II. CHẨN ĐOÁN BỆNH SÁN LÁ GAN LỚN Ở NGƯỜI
4. Chẩn đoán định loại loài
4.1. Định loài hình thể
Phân biệt về hình thái học giữa hai loài SLGL F. gigantica và F.
hepatica gặp rất nhiều khó khăn trong việc định loài ở các vùng địa lý có mặt cả hai loài gây bệnh cho người và gia súc [64]. Tuy nhiên, một số đặc điểm khác biệt của hai loài này cũng đã được tóm tắt dưới bảng sau:
Bảng 2. Tóm tắt một số đặc điểm phân loại Fasciola sp.
Đặc điểm Fasciola gigantica Fasciola hepatica
Kích thước Hình dạng
- 20-80 mm x 13 mm.
- Thân sán hình dẹt, thuôn đều theo chiều dọc cơ thể.
- Vai không rõ.
- Giác miệng nhỏ hơn giác bụng. - Các nhánh tuyến tinh hoàn phân nhánh hình cành cây, chữ T hoặc Y đến tận cùng. - 20-30 mm x 12 mm. - Thân sán dẹt, phần giữa phình to. - Có vai rõ.
- Giác miệng bằng giác bụng. - Các nhánh tuyến tinh hoàn phân nhánh, thắt cục.
4.2. Định loại sinh học phân tử
Ứng dụng phản ứng chuỗi khuếch đại gen (PCR) có thể định loại được loài, xác định được loài phụ, loài mới. Đòi hỏi kinh phí tốn kém và kinh nghiệm. Để có thể kết luận chính xác loài SLGL và biến đổi di truyền ra sao đòi hỏi cần khảo sát hệ gen ty thể và áp dụng những chỉ thị phân tử thích hợp [63].
Với sự tiến bộ của nghiên cứu AND hệ gen ty thể ngày càng phổ biến và ưu thế trong chẩn đoán và phân biệt loài. Hệ gen ty thể là dạng đơn bội di truyền dòng mẹ không tái tổ hợp và có tỷ lệ biến đổi nucleotit cao hơn hệ gen nhân 10-15 lần. Điều này giúp cho việc phân tích họ hàng và tiến hóa sinh vật, trong đó có ký sinh trùng trở nên đơn giản và chính xác hơn ở cấp độ phân tử. Điều này, giúp xác định hệ loài tam bội (2n=3x=30) và nhị bội (2n=2x=20) ở Nhật Bản và Hàn Quốc [21]. Làm sáng tỏ loài lai giữa thể nhị
bội và thể tam bội (2n/3n) [13], [21] và bước đầu giám định F. gigantica trên
người Việt Nam [9], [22].
Qua phân tích chỉ thị gen ty thể sử dụng đoạn gen NAD1 (nicotinamide
dehydrogenase subunit 1) xác định caceria của F. gigantica và F. gigantica
trong ốc có hệ số đồng loài ca o khi so sánh với các chủng khác khu vực địa
của F. gigantica và F. hepatica do có những đoạn gen chung giữa hai loài [11], [15], [18].