Hình 11: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 2 mg/l sau 4 tu n nuôi c y Hình 10: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 1 mg/l sau 4 tu n nuôi c y Hình 12: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 3 mg/l sau 4 tu n nuôi c y
Hình 13: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 4 mg/l sau 4 tu n nuôi c y BA 4 mg/l sau 4 tu n nuôi c y Hình 15: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 6 mg/l sau 4 tu n ni c y Hình 14: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 5 mg/l sau 4 tu n ni c y Hình 16: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 7 mg/l sau 4 tu n ni c y
Hình 17: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 8 mg/l sau 4 tu n ni c y
Hình 18: Ch i trên mơi tr ng MS + BA 9 mg/l sau 4 tu n nuôi c y BA 9 mg/l sau 4 tu n nuôi c y
nghi m th c C, B3.1, B3.2, có th do t l auxin/cytokinin cao, nên m u c y có r phát tri n m nh mà khơng có s t o c m ch i. Ch i phát tri n y u, kích th c ch i nh .
Các nghi m th c B3.4, B3.5, B3.6, B3.7 và B3.8 có th do b sung n ng đ BA thích h p nên t l auxin/cytokinin th p làm c m ng s hình thành c m ch i đ ng th i c ch s phát tri n c a r , các m u c y khơng có r . Ch i phát tri n m nh, kích th c ch i l n.
các nghi m th c B3.9 và B3.10 n ng đ cytokinin quá cao c ch s phát tri n c a m u c y. M u c y khơng hình thành c m ch i. C ch i và r đ u không phát tri n.
III.6. Thí nghi m 6: Kh o sát s nh h ng c a NAA đ n kh n ng phát sinh r c a ch i cây S u riêng
B ng 10: K t qu t o r t ch i S u riêng in vitro trong môi tr ng MS b sung NAA (4 tu n tu i) Nghi m th c N ng đ NAA (mg/l) S r Chi u dài r (cm) C 0 0d 0d N1 1 0d 0d N2 2 0d 0d N3 3 2.55b 0.72b N4 4 5.11a 2.59a N5 5 0.89c 0.39c Cv= 18.99 Cv= 19.29% Trong cùng m t c t các s có cùng m u t không khác bi t m c ý ngh a 0,05 (P<0,05) qua phép th Duncan.
Gi a các nghi m th c thí nghi m có s khác bi t có ý ngh a. B sung NAA (auxin) vào môi tr ng nuôi c y đã có tác d ng tích c c đ n s hình thành r t ch i in vitro. nghi m th c đ i ch ng ch i sau khi c y 4 tu n khơng có s thay đ i. Các nghi m th c 1, 2 có b sung n ng đ NAA th p nên ch i ch a hình thành r ; nh ng hai
nghi m th c này g c ch i b t đ u phình ra, b c đ u cho vi c hình thành r . các nghi m th c 3,4,5 sau 4 tu n nuôi c y ch i xu t hi n r . nghi m th c 3 (MS + NAA 3mg/l ) s r ít (2.55 r / ch i) và r ng n (0,72 cm). Nghi m th c 4 (MS + NAA 4 mg/l ) cho k t qu t t nh t, r nhi u (5.11 r /ch i) và r dài (2.59 cm). Nghi m th c 5 (MS + NAA 5 mg/l) n ng đ NAA cao nên g c ch i có m t và kh i s o, r v n phát sinh nh ng r t ít (0.98 r / ch i) và ng n (0.39 cm).
Hình 20: Ch i trên mơi tr ng MS Hình 21: Ch i trên mơi tr ng MS + NAA 1 mg/l sau 4 tu n ni c y.
Hình 22: Ch i trên mơi tr ng MS + NAA 2 mg/l sau 4 tu n ni c y
Hình 24: Ch i trên mơi tr ng MS + NAA 4 mg/l sau 4 tu n nuôi c y NAA 4 mg/l sau 4 tu n ni c y
Hình 23: Ch i trên mơi tr ng MS + NAA 3 mg/l sau 4 tu n nuôi c y NAA 3 mg/l sau 4 tu n ni c y
Hình 25: Ch i trên mơi tr ng MS + NAA 5 mg/l sau 4 tu n nuôi c y
III.7. Gi i ph u r , thân, lá, đnh sinh tr ng cây S u riêng 3 tháng tu i ngoài t nhiên và cây S u riêng in vitro 10 tu n tu i trên môi tr ng MS.
