- Nhận xét chồi môi trường nhân nhanh chồi phát triển tốt nhất.
CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA và NAA đến sự nhân nhanh
3.1.4. Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ 0,1mg/l NAA kết hợp BA đến sự
nhân nhanh protocorm
Bảng 3.4. Kết quả nhân protocorm ở môi trường nồng độ 0,1mg/l NAA và kết hợp BA
M0 0 0 0 + - Protocorm nhỏ ít
M13 0,5 0,1 + ++ - Protocorm vàng nhạt
và ít phát triển
M14 1 0,1 ++ +++ - Protocorm xanh và phát
triển thành cụm tương đối
M15 2 0,1 ++ ++++ - Protocorm xanh mướt cụm chồi phát triển nhiều chiều cao tốt
M16 3 0,1 + + - Protocorm kém phát triển CĐHST mg/l Ký hiệu Tình trạng protocorm Ghi chú
2 tuần Sau 4 tuần BA NAA
Chú thích
0: Khơng có sự tạo thành protocorm (0%). +: Sự tạo thành protocorm ít (20-40%).
++: Sự tạo thành protocorm trung bình (40-60). +++: Sự tạo thành protocorm khá (60-80%).
++++: Sự tạo thành protocorm rất nhiều (80-100%).
- Sau 2 tuần các môi trường M13, M14, M15, M16, có các sự thay đổi khác nhau biệt, thì ta thấy mơi trường M13 protocorm phát triển nhưng có màu vàng nhát và protocorm ít phát triển trong 2- 4 tuần và bung chồi thấp.
- Với mơi trường M14 trong vịng 2 -4 tuần số lượng protocorm có màu xanh và phát triển nhiều nhưng chồi của nó nhỏ và số lương chồi bung tương đối nhiều chiều cao thấp.
- Môi trường M15 thì tuần thứ 2 Protocorm xanh mướt cụm chồi phát triển nhiều chiều cao tốt. Sau 4 tuần thì số lượng protocorm tăng nhanh và bật chồi rất tốt và chồi phát triển nhanh và dài.
- Số lượng protocorm mới tạo thành môi trường M16, sau 2 tuần xuất hiện các protocorm mới tuy nhiên nhỏ bật chồi kém hơn so với các môi trường cùng loại.
- Sang đến tuần thứ 3, các protocorm bật chồi, sang đến tuần thứ 4 các protocorm phát triển mạnh, giai đoạn này các mẫu hạn chế tạo protocorm mà chủ yếu
phát triển chồi. So với các mơi trường, thì mơi trường M9, M15 tạo thêm nhiều chồi mới hơn so với các môi trường tốt như M3, M5 nó khả quan hơn cả. Và hai mơi trường M9, M15 các chồi mướt và xanh, khi bật chồi thì chồi xanh tốt và đồng loạt hơn hai môi trường M3, M5 và có một số chồi nhỏ màu trắng.
Có sự phân biệt rõ rệt về số lượng chồi mới chiều cao chồi và chiều dài lá giữa các mơi trường kích tố BA, và mơi trường NAA và kết hợp BA và NAA. Ở mơi trường chỉ có BA thì sang đến tuần thứ 4 các protocorm mới bật chồi, nhưng số lượng chồi phát triển ít nhưng chồi to và thấp. Các môi trường này chủ yếu tạo protocorm mới ít tạo chồi, trong khi đó mơi trường NAA tạo chồi và kéo dài chồi tốt hơn nhưng số lượng protocorm lại tạo ra ít hơn mơi trường BA. Khi ta kết hợp hai môi trường NAA và BA lại với nhau thì tạo chồi nhiều hơn và hạn chế tạo thành protocorm so với dùng BA.
Để có sự đối chiếu ảnh hưởng của các chất ĐHST lên sự nhân protocorm tôi tiến hành song song làm mẫu đối chứng trên mơi trường khơng có bổ sung chất ĐHST thì nhận thấy các mẫu cũng cũng có tăng lên về kích thước nhưng rất chậm, hơn nữa các mẫu phát triển rời rạc và có hiện tượng hóa vàng, đen ở phần gốc. M M MM00 M1 3 M1 3 MM1414 M1 5 M1 5 M1 6 M1 6
Hình 3.4. Kết quả nhân protocorm ở môi trường nồng độ NAA 0.1mg/l kết hợp với BA
Như vậy: Các mẫu protocorm sau khi cấy đều có cảm ứng tốt với mơi trường chỉ sau 3 ngày nuôi cấy và sau 30 ngày các protocorm đều tăng lên về kích thước, có màu xanh bóng, phát triển thành khối to trịn và có sự xuất hiện chồi ở tất cả các mơi trường. Đối với việc nhân protocorm thì sử dung mơi trường M3, M5, M9, M15 tốt, nhưng sử dụng môi trường M3 để nhân protocorm nhiều nhất. Nhưng vừa làm tăng lượng chồi vừa tăng lượng protocorm thì sử dưng mơi trường M9, M15 tốt nhất cho tăng cả hai.
Cụm chồi ban đầu được tách làm 3 chuyển sang môi trường. Sau 4 tuần từ một cụm chồi thu được chồi cao 1-2cm và có 1-2 lá để chuyển vào mơi trường