Kết quả docking của 9 hợp chất triterpenoid (L1, L2, L5, L7, L9, L11, M3, M4 và M7) với protein wMUS81 được trình bày trong bảng 3-22. Theo thuật tốn của AutoDock4, giá trị năng lượng tự do liên kết càng âm nhiều có nghĩa ái lực liên kết giữa phối tử và protein đích càng mạnh. Từ bảng số liệu cho thấy chất chuẩn Mitoxantrone có điểm năng lượng liên kết với wMUS81 là -9,81 kcal/mol, do đó có thể coi đây là giá trị chuẩn để so sánh, các hợp chất có điểm năng lượng tự do liên kết gần bằng hoặc âm nhiều hơn giá trị này có thể được giả thuyết là tiềm năng liên kết tốt với wMUS81.
Bảng 3-3-22. Thứ tự năng lượng liên kết của các hợp chất với protein wMUS81 (2MC3) Ký hiệu Năng lượng liên kết Gpred (kcal/mol) Ký hiệu Năng lượng liên kết Gpred (kcal/mol) L1
(Betulinic acid methyl ester) -7,12 L11 3-Hydroxyprotosta- 17(20), 24-dien-21-oic acid -7,92 L2 (Stigmasterol) -4,88 M3 (Bentulonic acid) -9,54
L5 (3β-O-Trans- caffeoylbetulinic acid) -9,13 M4 (Simiarenol) -6,31 L7 (β-Amyrin) -8,24 M7 (β-Taraxerol) -4,39 L9
(Betulinic acid) -7,84 Mitoxantrone -9,81
Kết quả từ bảng 3-22 cho thấy các hợp chất M3 và L5 được xác định có tiềm năng liên kết với wMUS81 với giá trị năng lượng liên kết lần lượt là -9,54 và -9,13 kcal/mol.
Bảng 3-12 và 3-21 trình bày kết quả thử nghiệm độc tính tế bào IC50 đã được xác định trong các công bố trước đây của các hợp chất nghiên cứu trên một số dòng tế bào ung thư với thời gian ủ 48 tiếng.
Trên cơ sở so sánh giữa năng lượng liên kết phối tử - protein và giá trị IC50 thực nghiệm, bước đầu nhận thấy có sự tương quan cao giữa mơ phỏng tính tốn và thực nghiệm, 2 hợp chất thể hiện hoạt tính độc tế bào ở mức khá đồng thời cho kết quả ái lực liên kết tốt với protein đích wMUS81 gồm M3 và L5. Tiến hành phân tích tương tác tạo thành của 2 hợp chất tiềm năng với đích tác dụng, kết quả được trình bày trong hình 3-62.
(A) (B)
L5
Mitoxantrone
Hình 3-62. Mơ phỏng tương tác của các phối tử với các amino acid trong vùng hoạt động của protein MUS81.
(A) Cấu hình tương tác 2D-pharmacophore; (B) Cấu hình tương tác 3D- pharmacophore
Phân tích tương tác trong hình 3-62 cho thấy, đa số các amino acid quan trọng cấu thành nên vùng hoạt động của wMUS81 (Leu62, His63, Asn65, Asn 68, Arg69) có tham gia tạo liên kết với chất ức chế chuẩn Mitoxantrone. Kết quả mô phỏng tương tác đã chỉ ra trong số các hợp chất thể hiện hoạt tính kháng u, có hai hợp chất M3 và L5 thể hiện ái lực liên kết mạnh với wMUS81 kèm theo là các tương tác tạo thành với những amino acid quan trọng trong vùng hoạt động của đích protein này. Qua đó có thể nhận định bước đầu rằng hai hoạt chất này thể hiện hoạt tính kháng u thơng qua cơ chế bất hoạt đích sinh học là protein wMUS81.
