- Hộp đựng dụng cụ khử khuẩn
2.3.1Thiết kế nghiờn cứu: nghiờn cứu mụ tả cắt ngang
2.3.2 Kỹ thuật thu thập số liệu
Thu thập số liệu theo mẫu bệnh ỏn thống nhất (phụ lục kốm theo)
2.3.3 Mẫu nghiờn cứu
Cỡ mẫu: Lấy mẫu thuận tiện; tất cả bệnh nhõn đến khỏm với cỏc biểu hiờn như trờn nghi nhiễm vi nấm Malassezia.sp
- Cụng thức tớnh: n = Z2 1-α/2 ( ) 2 ) ( 1 ε p p p −
n: cỡ mẫu cho nghiờn cứu tỷ lệ nhiễm nấm Malassezia.sp
Z: tỷ lệ bệnh nhõn nhiễm nấm Malassezia.sp ở da và cú xột nghiệm dương tớnh. ε: giỏ trị tương đối (=0,1)
Kết quả tớnh cỡ mẫu là n=385 bệnh nhõn
2.3.3.3 Biến số nghiờn cứu
Nghiờn cứu tỷ lệ nhiễm Malassezia.sp - Khỏm và làm bệnh ỏn theo mẫu
+ Tổng số BN đến khỏm + Số BN nhiễm nấm da
+ Số BN cú cỏc biểu hiờn lõm sàng như trờn mà xột nghiệm cú nấm
Malassezia.sp gõy bệnh (theo tiờu chuẩn V.Silva và CS) + Tuổi
+ Giới
+ Nghề nghiệp + Địa dư
Đỏnh giỏ vai trũ gõy bệnh Malassezia bằng kỹ thuật: Parker ink + KOH + Chỳng tụi tiến hành cựng lỳc lấy mẫu bệnh phẩm ở cỏc vị trớ được chỉ định cú nghi ngờ nhiễm nấm Malassezia.sp . Và một vị trớ khỏc bỡnh thường ở vựng da tiết nhiều bó nhờn nhưng khụng bị bệnh của chớnh bệnh nhõn đú.
+ Sau đú, thực hiện cựng phương phỏp soi tươi với húa chất Parker Ink + KOH. + Mục đớch: So sỏnh mật độ tập trung của vi nấm ở cỏc vị trớ da lành (vựng da tiết nhiều bó nhờn và vựng da nghi nhiễm bệnh nhằm đỏnh giỏ: Cú hay khụng vai trũ gõy bệnh của Malassezia.sp hay chỳng chỉ thuộc vi hệ mà khụng gõy bệnh trong một số bệnh da thường gặp. Qua đú khuyến cỏo với lõm sàng về căn nguyờn gõy bệnh hay chỉ ra đú là nhiễm nấm cơ hụi, làm trầm trọng thờm tỡnh trang bệnh. Vỡ vậy, giỳp cỏc bỏc sỹ lõm sàng chẩn đoỏn và điều trị hiệu quả hơn.
2.3.3.4 Quy trỡnh thu thập số liệu
Nghiờn cứu tỷ lệ nhiễm nấm Malassezia.sp ở một số bệnh ngoài da: Khỏm theo mẫu bệnh ỏn nghiờn cứu (Phụ lục)
- Tỷ lệ mật độ tõp trung cú khả năng gõy bệnh của vi nấm: Xột nghiệm trực tiếp bằng phương phỏp Parker ink + KOH
Bệnh nhõn viờm da
Khỏm lõm sàng
Xột nghiệm
(-) (+) Tỷ lệ Malassezia.sp GB Loại nghiờn cứu
Tỷ lệ nhiễm Malassezia. sp Sơ đồ 3: Quy trỡnh thu thập số liệu
2.3.3.5 Kỹ thuật xột nghiệm trực tiếp tỡm Malassezia.sp
+ Bệnh phẩm: Vẩy da, chất bó + Húa chất: Parker Ink + KOH 20%
+ Lấy mẫu bệnh phẩm: Sử dụng một trong hai phương phỏp sau. Nhưng lưu ý trờn mỗi bệnh nhõn chỉ nờn lựa chọn sử dụng một phương phỏp cũng như một húa chất xột nghiệm để giỳp cho việc so sỏnh, đỏnh giỏ kết quả chớnh xỏc.
