2.6.1.7UDRÿәLFKҩWYӟLQJXӗQFDUERQOjDFHWDWH
Acetate là nguӗQ FDUERQ ÿѭӧc sӱ dөng rӝng rãi trong nghiên cӭu vӅ quá trình EBPR. Trong E. coli DFHWDWHÿѭӧc vұn chuyӇQTXDNrQKÿӗng vұn chuyӇn acetate xuyên màng (ActP) (Gimenez et al., 2003). Gen actP ÿmÿѭӧF[iFÿӏnh hiӋn diӋn trong bӝ gen cӫD$FFXPXOLEDFWHU$FHWDWHÿѭӧc chuyӇn xuyên màng thông qua kênh ActP cùng vӟi sӵ chênh lӋch gradient nӗQJÿӝ H+ hoһc Na+7ѭѫQJWӵ QKѭ$FW3Fӫa E. coli, sӵ hҩp thu acetate cӫa vi khuҭn Accumulibacter bӏ ӭc chӃ bӣi thӇ vұn chuyӇn proton carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP).
Vài dҥQJWUDRÿәi chҩWÿѭӧc nghiên cӭXÿӇ mô tҧ sӵ biӃQÿәi sinh hóa các nguӗn FDUERQWURQJTXiWUuQKWUDRÿәi chҩt. Khi nghiên cӭu vӟLDFHWDWHQKѭOjQJXӗn carbon duy nhҩWTXiWUuQKWUDRÿәi chҩWÿѭӧc trình bày trong hình 4.
Hình 4. Mơ tҧ FiFÿһFÿLӇm sinh hóa chính trong q trình EBPR. Sӵ chuyӇn
ÿәi kiӇXWUDRÿәi chҩt xҧ\UDGѭӟLÿLӅu kiӋn kӷ khí và hiӃu khí.
4XiWUuQK(%35ÿѭӧc biӃWÿӃQQKѭVӵ biӃQÿәi theo chu trình cӫa các chҩWWtFKONJ\QӝLEjRQKѭSRO\-P, PHAs và JO\FRJHQ7URQJÿLӅu kiӋn kӷ khí, poly-P nӝi bào bӏ thӫy phân tҥRQăQJOѭӧng ATP cho q trình hҩp thu các chҩt hӳXFѫQKѭFiFD[LGEpRPҥch ngҳn và thơng qua quá WUuQKÿySKRVSKDWHSKyQJWKtFKUDP{LWUѭӡng. VFAs ÿѭӧc chuyӇn hóa thành PHAs. 1Jѭӧc lҥLGѭӟLÿLӅu kiӋn hiӃu khí, PHAs bӏ R[\KyDYj3ÿѭӧc hҩp thu vào trong tӃ bào trӣ lҥLYjÿӗng hóa thành poly-P. Song song vӟi quá WUuQKQj\WKuJO\FRJHQÿѭӧc tái tәng hӧp và tӃ bào sӁ WăQJ WUѭӣng và phát triӇn (Hình 4).
2.6.2.7UDRÿәi chҩt vӟi nguӗn carbon khác
DҥQJWUDRÿәi chҩWWUrQÿѭӧc nghiên cӭu chӫ yӃu dӵa trên các hӋ thӕng bùn hoҥt tính nhân tҥo vӟi acetate là nguӗn carbon duy nhҩt. Tuy nhiên, trong hӋ thӕng bùn hoҥt tính trong tӵ nhiên, bên cҥnh acetate thì cịn có nhiӅu hӧp chҩt carbon mҥch ngҳn khác. Sӵ WUDRÿәi chҩt kӃt hӧp giӳa các nguӗQFDUERQNKiFQKDXWKuFKѭDÿѭӧc nghiên cӭu nhiӅu. Có báo cáo cho rҵng, khi thí nghiӋm vӟi glucose là nguӗn carbon duy nhҩt thì quá trình EBPR sӁ thҩt bҥi. Tuy nhiên, dҥQJWUDRÿәi sinh hóa cho q trình EBPR vӟi JOXFRVHFNJQJÿѭӧc báo cáo và cho rҵng khi bә sung glucose sӁ có tác dөng hӛ trӧ cho sӵ әQÿӏQKTXiWUuQK(%35Ĉҫu tiên glucose sӁ ÿѭӧc chuyӇn hóa thành acid lactic bӣi vi khuҭQOrQPHQODFWLF&K~QJFyYDLWUzÿӗng hóa gluFRVHGѭӟLÿLӅu kiӋn kӷ khí và tҥo ra acid lactic và cuӕi cùng là tӗn trӳ glycogen. Mӝt sӕ giӕng có khҧ QăQJVӱ dөng amino DFLGQKѭOjQJXӗn hoҥt chҩt.