Hợp chất M3 được quan sát tạo 2 liên kết hydro với Arg59 và His63, bên cạnh đó, liên kết giữa phối tử và protein được củng cố bền vững thêm thông qua các liên kết không cực với Arg69 và Ala74. Hợp chất L5 hình thành 3 liên kết hydro với các amino acid Asn65, Val67, Arg69. Các liên kết yếu tạo thành với Leu62 và His63 cũng góp phần tăng cường ái lực liên kết của hợp chất với đích protein nghiên cứu.
Kết quả này là cơ sở khởi đầu, định hướng cho các nghiên cứu sâu hơn về các chất ức chế protein wMUS81 bằng các mơ hình thực nghiệm in vitro và in vivo.
KẾT LUẬN
Sau một thời gian nghiên cứu và thực hiện đề tài, chúng tôi đã đạt được những kết quả nghiên cứu chính sau đây:
1. Về thành phần hóa học:
- Cây An xoa: Đã phân lập và xác định cấu trúc hóa học của 14 hợp chất, trong đó có 9 hợp chất từ rễ (L1÷L9), 5 hợp chất từ thân lá (L10-L14) cây An xoa. Đó là methyl betulinate (L1), stigmasterol (L2), 3β-benzoylbetulinic acid (L3), methyl 3,4- dihydroxybenzoate (L4), 3β-O-trans-caffeoylbetulinic acid (L5), p-hydroxybenzoic acid (L6), β-amyrin (L7), 3,5-dimethoxy gallic acid (L8) và betulinic acid (L9), icosanoic acid (L10), 3β-hydroprotosta-17(20),24-dien-21-oic acid (L11), 5,7- dihydroxy-4’-methoxy-flavone-8-yl O-β-D-glucopyranoside (L12), methyl caffeate (L13), 5,8-dihydroxy-4’,7-dimethoxy-flavone (L14). Trong đó, hợp chất 3β- benzoylbetulinic acid (L3) là chất mới.
- Cây Màng kiêng: Lần đầu tiên phân lập và xác định cấu trúc hóa học của 8
hợp chất. Đó là β-sitosterol (M1), icosanoic acid (M2), bentulonic acid (M3),
simiarenol (M4), stigmasterol (M5), stigmasterol glucoside (M6), β-taraxerol (M7), 2- methoxy benzoic acid (M8). Trong đó, cấu trúc của M4 và M7 còn được xác định bằng X-ray đơn tinh thể.
2. Về hoạt tính sinh học
Đã tiến hành thử hoạt tính chống oxi hóa, hoạt tính kháng vi sinh vật. Một số hợp chất phân lập được tiến hành thử khả năng gây độc tế bào trên các dòng ung thư. Các kết quả thu được cho thấy:
- Cao phân đoạn EtOAc của mẫu thân - lá và rễ có hoạt tính chống oxi hóa mạnh nhất với IC50 tương ứng lần lượt là 0,112 và 0,117 mg/ml.
- Kết quả thử nghiệm khả năng ức chế dịng tế bào ung thư biểu mơ KB cho thấy: 4 cao chiết từ cây An Xoa (TLE, RH, RE, RB) và 4 cao chiết (PH, PD, PE và PB) từ cây Màng kiêng có hoạt tính (IC50 dao động từ 7,4 đến 182,51 μg/ml). Trong đó, cao chiết EtOAc ở cả rễ cây An xoa và cây Màng kiêng có khả năng gây độc tế bào ung thư dòng KB mạnh nhất với IC50 lần lượt là 3,23 µg/ml và 7,6 µg/ml.
- Cao chiết butanol của mẫu thân - lá và rễ cây An xoa có khả năng ức chế mạnh L. fermentum với IC50 lần lượt là 2,95 và 1,55 µg/ml.
- Kết quả thử nghiệm hoạt tính gây độc các dịng tế bào ung thư SK-Lu-1, Hep- G2, Hela, SK-Mel-2, AGS của 13 chất phân lập được cho thấy 6 chất từ cây An xoa (L1, L5, L9, L10, L11, L14) và hai hợp chất từ cây Màng kiêng (M3, M4) có hoạt tính.