• Cạo vẩy da bằng dao cựn
• Phương phỏp Scott: Nờn dựng băng dớnh lấy bệnh phẩm trong trường hợp •• Vẩy da quỏ ớt khụng cạo bằng dao được
•• Trẻ nhỏ bị ở vựng mặt, tay chõn (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chỳng tụi nhận định kết quả theo nghiờn cứu của V.Silva và cỏc cộng sự. ễng tiến hành nghiờn cứu trờn cả người bệnh và người bỡnh thường khỏe mạnh. Sau đú tiến hành đồng thời cỏc kỹ thuật soi trực tiếp bằng Parker Ink kết hợp KOH và kỹ thuật nuụi cấy định loại nấm (58).
+ Nhận định kết quả: KHV vật kớnh 40. Theo V.Silva và cộng sự ● Nếu - : 0 - 3 tế bào nấm/VT
● Mức độ 1+ : 4-10 tế bào nấm/VT ● Mức độ 2+ : 11-20 tế bào nấm/VT ● Mức độ 3+ : 21- 40 tế bào nấm/VT ● Mức độ 4+ : ≥ 40 tế bào nấm/VT
- Ngoài ra chỳng tụi cũn tiến hành kết hợp với phương phỏp Soi đốn Wood để phối hợp tỡm vị trớ tập trung vi nấm trờn thương tổn là nhiều nhất
2.4.4 Xử lý số liệu
Nhập và xử lý số liệu theo chương trỡnh SPSS 16.0
Sau khi xử lý cỏc số liệu chỳng tụi đưa ra cỏc tỷ lệ (%) bệnh nhõn nhiễm nấm Malassezia.sp, tỷ lệ (%) bệnh do Malassezia gõy nờn, tỷ lệ (%) mật độ tập trung (>20 tế bào/vi trường) của tế bào nấm men trờn KHV.
2.4.5 Đạo đức trong nghiờm cứu
- Nghiờn cứu được sự đồng ý BGD BV DL TW
- Bệnh nhõn được giải thớch đầy đủ khi thăm khỏm, làm xột nghiệm - Bệnh nhõn đồng ý tham gia nghiờn cứu.
CHƯƠNG 3
DỰ KIẾN KẾT QUẢ NGHIấN CỨU
3.1 Tỷ lệ nhiễm nấm Malassezia.sp trờn một số bệnh da3.1.1 Phõn bố chung bệnh nấm da do Malassezia. sp 3.1.1 Phõn bố chung bệnh nấm da do Malassezia. sp
Tỷ lệ bệnh nấm do Malassezia. sp trong số BN nhiễm nấm da
Bảng 3.1. Tỷ lệ bệnh nấm da Malassezia. sp trong số BN nhiễm nấm da
Bệnh nấm da Số bệnh nhõn Tỷ lệ(%)
Do Malassezia. Sp Khụng do Malassezia. sp
Tổng số 100
Nhận xột:
3.1.2 Phõn bố nhiễm nấm da do Malassezia. sp theo cỏc thỏng trong nămBiểu đồ 3.1 (hỡnh cột) Biểu đồ 3.1 (hỡnh cột)
3.1.3 Phõn bố bệnh nấm da do Malassezia. sp theo giớiBiểu đồ 3.2 (hỡnh trũn) Biểu đồ 3.2 (hỡnh trũn) 3.1.4 Phõn bố bệnh nấm do Malassezia. sp theo tuổi
Bảng 3.2. Phõn bố bệnh nấm do Malassezia. sp theo tuổi
Nhúm tuổi Số bệnh nhõn Tỷ lệ(%) 16 -20 20-29 30-39 40-49 >50 Tổng số Nhận xột:
3.1.5 Phõn bố bệnh nấm do Malassezia. sp theo nghề nghiệp
Nghề nghiệp Số bệnh nhõn Tỷ lệ(%) Tri thức Cụng nhõn Nụng dõn Học sinh-sinhviờn Nội trợ Cũn nhỏ Tổng số Nhận xột
