- Màng ngoài được làm mất cân bằng bằng cách thêm 2 ml PEG (30% w/
NNHybrid (con lai tứ bội)
Hybrid (con lai tứ bội)
www.themegallery.com Lục lạp Ty thể Nhân Dung hợp Thể dị nhân
Chọn lọc các thể lai soma
Dựa vào đặc điểm hình thái Môi trường chọn lọc
Phương pháp mẫn cảm dược phẩm Các đột biến khuyết dưõng
Chọn lọc bổ sung di truyền
Nhuộm mầu
FITC( fluorescein isothiocyanate)xanh RITC(Rhodamine iso thiocyanate) đỏ
www.themegallery.com
Sơ đồ chọn lọc các thể lai soma bằng cách ứng dụng sự mẫn cảm khác nhau của các protoplast thịt lá đối với actinomycin D
phương thức chọn lọc bổ sung di truyền chỉ có callus lai tái sinh cây
www.themegallery.com Phương thức dùng cho lai soma khác chi của Atropa belladonna
Lai hai tế bào soma có khả năng tự dưỡng auxin
www.themegallery.com
Tồn tại của kỹ thuật protoplast
Hạn chế ở cây ngũ cốc và hòa thảo Chưa hoàn thiện các phương pháp
Sự phân chia lần đầu của protoplast
lúa sau 4 ngày phân lập
Khi protoplasts đã tái sinh thành tế bào, chúng sẻ phân chia và tạo thành mô sẹo. Mô sẹo này tiếp tục được nuôi cấy có thể phát sinh phôi và cơ quan sau 3-4 tuần trong điều kiện nuôi cấy tốt. Các phôi hoặc cơ quan này có thể phát triển như hầu hết các phương pháp nuôi cấy khác
Protoplast tạo thành cây con trong điều
kiện nuôi cấy thích
www.themegallery.com
RMAN
Chuyển gen bằng protoplast
Hấp thụ DNA vào nhân của protoplast phân
lập
Chuyển cơ quan vào protoplast
Chuyển gen để biểu hiện các protein tái tổ
Chọn lọc biến dị soma bằng maker phân tử
AFLP
Simple sequence repeat (SSR)
Cleaved amplifiedpoly morphicsequence
(CAPS)
Restriction fragment length
www.themegallery.com