Các dҥQJWUDRÿәi chҩt sinh hóa hiӋn nay vүQFKѭDJLҧi thích hӃt các thông tin nhұn ÿѭӧc tӯ các sӵ quan siWFKRTXiWUuQK(%35QKѭVӵ ÿӗng hóa hoҥt chҩWGѭӟLÿLӅu kiӋn kӷ khí cùng vӟi sӵ thӫy phân poly-P và sӵ chuyӇn hóa glycogen tӟL3+$(%35FNJQJ có thӇ hoҥWÿӝng vӟi nguӗQFDUERQOjJOXFRVHQKѭQJNK{QJFyVӵ WtFKONJ\3+$VĈLӅu này thӇ hiӋn thiӃXFiFFѫVӣ ÿӇ giҧi thích mӝWFiFKKRjQWRjQYjÿҫ\ÿӫ vӅ q trình (%35FNJQJQKѭWKLӃu các nghiên cӭu vӅ cҩu trúc và chӭFQăQJFӫa quҫn thӇ vi khuҭn này. Có lӁ các dҥQJWUDRÿәi chҩt này chӍ có thӇ giҧi thích mӝWFiFKWKtFKÿiQJNKLQJKLrQ cӭXTXiWUuQKWUDRÿәi chҩWGѭӟLÿLӅu kiӋn ni cҩy thuҫn các dịng vi khuҭn phân lұp ÿѭӧc vӟi các dҥng khác nhau cӫD3$2VÿӇ [iFÿӏnh lҥLFiFTXiWUuQKWUDRÿәi chҩWÿѭӧc tìm thҩy trong các hӋ thӕng có sӵ WăQJFѭӡng loҥi bӓ phosphate.
2.6.3.ҦQKKѭӣQJFӫDWӍOӋJLӳDKjPOѭӧQJFDUERQYjSKRVSKDWHWUrQNKҧQăQJÿӗQJ KyDYjGӏKyDSRO\-P
Tính hӳu dөng cӫa nguӗn carbon là yӃu tӕ FѫEҧn cho quá trình EBPR bӣi vì vi khuҭQWtFKONJ\SRO\-P sӱ dөng nguӗQFDUERQÿһc biӋWQKѭDFHWDWHFKRTXiWUuQKVLQK tәng hӧp. TӍ lӋ COD (biӇu thӏ qua hàm lѭӧng carbon) và P (mg/mg) trên 40 thì thích hӧSÿӇ xӱ SKRVSKDWHKzDWDQYjTXiWUuQK(%35ÿѭӧc duy trì әQÿӏnh (Randall et al., 1992). Dҥng hӧp chҩWFDUERQFNJQJOj\Ӄu tӕ quan trӑng, tӍ lӋ các hӧp chҩt hӳXFѫPҥch ngҳQQKѭDFHWDWHSURSLRQDWHVXFFLQDWH«SKҧi chiӃm tӍ lӋ FDRWURQJKjPOѭӧng COD, hoһFKjPOѭӧng COD có thӇ dӉ dàng bӏ phân hӫy nhanh chóng thành VFAs bӣi các vi khuҭn khác. TӍ lӋ VFAs và P khoҧng 14 hoһc COD dӉ phân hӫ\Yj3OjWURQJQѭӟc
thҧLÿѭӧc xem là thành phҫQOêWѭӣng cho vi khuҭQWtFKONJ\SRO\-P hoҥWÿӝng và nhұn ÿѭӧFKjPOѭӧng thҩp phosphate hòa tan (Barnard và Abraham, 2006). Bên cҥQKÿyPӝt vài nghiên cӭu cho rҵng tӍ lӋ COD và P cao sӁ mang lҥLFiFÿLӅu kiӋn thuұn lӧi cho vi khuҭQWtFKONJ\JO\FRJHQYuYұy dүQÿӃn q trình EBPR khơng hiӋu quҧ (Liu et al., ĈӇ hҥn chӃ sӵ phát triӇn cӫD*$2V6FKXOHUYj-HQNLQVÿӅ nghӏ tӍ lӋ COD (acetate) và P khoҧng 10 sӁ hҥn chӃ sӵ giӟi hҥn vӅ nguӗn carbon và P cho quá trình hoҥt ÿӝng cӫa vi khuҭn và nhұQÿѭӧFKjPOѭӧng thҩp phosphate hòa tan sau khi xӱ lý.
