CH NGă3 :ăNGUYểNăLI UăVÀăPH NGăPHỄPăNGHIểNăC U
3. 4B trí thí nghi m:
Thí nghi m 1: Kh oăsátăsoăsánhăl ng polyphenol t ng gi a rau di păcáăt iă và rau di p cá ch n.
B NG 3.3 B TRÍ THÍ NGHI M KH OăSỄTăL NG POLYPHENOL T NG GI A RAU DI PăCỄăT I VÀ RAU DI P CÁ CH N
Thông s c đnh Rau di p cá t i Rau di p cá ch n
Nhi tăđ ch n - 750C
Th i gian ch n - 45s
T l nguyên li u: dung môi. 1:5 1:5
Th i gian trích ly 30 phút 30 phút
Nhi tăđ trích ly 600C 600C
pH 4.5 4.5
N ngăđ dung môi ethanol 30% 30%
Hàm m c tiêu TPC TPC
Thí nghi m 2: Kh o sát quá trình ch n rau di p cá.
Kh o sát nhi tăđ ch n nhăh ngăđ năệ ng polyphenol t ng Thông s c đnh:
- Th i gian ch n: 30s
- Th i gian trích ly: 30 phút - Nhi tăđ trích ly: 600C - Ph: 4.5
- N ngăđ dung môi ethanol: 30%.
- Thông s kh o sát: nhi tăđ ch n: 600C, 700C, 800C, 900C.
Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khô nguyên li u).
Kh o sát th i gian ch n nhăh ngăđ năệ ng polyphenol t ng Thông s c đnh:
- Nhi tă đ ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tă đ ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- T l nguyên li u: dung môi: 1:5 - Th i gian trích ly: 30 phút
- Nhi tăđ trích ly: 600C - pH: 4.5
- N ngăđ dung môi ethanol: 30%
- Thông s kh o sát: th i gian ch n: 30s, 45s, 60s, 75s, 90s
Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khơ ngun li u).
Thí nghi m 3: Kh o sát q trình trích ly rau di p cá:
Kh o sát th i gian trích ly nh h ngăđ năệ ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá:
Thông s c đnh:
- Nhi tă đ ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tă đ ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- T l nguyên li u: dung mơi: 1:5 - Nhi tăđ trích ly: 600C
- N ngăđ dung môi ethanol: 30%
- Thông s kh o sát: th i gian trích ly: 30 phút, 40 phút, 50 phút, 60 phút và 70 phút.
Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khơ ngun li u), ho t tính ch ng oxy hóa (µmol TEAC/g ch t khơ ngun li u).
Kh o sát nhi tăđ trích ly nhăh ngăđ năệ ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá:
Thông s c đnh:
- Nhi tă đ ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tă đ ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- T l nguyên li u: dung môi: 1:5
- Th i gian trích ly: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian trích ly nhăh ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- pH: 4.5
- N ngăđ dung môi ethanol: 30%
- Thông s kh o sát: nhi tăđ trích ly: 350C, 450C, 550C, 650C, 750C
Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khơ ngun li u), ho t tính ch ng oxy hóa (µmol TEAC/g ch t khơ ngun li u).
Kh o sát t l nguyên li u: dung môi nhăh ngăđ năệ ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá:
Thông s c đnh:
- Nhi tă đ ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tă đ ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian trích ly: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian trích ly nhăh ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- Nhi tăđ trích ly: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tăđ trích ly nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- pH: 4.5
- N ngăđ dung môi ethanol: 30%
- Thông s kh o sát: t l nguyên li u: dung môi: 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6 (g/ml). Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khô nguyên li u), ho t tính ch ng oxy hóa (µmol TEAC/g ch t khô nguyên li u).
Kh oăsátăhỢmăệ ng ethanol nhăh ngăđ năệ ng polyphenol t ng và ho t
tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá: Thông s c đnh:
- Nhi tă đ ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tă đ ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian ch n: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian ch n nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng c a d ch chi t rau di p cá.
- T l nguyên li u: dung môi: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát t l nguyên li u: dung môi nhăh ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- Th i gian trích ly: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát th i gian trích ly nhăh ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- Nhi tăđ trích ly: s d ng k t qu t thí nghi m kh o sát nhi tăđ trích ly nh h ngăđ năl ng polyphenol t ng và ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
- pH: 4.5
Ch tiêuăđánhăgiá:ăHàmăl ng polyphenol t ng (mg GAE/g ch t khô nguyên li u), ho t tính ch ng oxy hóa (µmol TEAC/g ch t khơ ngun li u).
Thí nghi m 4: T iă uăhóaăđi u ki nătríchăl ng polyphenol t ng - ho t tính ch ng oxy hóa c a d ch chi t rau di p cá.
Ph ngă phápă b m tă đápă ng (Response Surface Methodology)ă đ c l a ch năđ t iă uăhóaăđi u ki n chi t polyphenol và kh n ngăkhángăoxyăhóaăt rau di p cá.
B n thông s quan tr ng c aăqătrìnhătríchălyăđ c nghiên c u bao g m: - Nhi tăđ trích ly (X1)
- Th i gian trích ly (X2).
- T l dung môi/nguyên li u (X3) - N ngăđ ethanol (X4).
Thí nghi mă đ c b trí theo ki u tr c tâm quay (Rotatable Central Composite Design).
3.5ăPh ngăphápăphơnătích:
- Xácăđ nhăhàmăl ng polyphenol t ngătheoăph ngăphápăquangăph màu v i thu c th Folin Ciocalteu [22].
- Xácă đnh ho t tính kháng oxy hóa theo 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) [23].
- Xácăđ nhăđ m b ngăph ngăphápăs yăđ n kh iăl ngăkhôngăđ i, s d ng thi t b đoăđ m h ng ngo i c a hãng Ohaus (M ) s n xu t 26 [24].
3.6ăPh ngăphápăx lý s li u:
M i thí nghi m s l p l i 3 l n và k t qu đ cătrìnhăbàyăd i d ng giá tr trungăbìnhă±ăđ l ch chu n.
S d ng ph n m m th ngă kêă minitapă đ phân tích th ng kê s li u thí nghi măvàăđánhăgiáăs khác bi t gi a các m u. Phân tích ANOVA nh m ki m tra đ tin c y v i m căỦăngh aă5%ăđ đánhăgiáăs khác bi t gi a các m u phân tích có ý ngh aăv m t th ng kê.
CH NGă4:ăK T QU VÀ BÀN LU N 4.1 K t qu đoăm t s thành ph n trong nguyên li u rau di p cá: