CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5. Phương pháp và công cụ thu thập số liệu
2.5.1. Phương pháp thu thập thông tin
Áp dụng phương pháp điều tra hộ gia đình: Tất cả các thành viên trong hộ gia đình sẽ được điều tra viên tư vấn, hướng dẫn tham gia nghiên cứu. Với mỗi thành viên trong hộ gia đình sẽ có 01 phiếu phỏng vấn; đối với người người già, trẻ nhỏ, người không trả lời được phiếu phỏng vấn thì điều tra viên tiến hành hỏi người giám hộ hoặc chủ hộ. Các nội dung, biến số thu thập qua đều được thiết kế sẵn bao gồm nhân khẩu, các yếu tố dịch tễ, các yếu tố xã hội, tiền sử sức khỏe, tiền sử sử dụng KS, các thói quen... Cơng cụ thu thập số liệu là phiếu phỏng vấn in sẵn tại (Phụ lục 04). Đối với tất cả các thành viên trong hộ gia đình được chọn vào nghiên cứu, sẽ tiến hành lấy mẫu phân để xét nghiệm.
2.5.2. Phương pháp thu thập mẫu xét nghiệm
-Chuẩn bị dụng cụ để lấy mẫu:
Cốc vơ khuẩn có thìa đựng mẫu phân người, mẫu phân động vật ni Lọ vơ khuẩn có nắp đậy để đựng mẫu nước
Cốc vơ khuẩn có nắp đậy có thìa có kẹp thức ăn đề đựng thức ăn Mã dán phù hợp với các mẫu
- Mẫu phân người: Tiến hành lấy cùng thời điểm phỏng vấn và lấy tất cả các thành viên trong hộ gia đình được chọn vào nghiên cứu. Hướng dẫn cho 01 người đại diện hộ gia đình sau khi thành viên nào đại tiện ra bơ xong thì người đại diện sử dụng thìa lấy khoảng 5gram phân/người ở giữa bãi phân cho vào cốc vơ khuẩn đã dán nhãn mã hóa theo danh sách và thơng báo ngay cho cán bộ thu thập mẫu là các điều tra viên của đề tài đã được tập huấn để thu thập và bảo quản.
- Mẫu phân động vật nuôi: Cán bộ thu thập mẫu dán sẵn các mã theo danh sách các động vật cần lấy mẫu tại các hộ gia đình và trực tiếp lấy phân các vật
ni lấy 5gram phân/động vật nuôi cho vào cốc vô khuẩn đồng thời bảo quản theo quy định.
- Mẫu nước ăn/sinh hoạt: Cán bộ thu thập mẫu trực tiếp hỏi hộ gia đình xem nguồn nước chính gia đình để sử dụng ăn uống/sinh hoạt và trực tiếp lấy 100ml/mẫu cho vào chai đã dán mã hóa theo hộ gia đình theo nguồn nước bảo và tiến hành bảo quản.
- Mẫu thức ăn đã chế biến: Cán bộ thu thập mẫu trực tiếp hỏi hộ gia đình xem gia đình thường xuyên sử dụng loại thực ăn gì và tiến hành lấy 100g/mẫu thức ăn đã chế biến trước bữa ăn của hộ gia đình và cho vào cốc vơ khuẩn dán nhãn mã hóa và bảo quản.
Tất cả các mẫu trên được bảo quản ở nhiệt độ 40C đóng gói 03 lớp: lớp 1 gồm tuýp/cốc có chứa mẫu có nắp đậy, lớp 2: túi díp chứa các tp/cốc đựng mẫu, lớp 3: Thùng chứa các túi đựng mẫu chắc chắn có khả năng cách nhiệt và gửi về Phịng thí nghiệm Kháng sinh - Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương trong vòng 14 giờ kể từ khi thu thập để bảo quản và làm xét nghiệm.
2.5.3. Các tiêu chuẩn áp dụng trong nghiên cứu
- Người khỏe mạnh là người không đang mắc các bệnh cấp tính, đợt cấp của các bệnh mạn tính, khơng đang điều trị kháng sinh bệnh theo đơn thuốc, theo hướng dẫn của bác sỹ hoặc tự điều trị, người bị chấn thương, tâm thần có chỉ định điều trị của cơ sở y tế.
- Người khỏe mạnh mang VKĐR KKS nhóm β-lactam phổ rộng là mẫu phân lấy của người khoẻ mạnh phân lập được VKĐR sinh Extended
spectrum beta-lactamases (ESBL)
- Người khỏe mạnh mang VKĐR KKS nhóm cephalosprin thế hệ 3 là mẫu phân của người khoẻ mạnh phân lập được chủng VKĐR sinh ESBL mang gen mã hóa CTX - M.
- Xác định nồng độ kháng sinh tối thiểu ức chế vi khuẩn áp dụng theo tiêu chuẩn CLSI 2014.
- Các mẫu phân động vật nuôi, mẫu nước, mẫu thức ăn đã qua chế biến nhiễm VKĐR KKS nhóm β-lactam phổ rộng là các mẫu xét nghiệm của các nhóm trên phân lập được VKĐR sinh ESBL.
- Các mẫu phân động vật nuôi, mẫu nước, mẫu thức ăn đã qua chế biến nhiễm VKĐR KKS nhóm cephalosprin thế hệ 3 là các mẫu xét nghiệm phân lập được chủng VKĐR sinh ESBL mang gen mã hóa CTX-M.
- Phân loại kinh tế hộ gia đình: theo Quyết định số 09/2011/QĐ-TTg ngày 30/01/2011 của Thủ tướng Chính phủ về việc ban hành chuẩn hộ nghèo, hộ cận nghèo.
- Phân loại nhà tiêu hợp vệ sinh: theo Thông tư số 27/2011/TT-BYT ngày 24/6/2011 của Bộ Y tế về quy chuẩn nhà tiêu hợp vệ sinh.
2.5.4. Các công cụ thu thập thông tin
- Phiếu điều tra người tham gia nghiên cứu và các yếu tố liên quan đến tình trạng VKĐR KKS nhóm β-lactam phổ rộng tại điểm nghiên cứu (Phụ lục 3)
- Sổ theo dõi lấy các loại mẫu: phân người khỏe mạnh, phân động vật, mẫu nước ăn/sinh hoạt và mẫu thực phẩm
- Danh sách các mẫu xét nghiệm của người tham gia nghiên cứu, mẫu phân động vật nuôi, mẫu nước ăn uống/sinh hoạt và mẫu thực phẩm
-Chủng chuẩn quốc tế: Escherichia coli ATCC-25922
-Trang thiết bị và dụng cụ trong phòng nghiên cứu