3.1.6 Phõn bố nhiễm nấm do do Malassezia. sp theo địa dư
Bảng 3.4. Tỷ lệ bệnh nhõn nhiễm nấm do Malassezia. sp theo nơi ở
Nơi ở Số BN nhiễm nấm ko do do Malassezia Số BN nhiễm nấm do do Malassezia n % n % Thành thị Nụng thụn Tổng số Nhận xột:
3.1.7 Phõn bố nhiễm nấm do Malassezia. sp ở một số biểu hiện lõm sàng
Bảng 3.5. Tỷ lệ bệnh nhõn nhiễm Malassezia. sp ở một số triệu chứng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Triệu chứng
Số BN nhiễm nấm ko liờn quan Malassezia
Số BN nhiễm nấm cú liờn quan Malassezia
Nn % n % Ngứa Đau Đỏ da Bong vảy Đục múng Khỏc Nhận xột:
3.1.8 Phõn bố nhiễm nấm do Malassezia. sp theo vị trớ thường gặp
Bảng 3.6. Tỷ lệ bệnh nhõn nhiễm Malassezia. sp theo vị trớ
Vị trớ
Số BN nhiễm nấm ko liờn quan Malassezia
Số BN nhiễm nấm cú liờn quan Malassezia
n % n % Đầu Mặt Lưng Ngực Tay Chõn Múng (tay, chõn) Khỏc Nhận xột:
3.1.9 Phõn bố nhiễm nấm ở một số bệnh da thường gặp do Malassezia. sp
Bảng 3.7. Tỷ lệ bệnh nhõn nhiễm Malassezia. sp ở một số bệnh da
Một số bệnh da
Số BN nhiễm nấm ko liờn quan Malassezia
Số BN nhiễm nấm cú liờn quan Malassezia
n % n %
Lang ben Viờm da dầu Viờm nang lụng Viờm da cơ địa Rụng túc Bạch biến
Loạn dưỡng múng Khỏc
Nhận xột:
3.2 Đỏnh giỏ vai trũ gõy bệnh của Malassezia.sp trờn một số bệnh da thườnggặp bằng kỹ thuật Parker Ink kết hợp KOH 20% gặp bằng kỹ thuật Parker Ink kết hợp KOH 20%
3.2.1 Đặc điểm của kỹ thuật XNTT tỡm nấm Malassezia.sp ở một ssso bệnh da
Bảng 3.8. Đặc điểm húa chất sử dụng trong XNTT tỡm Malassezia.sp
Đặc điểm húa chất
Viờm da LQ nấm Malassezia.sp
p
Khụng Cú
n % n %
KOH 20% + Parker Ink
KOH 20%
Nhận xột (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Đặc điểm thao tỏc lấy BP Viờm da LQ nấm Malassezia.sp p Khụng Cú n % n % Cạo dao cựn Dựng băng dớnh Nhận xột:
Bảng 3.10. Đăc điểm nhận định kết quả trong XNTT ở một số bệnh da do Malassezia.sp Nhận định kết quả Số bệnh nhõn Tỷ lệ(%) 5 – 10 11 – 19 20 – 39 >=40 Tổng số Nhận xột:
3.2.2 Phõn bố bệnh do nấm men Malassezia.sp và Candida.sp trong số bệnhnấm da nấm da
CHƯƠNG 4
DỰ KIẾN BÀN LUẬN
trựng và cụn trựng học – Giỏo trỡnh giảng dạy sau đại học, Học viện quõn y, NXB quõn đội nhõn dõn, tr. 499 – 564.
2. Nguyễn Thị Đào (1987): Tỡnh hỡnh cỏc bệnh nấm và cỏc chủng nấm gõy bệnh ở miền bắc Việt Nam (1972-1983). Túm tắt cụng trỡnh nghiờn cứu khoa học chọn lọc nghành Da liễu Việt Nam 1987, tr. 111-112.
