CHƯƠNG 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM
2.3. THỰC NGHIỆM
2.3.1. Chuẩn bị nguyên liệu
Chuẩn bị dịch chiết củ ngưu bàng: quy trình thực hiện theo Sơ đồ 2.1.
Cân khoảng 10g củ ngưu bàng khơ đã được xay nhỏ cho vào bình cầu 250mL, cho tiếp 100mL nước cất hai lần vào bình cầu, sau đó tiến hành đun hồi lưu ở 100oC trong một giờ, ống hồi lưu được làm lạnh liên tục để làm tăng hiệu suất chiết xuất. Dung dịch sau khi đun để nguội rồi tiến hành lọc hút chân khơng (Hình 2.1). Dịch chiết sau khi thu được bảo quản ở 4oC. Dịch chiết được sử dụng làm chất làm khử AgNO3 cho các thí nghiệm sau.
Sơ đồ 2.1. Quy trình chiết xuất củ ngưu bàng
Hình 2.1. Hệ thống đun hồi lưu (A), lọc hút chân không (B) và dịch chiết củ ngưu bàng thu được (C)
Củ ngưu bàng khô
Xay nhỏ Mẫu nguyên liệu
Nước cất hai lần Đun hồi lưu 1 giờ Lọc hút chân không
Dịch chiết
Pha dung dịch sodium alginate theo tỷ lệ 0.7g/100mL H2O
Cân 0.7 gam sodium alginate hòa tan vào 100 mL nước cất hai lần, khuấy từ ở nhiệt độ phòng với tốc độ 1200 vòng/phút trong 60 phút, rồi siêu âm trong vòng 30 phút.
Pha dung dịch calcium acetate hydrate theo tỷ lệ 0.65g/100mL H2O
Cân 0.65 gam calcium acetate hydrate hòa tan vào 100 mL nước cất hai lần, khuấy từ ở nhiệt độ phòng với tốc độ 1200 vòng/phút trong 60 phút, siêu âm trong vòng 30 phút.
Pha dung dịch AgNO3 theo tỷ lệ 0.625g/20mL H2O
Cân 0.625 gam AgNO3 hòa tan vào 20 mL nước cất hai lần, khuấy từ ở nhiệt độ phòng với tốc độ 1200 vòng/phút trong 60 phút, rồi siêu âm trong vòng 30 phút.
Pha dung dịch cyclodextrin theo tỷ lệ 0.16g/100mL H2O
Cân 0.16 gam cyclodextrin hòa tan vào 100 mL nước cất hai lần, khuấy từ ở nhiệt độ phòng với tốc độ 1200 vòng/phút trong 60 phút, rồi đem đi đánh siêu âm trong vòng 30 phút.
Tỉ lệ giữa các hóa chất sử dụng được dựa trên các khảo sát và chọn ra các tỉ lệ thích hợp sau:
Tỉ lệ khối lượng giữa alginate : CD = 8 : 1
Tỉ lệ khối lượng giữa alginate : calcium acetate hydrate = 4:1
Nồng độ của AgNO3 là 5% so với tổng nồng độ của alginate và CD
Tất cả đều sử dụng khối lượng alginate làm chuẩn. malginate = 0.7 g
Tỉ lệ alginate và CD là 8:1 → mCD = 0.7/8 = 0.0875 g
Mà CD đã pha 0.16g/100mL → VCD = 0.0875x100/0.16 = 54.69 mL
Tỉ lệ alginate và Ca2+ là 4:1 → mCa2+ = 0.7/4 = 0.175 g
0.048 g
Mà AgNO3 theo tỉ lệ 0.625g/20mL
VAgNO3 = 0.0757x20/0.625 = 2.4 mL