Panswad et al., (2007) nghiên cӭu tӍ lӋ giӳD3Yj&2'YjÿiQKJLiKjPOѭӧng P nӝi bào trong vi khuҭQWtFKONJ\SRO\-P, cho rҵng khi tӍ lӋ giӳD3Yj&2'WăQJWӯ 0.02, YjWKuKjPOѭӧng P trong bùn hoҥt tính ӣ ÿLӅu kiӋn hiӃXNKtWăQJWӯ 0.053 tӟi 0.084 và 0.205 mg P/mg VSS).
Soejima et al., (2008) nghiên cӭu ҧQKKѭӣng cӫDKjPOѭӧng acetate trên quá trình xӱ Oêÿӗng thӡi P và N. Ӣ thӡLJLDQÿҫu cӫa q trình xӱ lý hiӃu khí, sӵ bә sung acetate (COD) sӁ QJăQFҧn quá trình hҩp thu phosphate bӣi PAOs. TӕFÿӝ hҩp thu phosphate có liên quan trӵc tiӃSÿӃn sӵ hiӋn diӋQYjKjPOѭӧng carbon ngoҥi bào. TӕFÿӝ hҩp thu phosphate giҧP ÿӝt ngӝW NKL KjP OѭӧQJ &2' GDR ÿӝng 0 ± 20 mg/l và giҧi phóng phosphate ra khӓi tӃ EjRNKLKjPOѭӧng COD FDRKѫQPJOĈLӇm cân bҵng giӳa hҩp thu và giҧLSKyQJSKRVSKDWHNKLKjPOѭӧng COD là 10 mg/l (Hình 5).
Hình 5. MӕL WѭѫQJ TXDQ JLӳa tӕF ÿӝ hҩp thu phosphate và hàm
Oѭӧng COD ngoҥi bào.
7URQJTXiWUuQKÿӗng xӱ lý P và N, sӵ bә sung nguӗn carbon nhҵm hҥn chӃ sӵ hҩp thu nhanh chóng phosphate cӫa vi khuҭQWtFKONJ\SRO\SKRVDWHWURQJP{LWUѭӡQJÿӇ cung
cҩp phosphate cho hoҥWÿӝng cӫa vi khuҭn vӯa có khҧ QăQJORҥi bӓ N và P, và vì vұy có thӇ xӱ ÿӗng thӡLFK~QJ+jPOѭӧng COD tӯ 50 ± 100 mg/l ӣ thӡLÿLӇPÿҫu cӫa quá trình hiӃu khí sӁ hҥn chӃ sӵ hҩp thu phosphate và có thӇ nhұQÿѭӧc sӵ loҥi bӓ ÿӗng thӡi P và N khi xӱ lý bҵng vi khuҭn DPAOs.
Nghiên cӭXQj\FNJQJSKKӧp vӟi You et al. (2004) khi nghiên cӭu ҧQKKѭӣng cӫa hàm COD trên khҧ QăQJKҩp thu và giҧLSKyQJSKRVSKDWHWURQJÿLӅu kiӋn hiӃu khí và thiӃu oxy cӫa vi khuҭn DPAOs và PAOs cho thҩy rҵQJNKLKjPOѭӧng COD cao chúng sӁ phóng thích phosphate ra khӓi tӃ bào.
