CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM 2.1 HÓA CHẤT THIẾT BỊ PHƯƠNG PHÁP
2.3.2.3.Khảo sát phân đoạn cao DFE
Cao DFE4 (m = 6,8g) được SKC Silica gel pha thường với hệ dung môi rửa giải là PE:AE với độ phân cực tăng dần (0% - 40%, 100%EA), các đoạn giống nhau trên SKLM được gom chung lại thành 7 phân đoạn, mã hóa thành DFE41-7. Kết quảđược tóm tắt trong bảng 2.2.
- SKC Sephadex, CHCl3:MeOH = 1:1 - Thu được 5 phân đoạn ( DFE 3341-5)
- SKC Silica gel pha đảo, Ac: H20 = 15:1 - Thu được 5 phân đoạn ( DFE 33431-5) Pđ DFE33
(1,3g)
Pđ DFE334 (720mg)
- SKC Silica gel, PE:AE(0% - 20%, 100%EA)
- Thu được 6 phân đoạn ( DFE331-6)
Pđ DFE3343 (92mg) DFHV (15mg) 29 29
Bảng 2.3. Kết quả SKC cao DFE4 (6,8g)
Phân
đoạn Tên mã hóa SKLM Khối lượng (g)
1 DFE41 Nhiều vết không rõ ràng 1,5g 2 DFE42 Nhiều vết không rõ ràng 1,3g
3 DFE43 1 vết chính, rõ 0,95g
4 DFE44 Nhiều vết không rõ ràng 1g 5 DFE45 Nhiêu vết không rõ ràng 0.75g 6 DFE46 Nhiều vết không rõ ràng 0,6g
7 DFE47 Vệt kéo dài 0,5g
Trong bảy phân đoạn trên chúng tôi chọn phân đoạn 3 để tiến hành khảo sát. - Thực hiện SKC phân đoạn DFE43 (m = 950mg) trên silica gel pha thường với hệ dung môi rửa giải là PE:AE với độ phân cực tăng dần (0% - 30%, 100%EA), các đoạn giống nhau trên SKLM được gom chung lại thành 6 phân đoạn, mã hóa thành DFE431-6.
- Phân đoạn DFE433 (m = 490mg) được SKC Silica gel pha thường, dung môi rửa giải PE:AE với độ phân cực tăng dần ( 0%-10%, 100% EA) các phân đoạn giống nhau trên SKLM được gom chung, thu được 4 phân đoạn, kí hiệu DFE4331- 4.
- Phân đoạn DFE4332 (m = 130mg) có một vết chính màu nâu sẫm, rõ. Tiếp tục được SKC Sephadex LH20 với hệ dung môi rửa giải là CHCl3:MeOH = 1:1. Dựa vào kết quả trên SKLM thu được 5 phân đoạn mã hóa thành DFE43321-5.
- Phân đoạn DFE43323 (m = 92mg) có 1 vết màu nâu đen rõ ràng tương đối sạch nhất, tiếp tục SKC Silica gel Rp18 với hệ dung môi rửa giải Ac:H2O = 10:1 thu
12
được 1 chất sạch, kết tinh màu trắng, tan tốt trong acetone, được kí hiệu là DFHVI. Qúa trình cô lập DFHVI được tóm tắt theo sơđồ 2.5.
Sơđồ 2.5. Sơđồ cô lập hợp chất DFHVI từ cao DFE43
- SKC Sephadex, CHCl3:MeOH = 1:1 - Thu được 5 phân đoạn ( DFE43321-5)
- SKC Silica gel pha đảo, Ac: H20 = 10:1 Cao DFE43 (950mg) Pđ DFE433 (490mg) Pđ DFE4332 (130mg) DFHVI (12mg)
- SKC Silica gel, PE:AE(0% - 30%, 100%EA)
- Thu được 6 phân đoạn ( DFE431-6)
Pđ DFE43323 (92mg)
- SKC Silica gel, PE:AE(0% - 20%, 100%EA)
- Thu được 4 phân đoạn ( DFE4331-4) 31
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});