứng tỏ số lợng nhiễm sắc thể trong quá trình nuôi in vitro là không thay đổi.