2.6.4.ҦQKKѭӣQJS+ÿӃQ TXiWUuQKÿӗQJKyDYjGӏKyDSRO\-P và acetate
1ăQJOѭӧng cho q trình hҩp thu hoҥt chҩWÿmÿѭӧF[HPQKѭOj\Ӄu tӕ ÿLӅu hịa FѫEҧn cho quá trình hҩp thu nguӗn carbon bӣi vi khuҭn PAOs và GAOs (Liu et al., 1997; Smolders et al.,1994). Nghiên cӭu cho thҩy rҵQJWURQJÿLӅu kiӋQP{LWUѭӡng kiӅm, vi khuҭn cҫn nhiӅXQăQJOѭӧQJKѫQÿӇ hҩp thu hoҥt chҩt. Chính vì vұy, sӵ JLDWăQJ pH sӁ tҥRÿLӅu kiӋn thuұn lӧLFKR3$2VKѫQ*$2V&iFQJKLrQFӭu cho thҩy rҵQJÿLӅu kiӋn pH cao ӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫD*$2VKѫQOjҧQKKѭӣQJÿӃQTXiWUuQKWUDRÿәi chҩt cӫa PAOs. Liu et al. (1996) nghiên cӭu ҧQKKѭӣng cӫa pH lên q trình chuyӇn hóa acetate cho thҩy rҵQJNKLS+EDQÿҫXWURQJP{LWUѭӡng khoҧng 5 ± 6,5 sӵ hҩp thu acetate và phóng thích phosphate sӁ WăQJFQJYӟi sӵ JLDWăQJS+WKHRNKLS+WURQJNKRҧng 6,5 - 8 sӵ hҩp thu acetate cân bҵQJQKѭQJWӕFÿӝ giҧi phóng phosphate vүQWăQJ.KLS+ trên 8,0 thì hҩp thu acetate và giҧi phóng phosphate bҳWÿҫu giҧm. Filipe et al., (2001) chӭng minh rҵng sӵ WăQJWUѭӣng và phát triӇn cӫa PAOs, quá trình loҥi bӓ phosphate, phân hӫ\3+$VWURQJÿLӅu kiӋn hiӃu khí chӏu ҧQKKѭӣng bӣi pH. Khi pH thҩp ҧQKKѭӣng OrQTXiWUuQKWUDRÿәi chҩt cӫa PAOs, tӕFÿӝ hҩp thu phosphate chӍ khoҧng 37% ӣ pH 7,5, bên cҥQKÿyWӕFÿӝ phân hӫy PHAs và sӵ WăQJWUѭӣng cӫa PAOs giҧPÿiQJNӇ. pH giҧm xuӕng 6,5 khҧ QăQJORҥi bӓ SKRVSKDWHWURQJP{LWUѭӡng giҧPWKHR.KLS+WăQJ trên 7 sӁ khơng có ҧQKKѭӣng bҩt lӧi lên PAOs, chính vì thӃ mang lҥi sӵ әQÿӏnh trong TXiWUuQK(%357URQJÿLӅu kiӋn kӷ khí, sӵ JLDWăQJS+NK{QJҧQKKѭӣng tӟi khҧ QăQJ hҩp thu acetate cӫa tӃ bào là do PAOs có thêm nguӗQQăQJOѭӧng dӵ trӳ Gѭӟi dҥng poly- P, sӵ thӫy phân poly-P cung cҩp thêm nguӗQQăQJOѭӧng ATP cҫn thiӃt khi pH trong P{LWUѭӡQJJLDWăQJ
2.7. Các nghiên cӭu liên quan
Tӯ QăPÿӃn nay, có nhiӅu báo cáo luұQYăQWKҥFVƭSKkQOұp và nhұn diӋn vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫ ÿѭӧc nghiên cӭXYjOѭXWUӳ ӣ ViӋn Nghiên cӭu và Phát triӇn Công nghӋ Sinh hӑc ± 7UѭӡQJĈҥi hӑc CҫQ7Kѫ&yNKRҧng 278 dòng vi khuҭn chuyӇn KyDQLWѫ ÿѭӧc phân lұp tӯ các nguӗn chҩt thҧLNKiFQKDXQKѭFKҩt thҧLFKăQQX{LKHR (NguyӉn Thành Nhân, 2008); ao cá tra (Phҥm Mӻ Cҭm, 2008); ao tôm (HuǤnh Thӏ Cҭm 7~'ѭѫQJ7Kӏ %tFK7URQJÿyFyGzQJOjP. stutzeri. Các nghiên cӭu này chӫ yӃu là nhұn diӋn vi khuҭn và kiӇm tra khҧ QăQJQәi trӝi cӫa chúng khi nuôi trên môi trѭӡQJQJKqRGLQKGѭӥng vӟi sӵ hiӋn diӋn cӫa NH4+, NO3-, NO2-. 7 dòng vi khuҭn
khӱ ÿѭӧc phân lұp tӯ: NguyӉn Thành Nhân (dòng 6Rc, 7Ra), Phҥm Mӻ Cҭm (D3b,
'D'ѭѫQJ7Kӏ Bích (TN5, TN7), HuǤnh Thӏ CҭP7~97B%Eÿѭӧc xem là nhӳng dịng có khҧ QăQJWX\Ӈn chӑn ÿӇ ӭng dөng trong xӱ OêQѭӟc thҧLFKăQQX{LKHR'zQJ 6Rc và 7Ra phân lұp tӯ chҩt thҧLFKăQQX{LKHRӣ huyӋn Châu Thành ± TiӅn Giang; dịng D3b, D7a phân lұp tӯ ao ni cá tra ӣ huyӋn Cái Bè ± TiӅn Giang; dòng TN5, TN7 phân lұp tӯ ao nuôi tôm sú ӣ huyӋn KirQ/ѭѫQJ± Kiên Giang ; dòng VT_B1b phân lұp tӯ ao tôm thӏ xã Bҥc Liêu.
