2.3.6.1 Nghiên cứu về chế phẩm Metavina 80 LS
Hiện nay, sự phát triển của nền nông nghiệp nước ta ñang ñi vào mức ñộ thâm canh cao với việc sử dụng ngày càng nhiều phân bón hóa học, thuốc
bảo vệ thực vật hóa học và hàng loạt các biện pháp cải tiến mới với mục đích khai thác, chạy theo năng suất và sản lượng. Với sự canh tác trên ñã làm cho
ñất ñai ngày càng thối hóa, tồn dư các chất độc hại trong đất ngày càng cao,
nguồn bệnh tích lũy trong đất ngày càng nhiều dẫn đến phát sinh một số dịch hại khơng dự báo trước. Chính vì vậy, xu hướng quay trở lại nền nông nghiệp hữu cơ với việc tăng cường sử dụng chế phẩm sinh học, phân bón hữu cơ trong canh tác cây trồng ñang là xu hướng chung của Việt Nam nói riêng và thế giới nói chung.
Chế phẩm Metavina do Trung tâm nghiên cứu phòng trừ mối (Viện khoa học thủy lợi) nghiên cứu và áp dụng thành công từ năm 2006, đồng thời là thuốc vi sinh phịng trừ mối ñầu tiên ở Việt Nam. Chế phẩm bao gồm 3
dạng khác nhau: Metavina 90 DP, Metavina 10 DP, Metavina 80 LS, ñược ñiều chế từ nấm xanh Metarhizium anisopliae. Từ khi nghiên cứu thành cơng đến nay, chế phẩm ñã ñược sử dụng rộng rãi khơng chỉ để trừ mối mà cịn được dùng để trừ cơn trùng thuộc họ cánh cứng Coleoptera, sâu non bộ cánh
vẩy Lepidoptera như sâu khoang, sâu xanh da láng, rầy nâu, bọ hung, mọt gạo…[20].
Chế phẩm Metavina 80 LS có thành phần là sinh khối lên men của chủng nấm Metarhizium anisopliae Ma01 chiếm 80% v/v. Chế phẩm này có khả năng diệt các lồi mối, cơn trùng bộ cánh cứng, sâu non bộ cánh vẩy bằng con ñường tiếp xúc và lây nhiễm.
Quy cách đóng gói: Chế phẩm Metavina 80 LS được đóng vào trong
2.3.6.2 Nghiên cứu về nấm lục cương Metarhizium anisopliae
Ở nước ta, trong những năm gần ñây bước dầu nghiên cứu các loại nấm
kí sinh cơn trùng để phịng trừ sâu hại. ðiển hình như ở Hưng n, năm 1993
đã sử dụng nấm xanh Metarhizium anisopliae để phịng trừ sâu ðo Chỉ sau 7 -
10 ngày hiệu quả khoảng 70 - 80%. Tại Tiền Giang, Sóc Trăng, Bạc Liêu ñã sử dụng để phịng trừ bọ xít, sâu cắn gié, bọ cánh cứng hại dừa ñạt hiệu quả cao. Tại Cần Thơ, từ năm 2005 - 2007 ñã sử dụng nấm Metarhizium anisopliae để phịng trừ sâu ăn tạp, rầy nâu ñạt hiệu quả khá cao trên 70% sau
7 - 12 ngày (Trần Văn Hai, 2006)[25].
Nấm Metarhizium anisopliae gây hại cho nhiều lồi cơn trùng. Bào tử nấm rơi trên cơ thể cơn trùng và khi độ ẩm cao kéo dài, bào tử nấm nảy mầm và mọc vào bên trong cơ thể côn trùng. Nấm phát triển bên trong cơ thể côn trùng kí chủ và ăn chất bổ của cơ thể cơn trùng. Khi cơn trùng chết nấm xuất hiện lúc đầu thành một lớp trắng ở những chổ nối giữa các đốt ở cơ thể cơn
trùng, sau đó trên thân cơn trùng sẽ chuyển sang màu xanh lục đậm là màu
của bào tử nấm. Bào tử xuất hiện từ ký chủ đã chết sang ký chủ mới qua gió và nước.
Nấm Metarhizium anisopliae có màu lục hoặc xanh lục nên người ta
gọi là nấm lục cương. Loài Metarhizium anisopliae là chủng gây bệnh mạnh nhất trên côn trùng thuộc họ cánh cứng Coleoptera. Nhiều nhà khoa học ñã
nghiên cứu và tìm thấy có khoảng 204 lồi cơn trùng thuộc họ Alaridae và Cucurlionidae dễ bị nhiễm bệnh bởi nấm Metarhizium anisopliae. Bệnh Metarhizium gây trên côn trùng gọi là bệnh Muscadin xanh.Phạm Thị Thủy
và CTV, Viện Bảo Vệ Thực Vật cũng ñã xác ñịnh ñược trên 40 lồi cơn
trùng hại cây trồng và mối ñất bị nấm lục cương ký sinh.