3. Nguyễn Thị Đào, Lờ Kinh Duệ, Nguyễn Xuõn Hiền (1979), Một số bệnh nấm da thường gặp ở người, Nhà xuất bản y học, Tr. 3-72
4. Nguyễn Lõn Dũng (1997), “Vi nấm y học”, NXB Giỏo dục, tr. 86 -89.
5. Phạm Thị Thu Hương (2001), “Xỏc định một số lại nấm Candida trờn bệnh nhõn nhiễm nấm da và niờm mạc đến khỏm và điều trị tại bệnh viện Da Liễu Hà Nội năm 2011” . Luận văn thạc sỹ Y học.
6. Phạm Hoàng Khõm (2002), Nghiờn cứu một số biến đổi miễn dịch ở bệnh nhõn nấm da và đỏnh giỏ hiệu quả điều trị bằng phỏc đồ BSI - BENZOSALI kết hợp với LEVAMISOL., Luận ỏn Tiến sỹ Y học
7. Nguyễn Thị Tuyết Mai (1998), “Tỡnh hỡnh bệnh lang ben và đỏnh giỏ tỏc dụng điều trị bằng uống ketoconazole tại Viện Da liễu từ 1997-1998”
8. Bulmer G.S., Đỗ Thị Nhuận (1973), Fungus diseases of southeast Asia. Sai Gũn.1-28,pp. 55-91; 190-267.
9. Đỗ Thị Nhuận (1973), Vi nấm y học thực hành. NXB Y khoa Sài Gũn, tr. 115 – 122
10. Hoàng thị Phượng (2009), “Đặc điểm lõm sàng, cận lõm sàng và điều trị viờm da dầu bằng Vitamin A axit kết hợp Taclolimus trờn bệnh nhõn đến khỏm tại bệnh viện Da liễu TW”. Luận văn thạc sỹ.
12. Nguyễn Ngọc Thụy (2004), “ Nấm gõy bệnh y học”, NXB Quõn đội, tr 155 – 160 13. Lờ Anh Tuấn (2006), “Nghiờn cứu tỡnh hỡnh đặc điểm lõm sàng, một số yếu tố liờn quan và kết quả điều trị bệnh viờm da dầu bằng cream ketoconazole và cream corticoid”. Luận văn thạc sỹ
14. Phạm Trớ Tuệ (2001), Bệnh nấm nội tạng, Giỏo trỡnh sau đại học, Trường đại học Y Hà Nội
II. Tiếng Anh
15. Archer-Dubon C, Icaza-Chivez ME, Orozco-Topete R, Reyes E, Baez- Martinez R, Ponce de Leon S. An epidemic outbreak of Malassezia folliculitis in three adult patients in an intensive care unit: a previously unrecognized nosocomial infection. Int J Dermatol. Jun 1999;38(6):453- 16. Aspiroz, C., L. A. Moreno, A. Rezusta, and C. Rubio. 1999. Differentiation
of three biotypes of Malassezia species on human normal skin. Correspondence with M. globosa, M. sympodialis and M. restricta. Mycopathologia 145:69-74.
17. Back O, Faergemann J, Hornqvist R. Pityrosporum folliculitis: a common disease of the young and middle-aged. J Am Acad Dermatol. Jan 1985;12 (1 Pt 1):56-61.
18. Batra R, Bluhm R, Boekhout T, Dawson TL. Skin diseases associated with Malassezia species. J Am Acad Dermatol 2004; 51:785-98. Back to cited text no. a.
19. Bernward Rohde & Gabriele Hartmann (1980): Introducing mycology by examples, pp. 43-49
21. Bulmer GS, Pu XM, Yi LX. Malassezia folliculitis in China. Mycopathologia. Jun 2008;165(6):411-2
22. Cartledge J. D., Midgley J. and Gazzard B. G. (1996). Relative growth measurement of candida species in a single concentration of fluconazole predicts the clinical response to fluconazole in HIV infected patients with oral candidosis. Journal of Antimicrobial Chemotharapy, pp: 275-283.
