Nguyên tắc: Tính chính xác của phơng pháp đợc đánh giá bằng độ lệch chuẩn tơng đối của 5 phép thử song song.
Cách tiến hành và kết quả đợc trình bày nh phần 2.2.3
Kết quả thử độ chính xác của phơng pháp cho thấy trong các điều kiện sắc ký đã chọn độ lệch chuẩn tơng đối của các kết quả rất nhỏ (RSD = 0,51% << 2%). Nh vậy phơng pháp là chính xác.
2.2.4.3. Tính đúng
Nguyên tắc: Đánh giá tính đúng của phơng pháp đợc tiến hành trên việc khảo sát khả năng tìm lại của phơng pháp.
Chuẩn bị các dung dịch chuẩn có nồng độ từ 80% đến 120% nồng độ định lợng. Khối lợng cân nh bảng 6.
Tiến hành định lợng các mẫu này theo điều kiện đã chọn, mỗi mẫu định lợng 3 lần, lấy kết quả trung bình. Tính hàm lợng % của tobramycin có trong mẫu thử dựa trên chuẩn đã biết hàm lợng, từ đó tính % tìm lại của mẫu thử.
Kết quả đánh giá tính đúng của phơng pháp đợc trình bày ở bảng 6 Mẫu đối chiếu: m = 29,0 mg; Sc = 12,1916 (mAU.min)
Bảng 6: Kết quả đánh giá tính đúng của phơng pháp
Đồ thị biểu diễn phơng trình hồi qui tuyến tính về mối tơng quan giữa l- ợng cân và lợng hoạt chất tìm lại đợc ghi ở hình 3.
mcân(mg) mthực(mg) Diện tích pic trung bình (mAU.min) Khối lợng tìm lại trung bình (mg) % tìm lại = 100% mmchovao timlai ì 23,2 22,0 9,7089 21,9 99,55 30,2 28,7 12,6349 28,5 99,30 35,8 34,6 15,1176 34,1 100,29
Hình 3: Đồ thị biểu diễn phơng trình hồi qui tuyến tính về mối tơng quan giữa lợng cân và lợng hoạt chất tìm lại
- Qua phân tích ta có:
Phần trăm tìm lại X= 99,71% (khoảng tin cậy 98,43 – 100,99) Độ lệch chuẩn tơng đối: RSD = 0,52% (<< 2%)
- Phơng trình hồi quy tuyến tính về mối tơng quan giữa lợng cân và lợng hoạt chất tìm lại:
Phơng trình: y = 0,9686x + 0,6252 Độ lệch chuẩn của a: Sa = 0,01
Độ lệch chuẩn của y_intercept: Sb = 0,298 - Với độ tin cậy 95% ta có:
Khoảng tin cậy của độ dốc: a 0,127 hay : 0,840 < a < 1,095 ± (a chứa 1=> không có sai số hệ thống tỷ lệ)
Khoảng tin cậy của y_intercept: b 3,786±
hay : -3,16 ≤ y_intercept ≤ 4,393 (y chứa gốc tọa độ => không có sai số hằng định).
Kết luận:
Qua các kết quả trên ta thấy phơng pháp đúng trong khoảng khảo sát