Vị trí DT.05 (*) Buteaspermanol [92] δH (ppm) δC (ppm) δC (ppm) δH (ppm) 1 - - 2 5,09 (1H, d, J = 12,0 Hz) 74,6 72,9 5,14 (1H, dd, J = 11,6 Hz) 3 4,53 (1H, d, J =12,0) 85,9 84,0 4,53 (1H, dd, J = 11,6, 3,7 Hz) 4 - 194,3 192,5 - 4a - 112,1 111,0 - 5 7,31,s 108,2 107,6 7,19 (1H, s) 6 138,8 137,9 7- OCH3 3,88, s 56,6 56,2 3,80 (1H, s) 8 6,43,s 104,5 103,6 6,43 (1H, s) 8a - 159,7 157,5 - 1' - 145,5 144,3 - 2' 7,56 (1H, t, J =7,0 Hz) 128,9 128,8 7,55, m 3' 7,40-7,45, m 129,3 128,5 7,41-7,48, m 4' 7,40-7,45, m 129,8 128,3 7,41-7,48, m 5' 7,40-7,45, m 129,3 128,5 7,41-7,48, m 6' 7,56 (1H, t, J =7,0 Hz) 128,9 128,5 7,55, m (*)1H-NMR (500 MHz, methanol-d4); 13C-NMR (125 MHz, methanol-d4) 3.2.6. Hợp chất mới daltonkin A (DT.06)
Hợp chất DT.06 được phân lập dưới dạng chất rắn vơ định hình, tan tốt trong dung mơi methanol. Phổ hồng ngoại (IR) của hợp chất DT.06 xuất hiện các cực đại hấp thụ tại vị trí νmax tại 3354 và tại νmax 1701 cm-1 đặc trưng cho các dao động của nhóm hydroxyl OH và nhóm carbonyl C=O cùng các dao động của liên kết C=C (benzene) tại (νmax: 1701, 1637, 1610, 1452).
Hình 3.17. Phổ IR của hợp chất DT.06
Trên phổ tử ngoại UV của hợp chất này xuất hiện các đỉnh đặc trưng cho nối đôi liên hợp ở UV (MeOH) λmax nm (logε): 293 nm.
Hình 3.18. Phổ UV của hợp chất DT.06
Phổ khối phun bụi điện tử (HR-ESI-MS) cho pic ion giả phân tử ở m/z =
327,0868 [M – H]– (theo lý thuyết là 327,0863). Từ đó suy ra cơng thức phân tử của hợp chất DT.06 là C18H16O6.
Hình 3.19. Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS của hợp chất DT.06
Kết hợp phân tích các tín hiệu trên phổ 1H-NMR, 13C-NMR và HSQC (tương tác trực tiếp carbon với proton) cho thấy, ngồi các tín hiệu đặc trưng cho 2 vòng benzen A và B cịn xuất hiện thêm các tín hiệu của 1 carbon methylen tại δC 44,3 (C- 3), 1 tín hiệu carbon nhóm oxymethin ở vị trí δC 80,5 (C-2) và tín hiệu 1 carbon của nhóm carbonyl tại δC 197,5 (C-4) của vòng C trong phổ 13C-NMR. Điều này cho phép kết luận hợp chất này là một flavanone [93].
Khi so sánh phổ 1H và 13C-NMR của DT.06 cho thấy các tín hiệu hồn tồn
tương tương tự phổ 1H và 13C-NMR của hợp chất pinocembrin, ngoại trừ sự thay thế 1 proton thơm H-8 trong hợp chất pinocembrin bởi 1 nhóm carboxyethyl (CH2CH2COOH) (H-9 [δH 2,86, t, 8,0 Hz]/C-9 [δC 18,7], H-10 [δH 2,49, t, 8,0 Hz]/C-10 [δC 34,1] và C-11 [δC 177,7]) [85].
Hình 3.20. Phổ 1H-NMR của hợp chất DT.06
Hình 3.23. Phổ HSQC của hợp chất DT.06
Mạch nhánh carboxyethyl được chứng minh thông qua các tương quan giữa proton methylen H-9 và H-10 trong phổ COSY, cũng như các tương quan giữa proton H-9 và H-10 với carbon C-11 của nhóm carbonyl trong phổ (HMBC).
Hình 3.24. Phổ COSY của hợp chất DT.06
Phân tích kỹ trên phổ HMBC sẽ thấy các tương quan của proton H-9 với các carbon C-7, C-8 và C-8a. Điều này cho phép xác định nhóm carboxyethyl gắn vào vị trí C-8 của vịng A. Như vậy vị trí mạch nhánh đã được xác định.
Hình 3.25. Phổ HMBC của hợp chất DT.06
Các nghiên cứu trước đây cho thấy các flavanone cấu hình 2S trên phổ CD (lưỡng sắc vịng - circular dichroism) thường có hiệu ứng Cotton dương trong vùng gần 330 nm (n–*) và hiệu ứng Cotton âm ở vùng 270–290 nm.
Phổ CD (c 0,4, MeOH) của hợp chất DT.06 (hình 3.26) cho thấy có hiệu ứng Cotton dương tại 330 + 2,10 (n–*) và hiệu ứng Cotton âm tại 288 – 10,43 (–* ). Kết hợp các thông tin trên phổ CD và so sánh với tài liệu tham khảo cho phép xác định cấu hình của C-2 trong hợp chất DT.06 là 2S [84].
Hình 3.26. Phổ CD của hợp chất
DT.06
Hình 3.27. Phổ CD của hợp chất
Qua phân tích tổng hợp các dữ liệu phổ trên cho phép xác định hợp chất DT.06 là (2S)-8-carboxyethylpinocembrin, đây là một hợp chất mới lần đầu tiên phân lập từ thiên nhiên và được chúng tôi đặt tên là daltonkin A. Các phổ đầy đủ của hợp chất daltonkin A (DT.06) được trình bày ở phần phụ lục (PL-6).
Hình 3.28. Cấu trúc hóa học của hợp chất daltonkin A