23. CDC- LIFEGAP(2008): Direct Microscopic Exmination of Opportunistic Microorganism, pp. 51-54
24. Clayton M.Y. (2000), “Superficial Fungal Infection”, Texbook of Pedistric Dermatology, 5(15), pp. 447 – 472.
25. Cohen M (1954) “A simple procedure for staining Tinea versicolor with toumtain pen ink . Dermatol, p: 9-10
26. Crespo Erchiga V, - Florencio VD. Malassezia species in skin diseases. Curr Opin infect Dis 2002; 15:133-42. Back to cited text no.
27. Davise H. Larone (2002): Medically important fungi, 4th edition, pp. 109- (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
28. Edouard D. (1993), “Candida infection”, Tropical infectious diseases, Principles, pathogens, & practice, pp. 645 – 663
29. Eduardo Silva Lizama - Tinea versicolor, Int J dermatol (1995); 39: 611-7 30. Erchiga VC, Florencio VD. (2002) “Malassezia species in skin diseases”.
Curr Opin Infect Dis, 15: p.133-42.
31. Espinel (2000). Ingrolff Med. Mycol, Lee(2000). Antimicro Agents, Sobel J.D(2001)
32. F.SANCHEZ FAJARDO (2000) “Malassezia globosa as the causative agent of pityriasis versicolor”British Journal of Dermatology 2000; 143: 799
34. Five. WJ Crozier, KA wise. Onychomycosis due to Pityrosporum. Australas J Dermatol 1993
35. Furue M, Yamazaki S, Jimbow K, Tsuchida T, Amagai M, Tanaka T, Matsunaga K, Muto M, Morita E, Akiyama M, Soma Y, Terui T, Manabe M. (2011) “Prevalence of dermatological disorders in Japan: A nationwide, cross-sectional, seasonal, multicenter, hospital-based study”. J Dermatol.38(4): p.353-63.
36. Gaitanis G, Magiatis P, Hantschke M, Bassukas ID, Velegraki A. The malassezia genus in skin and systemic diseases. Clin Microbiol Rev. Jan 2012;25(1):106-41.
37. Gordon MA. The lipophilic mycoflora of the skin I: in vitro culture of Pityrosporum orbiculare n.sp. Mycologia 1951; 43:524±35.
38. GueÂho E, Boeckhout T, Ashbee HR et al. The role of Malassezia species in the ecology of human skin and as pathogens. Med. Mycol 1998; 36 (Suppl. 1): 220±9.
39. GueÂho E, Simmons RB, Pruitt WR et al. Association of Malassezia pachydermatis with systemic infections of humans. J Clin Microbiol 1987; 25: 1789±90
40. Guộho, E., G. Midgley, and J. Guillot. 1996. The genus Malassezia with description of four new species. Antonie Leeuwenhoek 69:337-355.
41. Gupta AK, Batra R, Bluhm R, Boekhout T, Dawson TL Jr. Skin diseases associated with Malassezia species. J Am Acad Dermatol. Nov 2004;51(5):785-98.
42. Gupta AK, Madzia SE, Batra R. (2004) “Etiology and management of seborrheic dermatitis”. Dermatology; 208 (2): p.89-93.
44. Isabelle Thomas (1993): International of Dermatology. Vol 32, 11.
45. Jacinto-Jamora S, Tamesis J, Katigbak ML. Pityrosporum folliculitis in the Philippines: diagnosis, prevalence, and management. J Am Acad Dermatol. May 1991;24(5 Pt 1):693-6.
46. Johnson BA, Nunley JR. (2000) “treatment of seborrheic dermatitis”. Am Fam Physician, 61: p.2703-10, 2713-4.
47. Kim GK. (2009) “Seborrheic Dermatitis and Malassezia species: How Are They Related?”. J Clin Aesthet Dermatol. 2(11): p.14-7.
48. Mc.NeilM.,et al (2001), “Trends in mortality due to invasive mycotic diseases in the United State 1980 – 1997”, Clinical ỡnectious diseases, vol 13,pp. 641- 647.