Sau khi nhu m m u và quan sát d i kính hi n vi, ta th y các c u trúc thân, lá, r c a cây S u riêng ngoài t nhiên 3 tháng tu i và cây S u riêng in vitro 10 tu n tu i khơng có s khác bi t l n. Tuy nhiên, đnh sinh tr ng c a cây ni c y mơ có ph n ng n và to h n đ nh sinh tr ng cây ngồi t nhiên.
Hình 26: nh sinh tr ng cây S u riêng ngoài t nhiên 3 tháng tu i c t d c. riêng ngoài t nhiên 3 tháng tu i c t d c.
\
Hình 27: nh sinh tr ng cây S u riêng in vitro c t d c. riêng in vitro c t d c.
Hình 28: Thân cây S u riêng ngồi t nhiên 3 tháng tu i c t ngang
Hình 29: Thân cây S u riêng in vitro c t ngang c t ngang S kh i lá Ch i bên nh sinh tr ng. G Libe Bi u bì S kh i lá Ch i bên nh sinh tr ng.
Hình 30: Lá cây S u riêng ngồi t nhiên 3 tháng tu i c t ngang nhiên 3 tháng tu i c t ngang
Hình 31: Lá cây S u riêng in vitro c t ngang ngang
Hình 32: R cây S u riêng ngồi t nhiên 3 tháng tu i c t ngang.
Hình 33: R cây S u riêng in vitro c t ngang. c t ngang. Mô gi u Mô khuy t Bi u bì Bó d n chính Bó d n ph Mơ khuy t Bó d n ph Mơ gi u Bó d n chính Bi u bì
IV. K T LU N VÀ NGH
IV.1. K t lu n
T nh ng k t qu thu đ c qua các thí nghi m, chúng tơi rút ra nh ng k t lu n sau: - n ng đ HgCl2 0.1%, th i gian kh m u 10 phút s l ng m u s ng và không nhi m cao nh t (76.67%).
- Ch i bên, phơi h t S u riêng h u tính 1 và 2 tháng tu i khơng có kh n ng t o c m ch i trên môi tr ng MS b sung BA n ng đ t 1 đ n 10 mg/l.
- Trên mơi tr ng MS có b sung BA 5 mg/l phơi h u tính t h t S u riêng tr ng thành t o đ c c m ch i t t nh t. H u h t, các phôi nuôi c y trên môi tr ng này đ u phân hóa t o c m ch i v i nhi u ch i con. Ch i thu đ c t m t m u nuôi c y
đ t trung bình 5.11 ch i trên m t m u nuôi c y.
- Trên môi tr ng MS có b sung NAA 4 mg/l ch i S u riêng t o đ c r t t nh t. H u h t các phôi nuôi c y trên môi tr ng này đ u phân hóa t o c m ch i v i nhi u ch i con. S r đ c t m t m u nuôi c y đ t trung bình 5.11 r và chi u dài r trung bình là 2.59 cm.
IV.2. ngh
N u có đi u ki n chúng tôi ti p t c nghiên c u:
- T o bi n d cây S u riêng in vitro b ng ph ng pháp chi u x ho c tia UV nh m t o ra dòng m i.
TÀI LI U THAM KH O
Tài li u trong n c
1) Ngơ Xn Bình (2009), Ni c y mơ t bào th c v t, Nhà xu t b n Khoa h c và K thu t.
2) D ng Công Kiên (2002), Nuôi c y mô th c v t, Nhà xu t b n i h c Qu c gia TP. H Chí Minh.
3) Nguy n c L ng (2011), Công ngh t bào, Nhà xu t b n i h c Qu c gia TP. H Chí Minh.
4) Võ Th B ch Mai (2004), S phát tri n ch i và r , Nhà xu t b n i h c Qu c gia TP. H Chí Minh.
5) Hu nh V n Thành, Phòng tr b nh Phytophthora gây h i trên cây S u riêng, H i th o cây S u riêng. B n Tre ngày 19/9/2000, trang 1-7, S Nông Nghi p-Phát Tri n Nông Thôn B n Tre – Chi c c BVTV Vi n nghiên c u Cây n qu mi n nam.
6) Hu nh V n T n, Nguy n Minh Châu, 2003. K t qu b c đ u nghiên c u kh c ph c hi n t ng s ng c m trái S u riêng Monthong tr ng t i B n Tre, K t qu nghiên c u khoa h c công ngh rau qu 2001- 2002, Vi n nghiên c u Cây n qu mi n Nam, Nhà xu t b n Nơng nghi p TP. H Chí Minh.