&+ѬѪ1*3+ѬѪ1*7,ӊN VÀ PHÁP NGHIÊN CӬU
3.1. ThӡLJLDQYjÿӏDÿLӇm
7KӡLJLDQQJKLrQFӭX
Tӯ WKiQJQăPÿӃn tháng 12 QăP
ĈӏDÿLӇPQJKLrQFӭX
Phòng Vi sinh vұWÿҩt và Vi sinh vұWP{LWUѭӡng - ViӋn Nghiên cӭu và Phát triӇn Công nghӋ sinh hӑc - 7UѭӡQJĈҥi hӑc CҫQ7Kѫ
3.2.3KѭѫQJWLӋn thí nghiӋm
3.2.1.9ұWOLӋX
1ѭӟc rӍ rác lҩy tӯ bãi rác Tân Long, huyӋn Phөng HiӋp, tӍnh Hұu GiangQѭӟc thҧi FKăQQX{LKHR lҩy tӯ trҥLFKăQQX{LKHR [mĈ{QJ7KjQKKX\Ӌn Bình Minh, tӍQK9ƭQK Long.
Vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫPseudomonas stutzeri dịng D3b và vi khuҭQWtFKONJ\
polyphosphate Bacillus subtilis dòng TGT.013L (Bӝ VѭXWұp vi khuҭn - Phịng Vi sinh vұt Mơi tUѭӡng, ViӋn Nghiên cӭu và Phát triӇn Công nghӋ sinh hӑc ± Ĉҥi hӑc CҫQ7Kѫ Giá thӇ là các sӧi polypropylene (xuҩt xӭ tӯ HӗQJ.{QJÿѭӧc kӃt nӕi vӟi nhau thành hӋ thӕng vӟi diӋn tích tiӃp xúc là 45 m2/m3 OjPWăQJEӅ mһt tiӃp xúc vӟi mơi WUѭӡQJQѭӟc.
3.2.2.'өQJFөWUDQJWKLӃWEӏ
- Bình tam giác 1 lít - Bình nhӵa 10 lít - Xơ nhӵa 120 lít
- Máy sөc khí Resun 390W (Trung Quӕc) - Máy lҳc mүX*)/Ĉӭc) - Bӝ PLFURSLSHW*LEVRQ33333Ĉӭc) - &kQÿLӋn tӱ 6DUWRULXVĈӭc) - pH kӃ Orion 420A (Mӻ) - Nӗi khӱ trùng nhiӋWѭӟW3ELQWHUQDWLRQDOĈӭF7XWWQDXHU0/9Ĉӭc) - Tӫ ӫ vi sinh vұW,QFXFHOOĈӭc)
- Tӫ cҩy vi sinh vұt Flow Cabinet 125B-81804 (Pháp) - Tӫ sҩ\(+5(7Ĉӭc)
- Máy vortex - Tӫ lҥnh trӳ mүu Hitachi (Nhұt) - Tӫ lҥnh trӳ mүu -20oC Sanyo (Nhұt Bҧn) - Mi\O\WkP(SSHQGRUIĈӭc) - 0i\ÿR2'%HNPDQ&RXOWHU'8%Ĉӭc) - 0i\YLWtQKSKkQWtFKYjOѭXWUӳ sӕ liӋu
- Mӝt sӕ dөng cө NKiFÿƭDSHWULӕng nghiӋm, que cҩy, ӕng eppendorf, bình tam giác, ÿqQFӗQÿҫu cone (xanh, vàng, trҳQJJăQJWD\EӑFQ\ORQ«
3.2.3.+yDFKҩW
- Glucose
- Acid acetic glacical - Sodium succinate - Sodium acetate - Yeast extract
- KH2PO4, K2HPO4, NaHCO3,MgSO4.7H2O, NaCl, NaNO3, NH4Cl - Agar
- Pepton
- Các hóa chҩWGQJÿRÿҥm, lân và mӝt sӕ chҩWYLOѭӧng.
