KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4.2. Kết quả định lượng Cyfra21-1 trong các mẫu huyết thanh do bệnh viện Lao_Phổi trung ương cung cấp
viện Lao_Phổi trung ương cung cấp
Dựa vào đường chuẩn xây dựng được ở trên những phân tích so sánh với kết quả ELISA của mẫu kháng nguyên Cyfra 21-1 đã biết trước nồng độ, chúng tôi tiến hành định lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 trong các mẫu huyết thanh do
bệnh viện Lao_Phổi trung ương cung cấp.
Mẫu huyết thanh cần phân tích, xác định hàm lượng Cyfra 21-1 được pha loãng 100 lần bằng PBS 1X và được cố định trên các khay thử.
Kết quả được thể hiện ở hình 16 và bảng 4.
Mẫu Giá trị Cp Nồng độ DNA Nồng độ Cyfra 21-1 (ng/ml) HT1 29,72 1,11.105 83ng/ml HT2 29,61 1,24.105 92,9ng/ml HT3 29,58 1,28.105 95,9ng/ml HT4 30,97 3,07.104 22.9ng/ml HT5 _ _ _ H2O _ _ _
Bảng 4: Kết quả định lượng Cyfra 21-1 trong các mẫu phân tích
Nghiên cứu của P.P.Mumbarkkar và các cộng sự cùng một số nghiên cứu của các nhà khoa học khác cho thấy, trong các cá thể khỏe mạnh, nồng độ Cyfra 21-1 lưu thông là rất thấp (thấp hơn 3,3ng/ml). Trong khi đó, với các bệnh nhân
Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa CNSH38 Hình 16: Kết quả định lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 trong các mẫu huyết thanh do bệnh viện Lao_ Phổi TW cung cấp
được xác định là ung thư phổi ở các giai đoạn khác nhau có nồng độ Cyfra 21-1 cao hơn gấp nhiều lần. Ngoài ra, nghiên cứu của Bram Wieskopf cùng các cộng sự (1995) hay nghiên cứu của Shi-Jian Ding và các cộng sự (2004) cũng chứng minh rằng có sự liên quan chặt chẽ giữa hàm lượng Cyfra 21-1 với thời gian phát
triển và di căn của khối u.
Các mẫu huyết thanh do bệnh viện Lao_ Phổi trung ương cung cấp có mẫu HT1, HT2, HT3 đã được chẩn đoán là bị ung thư phổi, mẫu HT4 được chẩn đoán
là tràn dịch màng phổi.
Kết quả trên cũng cho thấy các mẫu đều có tín hiệu vượt ngưỡng ở chu kỳ tương đối thấp. Trong đó, mẫu HT3 có tín hiệu vượt ngưỡng sớm nhất, Cp = 29,58 với nồng độ Cyfra 21-1 tương ứng là: 95,9ng/ml. Tương tự như vậy, mẫu HT1 có tín hiệu Cp = 29,72 với nồng độ Cyfra 21-1 tương ứng là: 83ng/ml; mẫu HT2 có tín hiệu Cp =29,61 với nồng độ Cyfra 21-1 tương ứng là: 92,9ng/ml; mẫu
HT4 có tín hiệu Cp = 30,97 với nồng độ Cyfra 21-1 tương ứng là: 22,9ng/ml; mẫu HT5 và mẫu đối chứng không thấy có tín hiệu huỳnh quang.
So sánh giữa kết quả lâm sàng và kết quả Real-time PCR chúng tôi nhận thấy có sự tương đồng rõ rệt. Các mẫu HT1,HT2,HT3 sau khi chạy Real-time
PCR đều cho giá trị nồng độ Cyfra 21-1 rất cao và các mẫu này đều đã được chẩn đoán là mắc bệnh ung thư phổi. Từ đây, bước đầu chúng tôi có thể khẳng
định được việc định lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 bằng kỹ thuật Real-time PCR để chẩn đoán ung thư phổi đã cho kết quả hoàn toàn chính xác. Tuy nhiên, các mẫu huyết thanh ở trên đều cho giá trị nồng độ Cyfra 21-1 cao hơn rất nhiều so với nồng độ Cyfra 21-1 cho phép lưu thông trong máu theo nghiên cứu của P.P.Mumbarkkar (3,3ng/ml). Chính vì vậy, kết quả ở trên chỉ có ý nghĩa khẳng
định sự chính xác của phương pháp.
Riêng với mẫu HT4 có nồng độ Cyfra 21-1 thấp hơn các mẫu trên, nhưng lại cao hơn ngưỡng theo nghiên cứu của P.P.Mumbarkar (3,3ng/ml). Theo chẩn đoán lâm sàng, mẫu HT4 được chẩn đoán là tràn dịch màng phổi. Nhưng theo kết quả
chạy Real-time PCR thì mẫu HT4 có nồng độ Cyfra 21-1 = 22,9ng/ml cao hơn ngưỡng theo nghiên cứu trên (3,3ng/ml) rất nhiều lần. Do đó, bước đầu có thể khẳng định mẫu HT4 có biểu hiện của bệnh ung thư phổi. Tuy nhiên, để có thể chẩn đoán một cách chính xác thì cần phải tiến hành một số xét nghiệm cần thiết
khác để có kết quả chính xác nhất.
Tràn dịch màng phổi là một biểu hiện bệnh lý tổn thương phổi. Khi bị tràn dịch màng phổi có thể nghĩ tới ung thư màng phổi ngoài những nguyên nhân thông thường khác do vi khuẩn gây tổn thương phổi. Do vậy, có thể đưa ra đề xuất cần phải theo dõi thường xuyên hàm lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 của các bệnh nhân có hàm lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 lưu thông trong máu cao
bất thường, được chẩn đoán tổn thương phổi mà chẩn đoán hình ảnh chưa phát hiện khối u. Có thể tổn thương ban đầu ở phổi sẽ dẫn đến nguy cơ ung thư phổi
cao hơn so với những người có lá phổi khỏe mạnh.
Từ những kết quả thu được ở trên, chúng tôi nhận thấy việc ứng dụng phương pháp định lượng kháng nguyên Cyfra 21-1 bằng kỹ thuật Real-time PCR cho kết quả với độ chính xác cao, thời gian chẩn đoán ngắn. Đặc biệt hơn, chúng ta có thể chẩn đoán được những trường hợp có biểu hiện của bệnh ung thư phổi
ở giai đoạn sớm, để từ đó có thể đưa ra được một phác đồ điều trị hợp lý.