3. Kết quả docking phân tử
Kết quả mô phỏng tương tác đã chỉ ra trong số các hợp chất thể hiện hoạt tính kháng tế bào ung thư, có hai hợp chất M3 và L5 thể hiện ái lực liên kết mạnh với wMUS81 kèm theo là các tương tác tạo thành với những amino acid quan trọng trong vùng hoạt động của đích protein này. Qua đó có thể nhận định bước đầu rằng hai hoạt chất này thể hiện hoạt tính gây độc tế bào ung thư thông qua cơ chế bất hoạt đích sinh học là protein wMUS81.
DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN
1. Pham Huu Dien, Phong Thị Thanh Huyen, Le Thi Khanh Linh, Dang Ngoc Quang. Cytotoxic constituents from aerial parts of Helicteres hirsuta plant, collected in Binh phuoc province, Journal of Science, Hue University, 127, 111-117, 2018.
2. Diem Thi Thuy Dung, Trinh Huyen Trang, Le Thi Khanh Linh, Dao Van Tan, Le Thi Phuong Hoa. Second metabolites and antioxidant, antimicrobial, anticancer activities of
Helicteres hirsuta root extract. Academia Journal of Biology, 40, 45–51, 2018.
3. Dang Ngoc Quang, Nguyen Thanh Chung, Le Thi Khanh Linh, Ta Ngoc Quynh, Dang Kim Ngoc, Hoang Thi Nhung, Pham Huu Dien. Cytotoxic constituents from Helicteres
hirsuta collected in Vietnam, Natural Product Research, 34, 585-589, 2020 (SCIE).
4. Le Thi Khanh Linh, Thongphet Chansounom, Nguyen Quang Tuyen, Dang Ngoc
Quang. Chemical constituents of the dichloromethane fraction of Pterospermum
truncatolobatum collected in Lang Son province. HNUE Journal of Science, Natural
Sciences, 66, 127-133, 2021.
5. Le Thi Khanh Linh, Nguyen Thu Uyen, Pham Huu Dien, Dang Ngoc Quang.
Cytotoxic constituents from Vietnamese Pterospermum truncatolobatum. Indian Journal of Natural Products and Resources, 13(1), 32-35, 2022 (Scopus).
6.Le Thi Khanh Linh, Pham Quoc Long, Pham Thi Hong Minh, Le Thi Phuong Hoa,
Pham Minh Quan, Dang Ngoc Quang. Potential wMUS81 inhibitory activity of triterpenoids isolated from Helicteres hirsuta and Pterospermum truncatolobatum revealed by molecular docking simulation. Vietnam Journal of Chemistry, 2022 (Scopus) (submitted).
TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] Zhang X. C., Gilbert M. G. (2013), Flora of China 12, The USA, pp. 305-310 [2] Backer C. A., R. C. Bakhuizen vanden brink (1963), Flora of Java, vol. 1,
Netherlands, pp. 401-418.
[3] Pengklai C. (2001), Flora of Thailand, vol. 7, BangKok, pp. 539-574. [4] Feng K. M. (1984), Flora yunanica 2, pp. 160-165.
[5] Vo V. C. (2012), Từ điển cây thuốc Việt Nam 2, NXB Y học, pp. 1010-1013. [6] Pham T. N. (2018), Nghiên cứu phân loại các chi thuộc họ Trôm (Sterculiaceae
Vent.) ở Việt Nam, Luận văn thạc sĩ.
[7] Ahmat N., Al Muqarrabun L.M.R. (2015), "Medicinal uses, phytochemistry and pharmacology of family Sterculiaceae: A review" European Journal of
Medicinal Chemistry, vol. 1, pp. 514-530.
[8] Hadacek F., Greger H. (2000), "Test of antifungal natural products: methodolagies, comparability of result and assay choise" Phytochemical
Analysis, vol. 11, no. 3, pp. 137-147.
