Chƣơng 3 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.3. Kết quả xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 trên bố mẹ của bệnh nhân
bệnh nhân tạo xƣơng bất toàn đã phát hiện đột biến gen COL1A1 hoặc
COL1A2
42/50 bệnh nhân được chẩn đốn tạo xương bất tồn dựa vào triệu chứng lâm sàng và cận lâm sàng điển hình đến khám và điều trị tại Bệnh viện Nhi Trung ương đã phát hiện có đột biến gen COL1A1 hoặc COL1A2. 42 cặp bố mẹ của
các bệnh nhân đã được xác định là có đột biến gen COL1A1, COL1A2 được phân tích gen tìm đột biến.
* Kết quả phân tích gen của bố mẹ bệnh nhân mã số OI08
- Gia đình bệnh nhân mã số OI04, OI08 (trước khi phân tích gen).
Hình 3.12. Sơ đồ gia đình bệnh nhân mã số OI04, OI08 (trước khi phân tích gen)
Nhận xét: Gia đình bệnh nhân mã số OI08 có hai người con trai bị bệnh tạo xương bất tồn và người mẹ cũng được chẩn đốn lâm sàng là bệnh tạo xương bất tồn. Sau khi tiến hành phân tích gen COL1A1 bệnh nhân mã số OI08 cho thấy bệnh nhân mang đột biến dị hợp tử thay thế G thành T tại vị trí 2183, dẫn đến bộ ba tại vị trí 686 mã hóa glycin chuyển thành valin (p. Gly686Val) nên tiếp tục tiến hành phân tích gen COL1A1 của bố và mẹ bệnh nhân.
Nam bình thường Nữ bình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu Nam bị bệnh
Hình 3.13. Hình ảnh giải trình tự gen COL1A1 của bố mẹ gia đình bệnh nhân mã số OI04, OI08. Mũi tên thẳng đứng chỉ vị trí đột biến, các chữ số trên mũi tên chỉ vị trí nucleotid và acid amin thay đổi
Nhận xét: Kết quả phân tích gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân mã số OI04, OI08 cho thấy người bố khơng có đột biến, người mẹ bị đột biến dị hợp tử thay thế G thành T tại vị trí 2183, dẫn đến bộ ba tại vị trí 686 mã hóa glycin chuyển thành valin (p. Gly686Val), người em trai (bệnh nhân mã số OI04) có
Bệnh nhân mã số OI 04 Bệnh nhân mã số OI 08 c.2183G>T p. Gly686Val c.2183G>T p. Gly686Val Bố bệnh nhân Mẹ bệnh nhân c.2183G>T p. Gly686Val c.2183G
đột biến giống mẹ và anh trai (bệnh nhân mã số OI08). Như vậy bệnh nhân mã số OI08 và người em trai cũng bệnh tạo xương bất tồn mã số OI04 có đột biến dị hợp tử thay thế G thành T tại vị trí 2183, dẫn đến bộ ba tại vị trí 686 mã hóa glycin chuyển thành valin (p. Gly686Val) do nhận một alen đột biến từ người mẹ.
- Gia đình bệnh nhân mã số OI04, OI08 (sau khi phân tích gen).
Hình 3.14. Sơ đồ gia đình bệnh nhân mã số OI04, OI08 (sau khi phân tích gen)
Nhận xét: Sau khi tiến hành phân tích gen COL1A1 và COL1A2 của bố mẹ bệnh nhân cho thấy người bố khơng có đột biến. Người mẹ bị đột biến dị hợp tử, người anh trai và em trai đều là bệnh nhân bệnh tạo xương bất tồn có mã số lần lượt là OI08, OI04 có đột biến giống mẹ, đều có đột biến dị hợp tử do nhận một alen đột biến từ người mẹ.
Nam bình thường (c.2183G>T)
(c.2183G>T)
Nữbình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu Nam bị bệnh
* Kết quả phân tích gen của gia đình bệnh nhân mã số OI20
- Gia đình bệnh nhân mã số OI20 (trước khi phân tích gen).
Hình 3.15. Sơ đồ gia đình mã số OI20 (trước khi phân tích gen)
Nhận xét: Gia đình bệnh nhân mã số OI20 có một người con gái bị bệnh tạo xương bất toàn, khi phân tích gen COL1A1 cho thấy bệnh nhân mã số OI20 mang đột biến dị hợp tử c.1795-31C>T tại intron 24. Người mẹ không bị bệnh, người bố bị bệnh tạo xương bất tồn.
Nữ bình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu Nam bị bệnh
Hình 3.16. Hình ảnh giải trình tự gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân mã số OI20. Mũi tên thẳng đứng chỉ vị trí đột biến, các chữ số trên mũi tên chỉ vị trí nucleotid và acid amin thay đổi.
Nhận xét: Kết quả phân tích gen COL1A1 ở gia đình bệnh nhân số OI20 cho thấy người bố bị đột biến dị hợp tử c.1795-31C>T tại intron 24, người mẹ khơng có đột biến. Bệnh nhân có đột biến c.1795-31C>T dị hợp tử tại intron 24 do nhận một alen đột biến từ người bố.
c.1795-31C>T Bệnh nhân mã số OI 20 Bố bệnh nhân mã số OI 20 c.1795-31C Mẹ bệnh nhân mã số OI 20 c.1795-31C>T
- Gia đình bệnh nhân mã số OI20 (sau khi phân tích gen).
Hình 3.17. Sơ đồ gia đình mã số OI20 (sau khi phân tích gen).
Nhận xét: Sau khi tiến hành phân tích gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân cho thấy người mẹ khơng có đột biến, người bố đột biến dị hợp tử. Như vậy bệnh nhân mã số OI20 có đột biến dị hợp tử do nhận một alen đột biến từ người bố.