3KѭѫQJSKiSQJKLrQFӭu
3KѭѫQJSKiSQX{LFҩ\YLNKXҭn
Hóa chҩWSKDP{LWUѭӡng nhân sinh khӕi vi khuҭn vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫ
P{LWUѭӡng Minimal): - Sodium succinate 8,1 g/L - KH2PO4 340 mg/L - K2HPO4 435 mg/L - 9LOѭӧng 1 mL/L - NaNO3 10 mL/L - NH4Cl 10 mL/L
- 6:Qѭӟc muӕi nhân tҥo) 100 mL/L
(SW gӗm: NaHCO3 0,11 g/L; MgSO4.7H2O 10,5 g/L, NaCl 24 g/L)
Hóa chҩWSKDP{LWUѭӡng nhân sinh khӕi vi khuҭQWtFKONJ\SRO\SKRVSKDWH, có
bә sung pepton vj\HDVWH[WUDFWYjNKRiQJYLOѭӧng:
- Sodium acetate 5 g/L - MgSO4.7H2O 0,5 g/L - NH4Cl 0,02 g/L - KNO3 0,18 g/L - KH2PO4 0,054 g/L - Pepton 0,5 g/L - Yeast extract 0,5 g/L - Dung dӏFKNKRiQJYLOѭӧng 0,5 mL/L
Dung d͓ch khoáng vi l˱ͫngbao gӗm:
- FeCl3.6H2O 1,5 g/L - H3BO3 0,15 g/L - CuSO4.5H2O 0,03 g/L - KI 0,18 g/L - MnCl2.4H2O 0,12 g/L - Na2MoO4.2H2O 0,06 g/L - ZnSO4.7H2O 0,12 g/L - CoCl2.6H2O 0,15 g/L - EDTA 10 g/L
Ph˱˯ng pháp nhân gi͙ng vi khu̱n:
¾ Ni cҩ\OjPÿӗQJÿӅu giӕng: Dùng que cҩy chuyӇn khuҭn lҥFÿmOjPUzQJWӯ
ӕng nghiӋm thҥFKQJKLrQJÿDQJÿѭӧFOѭXWUӳ trong tӫ lҥnh, cҩy ria sang ӕng nghiӋm mӟLĈӇ ӕng nghiӋm trong tӫ ҩm, nuôi ӫ ӣ 30oC trong 2 ngày.
¾ Nhân giӕng cҩp 1: +~WP/Qѭӟc cҩt vô trùng cho vào ӕng nghiӋm chӭa vi
khuҭn, lҳFÿӅu. Hút 100 PL dӏch huyӅn phù vi khuҭn cho vào bình tam giác 250 mL chӭDP/P{LWUѭӡng ni cҩy, tҥo giӕng cҩp 1.
¾ Nhân giӕng cҩp 2: ;iFÿӏnh mұt sӕ trong giӕng cҩp 1 theo thӡi gian. Ӣ thӡi
ÿLӇm mұt sӕ vi khuҭn trong giӕng cҩp 1 ӣ JLDLÿRҥn quân bình, tiӃn hành cҩy chuyӇn tiӃSVDQJP{LWUѭӡng mӟi, tҥo giӕng cҩp 2.
Các bình ni cҩy vi khuҭQÿѭӧFÿһt trên máy lҳc, lҳc 150 vòng/phút, ӣ nhiӋWÿӝ 30oC. Khi nhân giӕng vӟi khӕLOѭӧng lӟQKѫQWKuGQJWKQJOӟQÿѭӧc vӋ sinh sҥch và
dùng máy sөc khí vӟi tӕFÿӝ vӯa phҧLÿӇ thay cho máy lҳc. KiӇm tra mұt sӕ vi khuҭn ÿҥt 9 log10 cfu/mL thì sӱ dөQJÿѭӧc.
7LӃQKjQKWKtQJKLӋP
3.3.2.1 Thí nghi͏m 1: Hi͏u qu̫ ÿ˱ͥng glucose, acid actic ÿ͇n kh̫ năng tăng sinh cͯa vi khu̱n chuy͋nhóa nit˯ và tích lNJy phosphate trong n˱ͣc r͑ rác và n˱ͣc th̫i chăn nuôi heo.
- Nӝi dung thí nghiӋm: 7KHR G}LTXiWUuQKWăQJVLQKcӫa vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫ
Pseudomonas stutzeri dịng D3b và vi khuҭQWtFKONJ\SRO\SKRVSKDWHBacillus subtilis
dòng TGT.013L vӟi nguӗn carbon là glucose và acid acetic trong nѭӟc rӍ UiFYjQѭӟc thҧi chăQQX{LKHR trên mơ hình 0,5 lít.