[9] Shukla Y.N., Bhakuni R.S., Thakur R.S. (1987), "Cyclopeptide alkaloids from
Melochia corchorifolia" Phytochemistry, vol. 26, pp. 324-325.
[10] Vieira E.R., Hoelzel S.C.S.M., Giacomelli S.R., Dalcol I.I., Zanatta N., Morel A.F. (2005), "An unusual quinolinone alkaloid from Waltheria douradinha"
Phytochemistry, vol. 66, pp. 1163-1167.
[11] Dias G.C., Gressler V., Hoenzel S.C., Silva U.F., Dalcol II., Morel AF. (2007), "Constituents of the roots of Melochia chamaedrys" Phytochemistry, vol. 68, pp. 668-672.
[12] Gressler V., Stüker C.Z., Dias Gde O., Dalcol II., Burrow R.A., Schmidt J., Wessjohann L., Morel A.F. (2008), "Quinolone alkaloids from Waltheria
douradinha" Phytochemistry, vol. 69, pp. 994-999.
[13] Shukla Y.N., Kapadia G.J., Basak S.P. (1978), "Melovinone, an open chain analogue of melochinone from Melochia tomentosa" Phytochemistry, vol. 17, pp. 1444-1445.
tissue cultures of Theobroma cacao" Phytochemistry, vol. 16, pp. 1377-1380. [15] Vardamides J.C., Azebaze A.G., Nkengfack A.E., Van Heerden F.R., Fomum
Z.T., Ngando T.M., Conrad J., Vogler B., Kraus W. (2003), "Scaphopetalone and scaphopetalumate, a lignan and a triterpene ester from Scaphopetalum
thonneri" Phytochemistry, vol. 62, pp. 647-650.
[16] Teles Y.C., Horta C.C., Agra Mde F., Siheri W., Boyd M., Igoli J.O., Gray A.I., de Souza Mde F. (2015), "New Sulphated Flavonoids from Wissadula
periplocifolia (L.) C. Presl (Malvaceae)" Molecules, vol. 20, no. 11, pp. 20161-
20172.
[17] Tripathi S.K., Biswal B.K. (2018), "Pterospermum acerifolium (L.) wild bark extract induces anticarcinogenic effect in human cancer cells through mitochondrial-mediated ROS generation" Mol. Biol. Rep., vol. 45, no. 6, pp. 2283-2294.
[18] Fernandes D.A., Souza M.S.R., Teles Y.C.F., Oliveira L.H.G., Lima J.B., Conceiỗóo A.S., Nunes F.C., Silva T.M.S., Souza M.F.V. (2018) "New Sulphated Flavonoids and Larvicidal Activity of Helicteres velutina K. Schum (Sterculiaceae)" Molecules, vol. 23, no. 11, pp. 2784.
[19] Chen C.M., Chen Z.T., Hong Y.L. (1990), "Constituents of Formosan antitumor folk medicine. Part 3. A mansonone from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol. 29, pp. 980-982.
[20] Blois M.S. (1958), “Antioxidant determination by the use of a stable free radical”, Nature, 181, pp. 1199 - 1200.
[21] Vo V. C. (1999), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, pp. 1230-1232. [22] Dang V.S., Dang M.Q., Hoang N.S. (2020), "Helicteres binhthuanensis
V.S.Dang (Malvaceae, Helicteroideae), a new species from southern Vietnam"
PhytoKeys, vol. 166, pp. 87–95.
[23] Wang M., Liu W. (1987), "A naphthoquinone from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol. 26, pp. 578-579.
[24] Chen Z.T., Lee S.W., Chen C.M. (1994), "New flavonoid glycosides of
[25] Chen W.L., Tang W.D. et al. (2006), "Pregnane, coumarin and lupan derivatives and cytotoxic constituent from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol. 67, no. 10, pp. 1041-1047.
[26] Chen W., Tang W., Lou L., Zhao W. (2006), "Pregnane, coumarin and lupane derivativesand cytotoxic constituents from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, pp. 1041-1047.