(c.1795-31C>T)
Nữbình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu Nam bị bệnh
Nữ bị bệnh (c.1795-31C>T)
* Kết quả phân tích gen của gia đình bệnh nhân mã số OI43
- Gia đình bệnh nhân mã số OI43 (trước khi phân tích gen).
Hình 3.18. Sơ đồ gia đình mã số OI43 (trước khi phân tích gen).
Nhận xét: Gia đình mã số OI43 có một người con gái bị bệnh tạo xương bất tồn, khi phân tích gen thấy COL1A1 cho thấy bệnh nhân mang đột biến dị hợp tử c.714+33T>C tại intron 7. Người mẹ không bị bệnh, người bố được chẩn đốn lâm sàng bị bệnh tạo xương bất tồn.
Nữbình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu
Nam bình thường
Nữ bị bệnh Nam bị bệnh
Hình 3.19. Hình ảnh giải trình tự gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân mã số OI43. Mũi tên thẳng đứng chỉ vị trí đột biến, các chữ số trên mũi tên chỉ vị trí nucleotid và acid amin thay đổi.
Nhận xét: Kết quả phân tích gen COL1A1 ở các thành viên gia đình bệnh nhân mã số OI43 cho thấy người bố bị đột biến dị hợp tử c.714+33T>C tại intron 7; người mẹ khơng có đột biến. Như vậy, bệnh nhân mã số OI43 có đột biến c.714+33T>C tại intron 7 dị hợp tử do nhận một alen đột biến từ người bố. Mẹ bệnh nhân c.714+33T Bệnh nhân mã số 43 c.714+33T>C Bố bệnh nhân c.714+33T>C
- Gia đình bệnh nhân mã số OI43 (sau khi phân tích gen).
Hình 3.20. Sơ đồ gia đình mã số OI43 (sau khi phân tích gen).
Nhận xét: Sau khi tiến hành phân tích gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân cho thấy người bố bị đột biến dị hợp tử. Người mẹ khơng có đột biến. Như vậy, bệnh nhân mã số OI43 có đột biến dị hợp tử do nhận một alen đột biến từ người bố.
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu
Nam bình thường
Nữ bị bệnh Nữbình thường
Nam bị bệnh (c.714+33T>C)
* Kết quả phân tích gen của gia đình bệnh nhân mã số OI03
- Gia đình bệnh nhân mã số OI03 (trước khi phân tích gen).
Hình 3.21. Sơ đồ gia đình mã số OI03 (trước khi phân tích gen)
Nhận xét: Gia đình mã số OI03 có một người con trai bị bệnh tạo xương bất tồn, khi phân tích gen thấy COL1A1 cho thấy bệnh nhân mang đột biến dị hợp tử thay thế nucleotid C thành nucleotid A ở vị trí 653 (653C>A) và nucleotid C thành nucleotid G ở vị trí 654 (654C>G) làm cho bộ ba tại vị trí 176 làm cho bộ ba tại vị trí 176 mã hóa serin chuyển thành mã kết thúc (p.Ser176 stop codon). Người mẹ và người bố không bị bệnh tạo xương bất toàn.
Nam bị bệnh
Nam bình thường Nữbình thường
Hình 3.22. Hình ảnh giải trình tự gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân mã số OI03. Mũi tên thẳng đứng chỉ vị trí đột biến, các chữ số trên mũi tên chỉ vị số OI03. Mũi tên thẳng đứng chỉ vị trí đột biến, các chữ số trên mũi tên chỉ vị trí nucleotid và acid amin thay đổi.
Nhận xét: Kết quả phân tích gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân mã số OI03 cho thấy người bố và người mẹ khơng tìm thấy đột biến gen. Như vậy, bệnh nhân mã số OI03 có sự thay đổi nucleotid C thành nucleotid A (thay đổi serin vị trí 176 thành tyrosin) và thay đổi nucleotid C thành nucleotid G (không làm thay đổi acid amin) đều ở dạng dị hợp tử. Nếu cả hai đột biến này xảy ra đồng thời sẽ biến đổi bộ ba TCC (mã hoá cho serin) thành mã kết thúc TAG (p.S176 stop).
653C 654C 653C 654C
Bố bệnh nhân Mẹ bệnh nhân
c.653C>A, c.654C>G
p.Ser 176 stop codon
- Gia đình bệnh nhân mã số OI03 (sau khi phân tích gen).
Hình 3.23. Sơ đồ gia đình mã số OI03 (sau khi phân tích gen).
Nhận xét: Sau khi tiến hành phân tích gen COL1A1 của bố mẹ bệnh nhân cho thấy bệnh nhân mã số OI03 không nhận được alen đột biến từ người mẹ hoặc từ người bố.
Bảng 3.7. Đột biến gen COL1A1, COL1A2 ở bố mẹ bệnh nhân tạo xƣơng bất toàn (42 cặp bố mẹ bệnh nhân)
Kết quả n
Người bố có đột biến gen 20
Người mẹ có đột biến gen 21
Người bố/mẹ không đột biến gen 1
Tổng cộng 42
Nhận xét: Phân tích gen COL1A1, COL1A2 từ 42 cặp bố mẹ của bệnh nhân tạo xương bất tồn có đột biến gen cho thấy có 20/42 bệnh nhân nhận đột biến từ người bố, 21/42 bệnh nhân nhận đột biến từ người mẹ và 1/42 bệnh nhân có đột biến mới phát sinh.
Nam bình thường Nam bị bệnh
Nữbình thường
Bệnh nhân tham gia nghiên cứu (c.653C>A, c.654C>G)