Đặc điểm X ± SD Min Max Tỷ lệtăng (%)
Bạch cầu (G/l) 6,94 ± 1,70 3,97 12,05 2,8 CRP (mg/dl) 0,18 ± 0,34 0,00 2,05 2,8 Máu lắng giờ đầu (mm) 17,8 ± 7,8 0 31 13,9
Nhận xét:
- Hấu hết sốlượng bạch cầu, CRP và máu lắng giờđầu đều nằm trong giới hạn bình thường.
- Chỉ có 2,8% số bệnh nhân có tăng bạch cầu và CRP, trong khi tỷ lệtăng máu lắng giờđầu là 13,9%.
3.2.3. Đặc điểm phân đoạn tế bào nền mạch máu (SVF) thu được
Bảng 3.20. Đặc điểm phân đoạn tế bào nền mạch máu (SVF) (n=36 mẫu TB)
Đặc điểm X ± SD
Thể tích khối tế bào có nhân thu được (ml) 5,24 ± 1,43 Số lượng tế bào có nhân /ml (X ± SE) (3,1 ± 0,62) x 108 Tổng số tế bào có nhân (X ± SE) (1,87 ± 0,24) x 109
Tổng tế bào có nhân tiêm 1 gối (X ± SE) (5,38 ± 0,13) x 108
Tỷ lệ sống (%) 96,91 ± 1,19
Tỷ lệ cấy khuẩn âm tính 100,0%
Thể tích mỡ thu được (ml) 122,64 ± 19,36 Nhận xét:
- Thể tích mỡ thu được trung bình là 122,64 ± 19,36 ml (Ít nhất là 80 ml, nhiều nhất là 160 ml).
- Tổng số tế bào có nhân tiêm một khớp gối là (5,38 ± 0,13) x 108 tế bào. - 100% các trường hợp đều có tỷ lệ tế bào sống > 95%. Khơng có trường hợp nào bị nhiễm khuẩn.
Trong nghiên cứu này chúng tôi đã tiến hành nuôi cấy ngẫu nhiên 3 mẫu tế bào để đánh giá chất lượng tế bào. Kết quả cho thấy cả 3 mẫu này đều thu được tế bào, các mẫu này được nuôi cấy tăng sinh tiếp và bảo quản để sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo. Kết quả phân lập và nuôi cấy tế bào gốc mơ mỡđược thể hiện ở hình 3.1, 3.2 như sau:
Hình 3.1. Hình ảnh ni cấy 3 mẫu tế bào gốc phân lập từ mô mỡ.
(BM 42 – 10, 20, BM 44 – 10, 20, BM 45 – 10, 20: 3 mẫu tếbào được nuôi cấy và chụp ảnh ở các độphóng đại 100X và 200X).
Tế bào SVF phối trộn với sản phẩm huyết tương giàu tiểu cầu kích hoạt bằng canxi clorua và ánh sáng đơn sắc sau khi nuôi cấy xuất hiện các tế bào bám dính vào bề mặt đĩa ni cấy, có dạng hình thoi giống ngun bào sợi. Các mẫu tế bào này tiếp tục được nuôi cấy đến khi mật độđạt được 60-80% diện tích bề mặt đĩa ni cấy thì được cấy chuyển ni cấy tăng sinh tiếp. Kết quảđược thể hiện thơng qua hình 3.1.
Hình 3.2: Ni cấy tăng sinh tế bào từ mô mỡ.
(Mẫu tế bào ký hiệu BM 42 được nuôi cấy tăng sinh, A: sau khi cấy chuyển –
100X; B, C, D: tế bào sau 8 ngày nuôi cấy tăng sinh và chụp ảnh ởcác độ phóng
đại 100X, 200X và 400X).
Tế bào sau khi cấy chuyển nuôi cấy tăng sinh tế bào có dạng hình trịn lơ lửng trong mơi trường ni cấy (hình 3.2A). Kết quả sau 8 ngày, các tếbào tăng sinh mạnh đạt mật độ 60-80% diện tích bề mặt đĩa ni cấy. Các tế bào này khi nuôi cấy tăng sinh
và được cốđịnh và nhuộm bằng giemsa kết quả cho thấy tế bào có khảnăng bám dính và có dạng hình thoi đặc trưng của TBG trung mơ (hình 3.2 B,C,D).
Kết quả phân tích các dấu ấn bề mặt tế bào phân lập từ mô mỡ
Với 3 mẫu tễ bào được nuôi cấy, trong quần thể tế bào SVF, tỷ lệ các tế bào mang dấu ấn CD90 của tế bào gốc trung mô lần lượt là 2,9%; 2,7% và 3,7%.
Sau khi nuôi cấy tăng sinh tế bào đến thế hệ thứ 3, các tế bào được tiến hành thu hoạch và phân tích các dấu ấn bề mặt. Kết quả được thể hiện ở hình 3.3.
Hình 3.3: Kết quả biểu hiện một số dấu ấn bề mặt của TBG mô mỡ ở lần cấy chuyển thứ 3 của một mẫu tế bào ở lần cấy chuyển thứ 3 của một mẫu tế bào
Dấu ấn CD90 CD105 CD34 CD45 HLA DR
Tỷ lệ
dương tính 94,6 ± 3,7 97,9 ± 3,7 1,6 ± 0,6 1,4 ± 1,7 1,03 ± 1,1 Nhận xét: Kết quả trên cho thấy các mẫu tế bào đều dương tính với dấu ấn CD90 (94,6%), CD 105 (97,9%) và âm tính với CD34 (1,6%), CD45 (1,4%) và HLA DR (1,03%).
3.3. Đánh giá kết quả và tính antồn của liệu pháp
3.3.1. Đánh giá kếtquả điều trị của liệu pháp
3.3.1.1. Đánh giá kếtquả điều trị trên lâm sàng
58 66 70 72 72 72 14 6 2 0 0 0 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% T0 T1 T4 T12 T26 T52 Tỷ lệ % Tuần Không phả i thức gi ấc Phả i thức gi ấ c vì đa u
Biểu đồ 3.3. Tỷ lệthay đổi triệu chứng đau khi ngủ tại các thời điểm theo dõi
Nhận xét:
Trước điều trị, có 19,5% khớp gối đau khiến cho cho bệnh nhân phải thức giấc khi ngủ. Sau 3 tháng, 6 tháng và 1 năm theo dõi, 100% bệnh nhân khi ngủ không phải thức giấc vì đau khớp gối.
0 0 0 6 40 52 48 50 64 62 32 20 24 22 8 4 0 0 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% T0 T1 T4 T12 T26 T52 Tỷ lệ % Tuần
Không đau Đa u khi đi một đoạn Đa u nga y khi bắt đầ u
Biểu đồ 3.4. Tỷ lệthay đổi triệu chứng đau khi đi bộ tại các thời điểm theo dõi
Nhận xét:
- Trước điều trị, 100% bệnh nhân có biểu hiện đau khi đi bộ, trong đó 66,7% khớp gối đau khi đi một đoạn và 33,3% khớp gối đau ngay khi bắt đầu đi.
- Sau 3 tháng điều trị, 8,3% khớp gối không đau khi đi bộ. Tỷ lệ này tăng lên là 72,2% sau 1 năm điều trị.