[27] Pan M.H., Chen C.M. (2008), "Cytotoxic triterpenoids from the roots bark of
Helicteres angustifolia" Chemistry and Biodiversity, vol. 5, pp. 565-574.
[28] Wang G.C., Li T., Wei Y.R., Zhang Y.B., Li Y.L., Sze S.C., Ye W.C. (2012), "Two pregnane derivatives and a quinolone alkaloid from
Helicteres angustifolia" Fitoterapia, vol. 83, pp. 1643-1647.
[29] Huang Q., Huang R., Wei L., Chen Y., Lv S., Liang C., Zhang X., Yin F., Li H., Zhuo L., Lin X. (2013), "Antiviral activity of methyl helicterate isolated from
Helicteres angustifolia (Sterculiaceae) against hepatitis B virus" Antiviral Res, vol. 100, pp. 373-381.
[30] Yin X., Lu Y., Cheng Z.H., Chen D.F., (2016), "Anti-Complementary components of Helicteres angustifolia" Molecules, vol. 21, no. 11, p. 1506. [31] Bean M.F., Antoun M. Abramson D., Chang C.J. (1985), "Cucurbitacin B and
isocucurbitacin B: cytotoxic components of Helicteres isora" J. Nat. Prod, vol. 48, p. 500.
[32] Ramesh P., Yavarajan C.R. (1995), "A new flavone methyl ether from
Hecliteres isora" J. Nat. Prod., vol. 58, pp. 1242-1243.
[33] Satake T., Kamiya K., Saiki Y. (1999), "Studies on Jamu and the medicinal resources in Indonesia. Part 2. Studies on the constituents of fruits of Helicteres
isora L." Chem. Pharm. Bull., vol. 44, pp. 1444- 1447.
[34] Tezuka Y., Terazono M., Kusumoto T.I. (1999), "Helisterculins A and B, two new (7.5’,8.2’)-neolignans, and helisorin, the first (6.4’, 7.5’,8.2’)-neolignan, from the Indonesian medicinal plant Helicteres isora" Helv.Chim. Acta, vol. 8, pp. 408-417.
[35] Tezuka Y., Terazono M., Kusumoto T.I. (2000), "Helicterins A-F, six new dimeric (7.5’, 8.2’)-neolignans from the Indonesian medicinal plant Helicteres
isora" Helv.Chim. Acta, vol. 83, pp. 2908-2919.
[36] Kamiya K., Saiki Y., Hama T.(2001), "Flavoinoid glucuronides from Helicteres
isora" Phytochemistry, vol. 57, pp. 297-301.
[37] Vennila S., Bupesh G., Saravanamurali K., SenthilKumar V., SenthilRaja R., Saran N., Magesh S. (2014), "Insilico docking study of compounds elucidated from Helicteres isora fruits with ampkinase- insulin receptor" Bioinformation, vol. 10, no. 5, pp. 263-266.
[38] Truong B. N. (2012), Nghiên cứu thành phần hố học của một số lồi thực vật
có hoạt tính chống lao của vườn quốc gia Cúc Phương, Luận án tiến sĩ hóa học.
[39] Luu H. T., Nguyen H. C., Tran H. D., Trinh T. M. D., Pham T. C., Tran T.H. Hanh, Tran H. Q., Nguyen H.D., Nguyen X. C., Nguyen H. N., Chau V. M. (2021), "Sulphated flavones and pregnane-type steroids from Helicteres
viscida" Natural Product Research, vol. 35, no. 20, pp. 3390-3395.
[40] Li K., Yu Y., Sun S., Liu Y., Garg S., Kaul S.C., Lei Z., Gao R., Wadhwa R., Zhang Z. (2016), "Functional characterization of anticancer activity in the aqueous extract of Helicteres angustifolia L. roots" PloS ONE, vol. 11, no. 3, p. e0152017.