+ ðặc điểm hình thái:
khuẩn lạc có màu xanh thỉnh thoảng có màu tối hoặc màu hồng vỏ quế, chúng phát triển chậm trên mơi trường khơng có pepton (mơi trường PDA, Czapek – Dox), thích hợp trên mơi trường có pepton. Trên môi trường PDA sau 14 ngày ni cấy, sợi nấm có màu trắng ñến hồng, phần cuối sợi nấm có dạng cái kẹp quần áo, từ đây hình thành bào tử. Khuẩn lạc màu vàng xanh ñến xanh
oliu, vàng mơ. Trên mơi trường Sabouraud nấm phát triển tốt trong điều kiện nhiệt độ 25 oC, sau 7 - 10 ngày ni cấy thì khuẩn lạc có đường kính 4 - 6 cm. Sợi nấm phát triển trên bề mặt cơn trùng có màu từ trắng ñến hồng,
cuống sinh bào tử ngắn mọc tỏa tròn trên đám sợi nấm dày đặc. Bào tử trần hình que có kích thước 3,5×6,4×7,2 mm, màu từ lục xám ñến oliu - lục, bào tử xếp thành chuỗi khá chặt chẽ và nhìn bằng mắt thường người ta có thể thấy bào tử ñược ra trên bề mặt cơ thể côn trùng một lớp phấn khá rõ màu xanh lục. Sợi nấm khi phát triển bên trong cơn trùng có chiều rộng khoảng
3 - 4 mm, dài khoảng 20 mm, chia thành nhiều tế bào ngắn, trong tế bào có thể thấy nhiều giọt mỡ.
+ ðặc ñiểm sinh lý - sinh hóa
Nấm M. anisopliae không thể sinh trưởng tốt trên cơ chất khơng có
kitin, chúng sống được nhiệt độ thấp 8 oC, có biên ñộ về ñộ ẩm rộng ở nơi
tích lũy nhiều CO2 và thiếu O2 chúng có thể sống 445 ngày. Khi hoại sinh trong ñất, bào tử đính bị ức chế sự nảy mầm bời khu hệ nấm đất, trong đó có chủng Aeromonas (thí nghiệm invitro).
Ở nhiệt ñộ dưới 10 oC và trên 45 oC nấm thường khơng hình thành bào tử. Nhiệt ñộ thích hợp cho sự nảy mầm của bào tử là 25 - 30 oC và sẽ bị chết ở 49 ñến 55 oC. Nhiệt ñộ cho nấm phát triển tốt nhất là 25 oC, pH thích hợp là 6,0 và có thể dao động trong khoảng 3,3 - 8,5. Nấm M. anisopliae có khả
năng phân giải tinh bột, xenluloza và kitin ( lông và da cơn trùng). Nấm lục cương có thể đồng hóa nhiều nguồn cacbon khác nhau. Chúng phát triển tốt
trên môi trường chứa glucogen hay lipit. Muốn tạo bào tử nấm lục cương địi hỏi phải có độ ẩm khơng khí khá cao.
+ ðộc tố diệt côn trùng của nấm lục cương:
Gồm một số ngoại độc tố có tên là Destruxin A, B, C hay D. ðây là các sản phẩm thứ cấp depxipeptit vòng, L - prolyn, L - Leuxin, anhydride, L - prolyn - L - valin anhydrit và desmetyl destrucxin B.
Destrxin A có cơng thức ngun là C29H47O7N5, có điểm sơi là 188 oC. Bản chất hóa học của nó là D - 2 hydroxy - 4 - pentenoy - L - isoleucyl - N - metyl - L - valyl - N - metytl - L - alanyl - b - alanyl lacton.
Destruxin B có cơng thức nguyên là C30H51O7N5, có điểm sơi là 234 oC. Bản chất hóa học của nó là D - a - hydroxy - g - metylvaleryl - L - prolyl - L - isoleucyl - N - metyl - L - valyl - N - metyl - L - alanyl - b - alanyl lacton.
+ Cơ chế tác ñộng của nấm lục cương lên côn trùng
Khi bào tử nấm lục cương bám trên bề mặt côn trùng trong khoảng 24
giờ thì bào tử sẽ nảy mầm tạo thành ống mầm xuyên qua vỏ cơn trùng, sau đó tiếp tục phân nhánh tạo nên một dạng sợi nấm chằng chịt bên trong cơ thể cơn trùng. Nấm Metarhizium anisopliae đã tiết ra độc tố Destruxin A, B và chính các độc tố trên đã gây chết cơn trùng[26].