1ѭӟc rӍ rác:
- B͙ trí thí nghi͏m:Thí nghiӋPÿѭӧc bӕ trí theo 6 nghiӋm thӭc.
Bҧng 3.1: Bӕ trí thí nghiӋm trên mơ hình 0,5 lít vӟi nguӗn carbon là glucose và acetate vӟLKjPOѭӧng vi khuҭn là 5%
NghiӋm thӭc Glucose (%) Acid acetic (%) Glucose (g/L) Acid acetate (mL/L) NT 1 0 0 0 0 NT 2 0 100 0 1 NT 3 25 75 1,25 0,75 NT 4 50 50 2,50 0,50 NT 5 75 25 3,75 0,25 NT6 100 0 5 0
1ѭӟc rӍ rác trong thí nghiӋPÿѭӧc lҩy mӝt lҫn bҵng thùng 20 lít tӯ bãi rác Tân Long (xã Tân Long, huyӋn Phөng HiӋp, tӍnh Hұu Giang). /ѭӧng Qѭӟc rӍ rác sӱ dөng FKREѭӟc chuҭn bӏ thí nghiӋm là 9 OtWÿѭӧc bӕ trí vào 18 ÿѫQYӏ thí nghiӋm (0,5 lítÿѫQ vӏ thí nghiӋm) cӫa 6 nghiӋm thӭc, mӛi nghiӋm thӭFÿѭӧc lһp lҥi 3 lҫQ&iFÿѫQYӏ thí nghiӋPÿѭӧc bӕ trí hồn tồn ngүu nhiên trong bình tam giác 1 lít. Hai dịng vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫ và WtFKONJ\SKRVSKDWH ÿѭӧFQX{LWURQJP{LWUѭӡQJWăQJVLQKWKHRG}L mұt sӕ vi khuҭQÿӃQNKLÿҥt khoҧng 109 cfu/mLthì chӫng vào các nghiӋm thӭc vӟi hàm Oѭӧng là 5% (25mL/L vi khuҭn Pseudomonas stutzeri dòng D3b + 25mL/L vi khuҭn
WtFK ONJ\ SRO\SKRVSKDWHBacillus subtilis dịng TGT.013L); bә sung nguӗn carbon:
thӭFÿӕi chӭng khơng bә sung) và lҳFÿӅu trên máy lҳc 140 vòng/phút. Ĉӏnh kǤ mӛi 24 giӡ lҩy mүXÿӇ phân tích.
;iFÿӏnh giá trӏ pH cӫa tӯng nghiӋm thӭc.
;iFÿӏnh mұt sӕ vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫYjvi khuҭn WtFKONJ\SKosphate trong tӯng nghiӋm thӭc ÿӏnh kǤ mӛi 24 giӡ.
'QJSKѭѫQJSKiSWKӕQJNrÿӇ so sánh sӵ khác biӋt giá trӏ trung bình các chӍ tiêu cӫa 6 nghiӋm thӭc.
1ѭӟc thҧLFKăQQX{LKHR
- B͙ trí thí nghi͏m:Thí nghiӋPÿѭӧc bӕ trí theo 6 nghiӋm thӭc.
Bҧng 3.2: Bӕ trí thí nghiӋm trên mơ hình 0,5 lít vӟi nguӗn carbon là glucose và acetate vӟLKjPOѭӧng vi khuҭn là 5%
NghiӋm thӭc Glucose (%) Acid acetic (%) Glucose (5g/L) Acid acetic (1mL/L) NT 1 0 0 0 0 NT 2 0 100 0 1 NT 3 25 75 1,25 0,75 NT 4 50 50 2,50 0,50 NT 5 75 25 3,75 0.25 NT6 100 0 5 0
1ѭӟc thҧLFKăQQX{LKHR trong thí nghiӋPÿѭӧc lҩy mӝt lҫn bҵng thùng 20 lít tӯ trҥLFKăQQX{LKHR [mĈ{QJ7KjQK huyӋn Bình Minh. /ѭӧng Qѭӟc thҧi sӱ dөng cho Eѭӟc chuҭn bӏ thí nghiӋPOjOtWÿѭӧc bӕ WUtYjRÿѫQYӏ thí nghiӋPOtWÿѫQYӏ thí nghiӋm) cӫa 6 nghiӋm thӭc, mӛi nghiӋm thӭFÿѭӧc lһp lҥi 3 lҫQ&iFÿѫQYӏ thí nghiӋm ÿѭӧc bӕ trí hồn tồn ngүu nhiên trong bình tam giác 1 lít. Hai dịng vi khuҭn chuyӇn KyDQLWѫ và WtFKONJ\SKRVSKDWH ÿѭӧFQX{LWURQJP{LWUѭӡng WăQJVLQKWKHRG}LPұt sӕ vi khuҭQÿӃQNKLÿҥt khoҧng 109 cfu/mLthì chӫng vào các nghiӋm thӭc vӟLKjPOѭӧng là 5% (25mL/L vi khuҭn Pseudomonas stutzeri dòng D3b + 25mL/L vi khuҭQWtFKONJ\
polyphosphate Bacillus subtilis dòng TGT.013L); bә sung nguӗn carbon: glucose 5g/L và acetate 1mL/L theo tӍ lӋ glucose/acid acetic tӯng nghiӋm thӭc (nghiӋm thӭFÿӕi chӭng không bә sung) và lҳFÿӅu trên máy lҳFYzQJSK~WĈӏnh kǤ mӛi 24 giӡ lҩy mүXÿӇ phân tích.
