Xỏc định aminoaxit và peptit bằng sắc ký lỏng pha ngược và sắc ký lỏng khối phổ ( thầy xem và sửa giỳp em mục này) [10].

Một phần của tài liệu Bước đầu xác định hàm lượng các axit amin và protein trong thực phẩm (Trang 30 - 31)

khối phổ ( thầy xem và sửa giỳp em mục này) [10].

Phương phỏp mới cho phộp xỏc định nhạy cỏc aminoaxit và peptit là sử dụng thuốc thử 2-(9-carbazole)-ethyl chloroformate (CEOC) với mỏy dũ huỳnh quang (FL) đó được phỏt triển. Sự phỏt hiện ra cỏc dẫn xuất đó được tiến hành bằng phương phỏp sắc ký lỏng khối phổ. Nhúm mang màu trong thuốc thử 2-(9- fluorenyl)-ethyl chloroformate (FMOC) đó được thay thế bằng carbazole,dẫn đến một tỏc nhõn dẫn xuất cú tớnh nhạy quang là CEOC. CEOC cú thể phõn loại cỏc peptit và aminoaxit dễ dàng và nhanh chúng. Chất dẫn xuất đủ bền để cú khả năng phõn tớch bởi phương phỏp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Hiệu suất tạo dẫn xuất cực đại (gần 100%) được quan sỏt với số mol thuốc thử vượt quỏ 3-4 lần và nằm trong khoảng pH = 8.8 ữ 10. Cỏc dẫn xuất cú độ nhạy quang mạnh cho phộp bơm thẳng vào hỗn hợp phản ứng mà khụng làm xỏo trộn đỏng kể bởi sản phẩm phụ trong quỏ trỡnh phõn huỷ tỏc nhõn nhạy quang như là 2-(9-carbazole)-ethanol và 2-

(9-carbazole)-ethyl carbonate. Thờm vào đú, quỏ trỡnh phỏt hiện sự phản ứng với dẫn xuất CEOC được so sỏnh với quỏ trỡnh phỏt hiện sự phản ứng thu dược bằng FMOC. Tỷ lệ ACCEOC /ACFMOC = 1.00 ữ 1.82 cho sự cảm ứng phỏt huỳnh quang (FL) và AC'CEOC /AC'FMOC = 1.00 ữ 1.21 cho sự cảm ứng tử ngoại - cực tớm (UV). Ở đõy AC và AC' là sự cảm ứng tương ứng giữa FL và UV. Sự phõn tỏch cỏc chất dẫn xuất của peptit và aminoaxit dó được tối ưu hoỏ trờn cột Hypersil BDS C18. Phương phỏp này được sử dụng thành cụng để phõn tớch protein thuỷ phõn từ len và từ dẫn xuất trực tiếp của bia.

Một phần của tài liệu Bước đầu xác định hàm lượng các axit amin và protein trong thực phẩm (Trang 30 - 31)

Tải bản đầy đủ (DOC)

(50 trang)
w