49. Midgley G. The diversity of Pityrosporum (Malassezia) yeasts in vivo and in vitro. Mycopathologia 1989; 106: 143±53.
50. Nakabayashi A, Sei Y, Guillot J. (1996) “Identification of Malassezia species isolated from patients with seborrhoeic dermatitis, atopic dermatitis, pityriasis versicolor and normal subjects”. Japan
51. Parry ME, Sharpe GR. (1998) “Seborrhoeic dermatitis is not caused by an altered immune response to Malassezia yeast”. Br J Dermatol 139: p.254-63. 52. Ponton., Omaetxebarria M.J., Elguezabal N.,et al(2001),“Immunoreactivity
of the fungal cell wall”, Med Mycol,39,pp.101-110
53. Schmidt A. Malassezia furfur: a fungus belonging to the physiological skin flora and its relevance in skin disorders. Cutis. Jan 1997;59(1):21-4.
54. Shadzi S. and Chadeganipour M. (1996). Isolation of opportunistic fungi from bronchoalveolar lavage of compromised host in Isfahan, Iran, pp: 79-83.
56. Silva V, Noreno GA, Zaror L, De Oliveira E, Fischman O. Malassezia furfur isolated from patients with onychomycosis. J Med Vet Mycol 1997; 35:73-4. Back to cited text no. 4
57. Silva V, Noreno GA, Zaror L, De Oliveira E, Fischman O. Malassezia furfur isolated from patients with onychomycosis. J Med Vet Mycol 1997; 35:73-4. Back to cited text no. 4
58. Silva.V, Fischman. O, Zaor. L (1996), Important examen microscopi direct cuntaneous diagnostic the Malassezia.sp
59. Simmons RB, GueÂho E. A new species of Malassezia. Mycol Res 1990; 94: 1146±9.
60. Sina B, Kauffman CL, Samorodin CS. Intrafollicular mucin deposits in Pityrosporum folliculitis. J Am Acad Dermatol. May 1995;32(5 Pt 1):807-9. Gupta AK (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
61. Tajima M, Sugita T, Nishikawa A, Tsuboi R. (2008), “Molecular analysis of Malassezia microflora in seborrheic dermatitis patients: comparison with other diseases and healthy subjects”. J Invest Dermatol. 128(2): p.345-51. 62. Tajima M, Sugita T, Nishikawa A, Tsuboi R. (2008), “Molecular analysis of
Malassezia microflora in seborrheic dermatitis patients: comparison with other diseases and healthy subjects”. J Invest Dermatol. 128(2): p.345-51. 63. Taxonomic Study (van Kreger-Rij NYW, ed.), 3rd edn. Amsterdam:
Elsevier, 1984: 882±5
64. Thomas B.Fitzpatrick. (1987) “Seborrheic dermatitis”. Dermatology in General Medicine. Mosby publishing: p.978-981.
66. V.CRESPO ERCHIGA, A.OJEDA MARTOS, A.VERA CASANÄ O, A.CRESPO ERCHIGA AND
67. Victo Silva V (2011), Clinical Mycology Workshop ASM/CDC/VietNam 68. Victor Silva, Cintia Di Tilia & Olga Fischman. (1996), Skin colonization by
Malassezia furfur in heathy children up to 15 years old. Sao Paolo. Brazil, p.132-145.
69. WJ Crozier, KA wise. Onychomycosis due to Pityrosporum. Australas J Dermatol 1993; 34:109-12. Back to cited text no. 5
70. WJ Crozier, KA wise. Onychomycosis due to Pityrosporum. Australas J Dermatol 1993; 34:109-12. Back to cited text no
71. Yarrow D, Ahearn DG. Genus 7: Malassezia Baillon. In: The Yeasts,
72. Zaidi Z, Wahid Z, Cochinwala R, Soomro M, Qureishi A. (2002) “Correlation of the density of yeast Malassezia with the clinical severity of seborrhoeic dermatitis”. J Pak Med Assoc. 52(11): p.504-6.
TIẾNG PHÁP
73. Helene Koenig (2001): Guide de Mycologie Mộdicale, pp. 231 – 235.
74. Klein Catherine (2002): Infection en gynecology. http://www. Formathon.com/cashiers/fm2002/ènfections Gynec Klein.htm