;iFÿӏnh mұt sӕ vi khuҭn chuyӇn khӱ ÿҥm và vi khuҭn WtFKONJ\phosphate trong tӯng nghiӋm thӭc ÿӏnh kǤ mӛi 24 giӡ.
'QJSKѭѫQJSKiSWKӕQJNrÿӇ so sánh sӵ khác biӋt giá trӏ trung bình các chӍ tiêu cӫa 6 nghiӋm thӭc.
3.3.2.2 Thí nghi͏m 2: Hi͏u qu̫ x͵ lý nit˯, phospho n˱ͣc r͑ rác và n˱ͣc th̫i chăn nuôi heo vͣi vi khu̱n chuy͋n hóa nit˯ Pseudomonas stutzeri dịng D3b, vi khu̱n tích lNJy phosphate Bacillus subtilis dịng TGT.013L, ngu͛n carbon và giá th͋ trên mơ hình bình 1 lít.
- Nӝi dung thí nghiӋm: Tӯ thí nghiӋm 1, chӑn ra 3 nghiӋm thӭc có khҧ QăQJWăQJVLQK
tӕt nhҩt cӫa vi khuҭn chuyӇQKyDQLWѫPseudomonas stutzeri dịng D3b và vi khuҭn tích
ONJ\SRO\SKRVSKDWHBacillus subtilis dịng TGT.013L. Bӕ trí thí nghiӋm vӟi 3 nghiӋm
thӭc WUrQÿӇ xӱ lý ÿҥm, lân Qѭӟc rӍ UiFYjQѭӟc thҧLFKăn ni heo sau biogas trên mơ hình bình 1 lít vӟi giá thӇ polypropylene.
1ѭӟc rӍ rác:
- B͙ trí thí nghi͏m:Thí nghiӋPÿѭӧc bӕ trí theo 3 nghiӋm thӭc ÿmFKӑn.
1ѭӟc rӍ rác trong thí nghiӋPÿѭӧc lҩy mӝt lҫn bҵng thùng 20 lít tӯ bãi rác Tân Long (xã Tân Long, huyӋn Phөng HiӋp, tӍnh Hұu Giang. /ѭӧQJQѭӟc rӍ rác sӱ dөng cho mӛi thí nghiӋm là 9 OtWÿѭӧc bӕ trí vào 9 ÿѫQYӏ thí nghiӋm (1 lítÿѫQYӏ thí nghiӋm) cӫa 3 nghiӋm thӭc, mӛi nghiӋm thӭFÿѭӧc lһp lҥi 3 lҫQ&iFÿѫQYӏ thí nghiӋPÿѭӧc bӕ trí hồn tồn ngүu nhiên trong keo nhӵa dung tích 1,5 OtWÿӇ ÿҧm bҧo quá trình sөc khí NK{QJ OjP WUjQ Qѭӟc ra khӓi keo). Hai dòng vi khuҭn chuyӇQ KyD QLWѫ và WtFK ONJ\ phosphate ÿѭӧFQX{LWURQJP{LWUѭӡQJWăQJVLQKWKHRG}LPұt sӕ vi khuҭQÿӃQNKLÿҥt khoҧng 109 cfu/mLthì chӫng vào các nghiӋm thӭc vӟLKjPOѭӧng là 5% (25mL/L vi khuҭn Pseudomonas stutzeri dòng D3b + 25mL/L vi khuҭQ WtFK ONJ\ SRO\SKRVSKDWH Bacillus subtilis dòng TGT.013L); bә sung nguӗn carbon: glucose 5g/L và acetate