NNHybrid (con lai tứ bội)

- Màng ngoài được làm mất cân bằng bằng cách thêm 2 ml PEG (30% w/

NNHybrid (con lai tứ bội)

Hybrid (con lai tứ bội)

www.themegallery.com Lục lạp Ty thể Nhân Dung hợp Thể dị nhân

Chọn lọc các thể lai soma

 Dựa vào đặc điểm hình thái  Môi trường chọn lọc

Phương pháp mẫn cảm dược phẩm Các đột biến khuyết dưõng

Chọn lọc bổ sung di truyền

 Nhuộm mầu

FITC( fluorescein isothiocyanate)xanh RITC(Rhodamine iso thiocyanate) đỏ

www.themegallery.com

Sơ đồ chọn lọc các thể lai soma bằng cách ứng dụng sự mẫn cảm khác nhau của các protoplast thịt lá đối với actinomycin D

phương thức chọn lọc bổ sung di truyền chỉ có callus lai tái sinh cây

www.themegallery.com Phương thức dùng cho lai soma khác chi của Atropa belladonna

Lai hai tế bào soma có khả năng tự dưỡng auxin

www.themegallery.com

Tồn tại của kỹ thuật protoplast

 Hạn chế ở cây ngũ cốc và hòa thảo  Chưa hoàn thiện các phương pháp

Sự phân chia lần đầu của protoplast

lúa sau 4 ngày phân lập

Khi protoplasts đã tái sinh thành tế bào, chúng sẻ phân chia và tạo thành mô sẹo. Mô sẹo này tiếp tục được nuôi cấy có thể phát sinh phôi và cơ quan sau 3-4 tuần trong điều kiện nuôi cấy tốt. Các phôi hoặc cơ quan này có thể phát triển như hầu hết các phương pháp nuôi cấy khác

Protoplast tạo thành cây con trong điều

kiện nuôi cấy thích

www.themegallery.com

RMAN

Chuyển gen bằng protoplast

 Hấp thụ DNA vào nhân của protoplast phân

lập

 Chuyển cơ quan vào protoplast (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

 Chuyển gen để biểu hiện các protein tái tổ

Chọn lọc biến dị soma bằng maker phân tử

 AFLP

 Simple sequence repeat (SSR)

 Cleaved amplifiedpoly morphicsequence

(CAPS)

 Restriction fragment length

www.themegallery.com