7) Nguy n V n Tuy n (2012), K thu t tr ng S u riêng, Nhà xu t b n Thanh Niên.
8) Tr n Th T c (2004), Cây S u riêng Vi t Nam, Nhà xu t b n Nơng Nghi p. 9) Hồng Th S n (2006), Phân lo i h c th c v t, Nhà xu t b n i h c S Ph m. 10) Nguy n V n Vàn (2009), K thu t canh tác cây n trái-quy n 4: Cây S u riêng, NXB t ng h p thành ph H Chí Minh.
11) Tr n Vinh, Bình tuy n m t s cây đ u dòng S u riêng cl k và ph ng pháp m i đ nhân gi ng vơ tính. K t qu nghiên c u khoa h c Công ngh nông nghi p 19696-1997, B Nông Nghi p-Phát Tri n Nông Thôn, Nhà xu t b n Nông nghi p Hà N i 1998, trang 115-118.
12) Bùi Trang Vi t (2000), Sinh lý th c v t đ i c ng, Ph n II: Phát tri n, Nhà xu t b n i h c Qu c gia, TP. H Chí Minh.
13) Hameed B., Hakimi H., Utilization of durian (Durio zibethinus Murray) peel as low cost sorbent for the removal of acid dye from aqueous solutions, Biochemical Engineering Journal, Volume 39, Issue 2, 15 April 2008, Pages 338–343.
14) Komsil Pholdaeng, Sunanta Pongsamart, Studies on the immunomodulatory effect of polysaccharide gel extracted from Durio zibethinus in Penaeus
monodon shrimp against Vibrio harveyi and WSSV, Fish & Shellfish Immunology, Volume 28, Issue 4, April 2010, Pages 555–561.
15) Mahani A., Abidin Z.,Aishah A.,Sugeng Triwahyono, Hazirah Adam H., Nazirah Kamarudin N., Recovery of gold(III) from an aqueous solution onto a Durio zibethinus husk, Biochemical Engineering Journal,Volume 54, Issue 2, 15 April 2011,
Pages 124–131.
Tài li u internet
PH L C
I. Thành ph n môi tr ng MS (Murashige và Skoog) c b n.
B NG 1: THÀNH PH N MU I KHOÁNG C B N (mg/l) Stock I NH4NO3 1650,00 KNO3 1900,00 KH2PO4 170,00 MgSO4.7H2O 370,00 CaCl2.2H2O 440,00 Stock II Na2EDTA 37,30 FeSO4.7H2O 27,80 Stock III Mn2SO4.4H2O 22,30 H3BO3 6,20 ZnSO4.7H2O 8,60 KI 0,83 Na2MoO4.2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,025 CoCl2.6H2O 0,025 B NG 2: THÀNH PH N VITAMIN C A MOREL (mg/l) Morel’s Vitamin Pirydoxine (B6) 1,00 Biotin (II) 0,01 Meso-inositol 100,00 Nicotinic Acid (P.P) 1,00 Thiamin-HCl (B1) 1,00 Pantotheate-Ca 1,00
II. Phân tích th ng kê ANOVA 1) K t qu x lý th ng kê c a thí nghi m 1 Nghi m th c T l m u s ng vô trùng % S li u g c S li u chuy n đ i 1 6.67 14.97 3.33 10.51 20 26.57 2 16.67 24 14.97 14.97 23.33 28.88 3 20 26.57 26.67 31.09 36.67 37.27 4 33.33 35.26 40 39.23 36.67 37.27 5 23.33 28.88 30 33.21 6 80 63.43 83.33 65.09 66.67 54.74 7 60 50.77 53.33 46.91 63.33 52.73
8
53.33 46.91 56.67 48.83 46.67 43.09
ANOVA Table for KET QUA by NGHIEM THUC
Table of Means for KET QUA by NGHIEM THUC
2) K t qu x lý th ng kê c a thí nghi m 5
3) K t qu x lý th ng kê c a thí nghi m 6 a) K t qu x lý th ng kê s r
ANOVA Table for KET QUA by NGHIEM THUC
Multiple Range Tet for KET QUA by NGHIEM THUC
b) K t qu x lý th ng kê chi u dài r
Table of Means for KET QUA by NGHIEM THUC