[41] Varghese E, Sathia Narayanan S, Gopal RV, Nair A, Chittethu AB, Anson TA. (2011), "Anticancer activity of chloroform extract of Helicteres isora" Int.J. of
Pharm.& Tech., vol. 3, no. 2, pp. 2560-2564 .
[42] Basniwal P.K. et al. (2009), "In-vitro antioxidant activity of hot aqueous extract of Helicteres isora Linn. Fruits" Nat. Prod. Radiance, vol. 8, no. 5, p. 483 – 487.
[43] Tran V. T., Vo T. M. H. (2017), “Nghiên cứu khả năng kháng khuẩn và hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết cây an xoa (Helicteres hirsuta Lour.)” Tuyển tập
hội nghị khoa học toàn quốc về sinh thái và tài nguyên sinh vật lần thứ 7,
pp. 1496-1501.
[44] Le T. H. Yen; Nguyen T.N.; Nguyen T.Q.; Pham T. H. N.; Luu T.B. N. (2016),
Sơ bộ nghiên cứu thành phần hóa học và tác dụng ức chế một số dòng tế bào ung thư của cây an xoa (Helicteres hirsuta Loureiro), Báo cáo đề tài NCKH
[45] Le T.H. Y., Nguyen T. T. H., Nguyen T.N., Ta V. B., Thai T. H. Oanh (2017), “Nghiên cứu tác dụng chống viêm, giảm đau của cao lỏng chiết từ cây an xoa (Helicteres hirsuta Lour.) trên chuột nhắt thực nghiệm” Tạp chí Dược học, tập 496, pp. 56-59.
[46] Chin Y.M., Jones W.P., Rachman (2006), "Cytotoxic lignans from the stems of
Helicteres hirsuta collected in Indonesia" Phytotherapy Research, vol. 20, pp.
62-65.
[47] Nguyen H. D., Le T. P. (2016), “Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào HepG2 của cây an xoa (Helicteres hirsuta L.)” Tạp chí Khoa học
Trường Đại học Cần Thơ, tập 47, pp. 93-97.
[48] Nguyen T.T., Kretschmer N., Pferschy-Wenzig E.M., Kunert O., Bauer R. (2019) “Triterpenoidal and Phenolic Compounds Isolated from the Aerial Parts of Helicteres hirsuta and their Cytotoxicity on Several Cancer Cell Lines”,
Natural Product Communications, vol.14, no.1, pp.7-10.
[49] Hoang D. T., Truong T. T. H., Nguyen T.T. H., T. M. D., Do T. T., Nguyen P. K. N., Le C. V. C., Hoang L. T. A. (2020) “Phenolic and flavonoid compounds isolated from ethyl acetate fraction of Helicteres hirsuta Lour. collected in Thua Thien Hue”, Tạp chí Y-dược học quân sự, Tập 8, Trang 122-128.
[50] Tran T. K. M. (2019) Phân tích cấu trúc một số hợp chất trong cây An xoa
(Helicteres hirsuta L.) ở Việt Nam bằng các phương pháp hóa lý hiện đại. Luận
văn thạc sĩ hóa học
[51] Le D. K., Hoang M. H. (2020) “Triterpenoids isolated from Helicteres hirsuta”,
Journal of Technical Education Science, vol.56, pp.12-16
[52] Huynh L. N. T., Phan H. X., L. V. T. (2021) “Hoạt tính bảo vệ gan của các hợp chất phân lập từ cây an xoa (helicteres hirsuta) thu hái ở Gia Lai”, Tạp chí
Khoa Học và Cơng Nghệ, Trường Đại học Khoa học, ĐH Huế, Tập 18, số 2,
trang 65- 74.
[53] Le N.T., Van H.T., Nguyen N.T.P, Le V.S., Chu V.H., Vu T.H.A., Nguyen Q.H., Nguyen H.D., Trinh N.N., Pham V.T (2021) “Chemical profiles and
antibacterial, antioxidant, cytotoxicactivities of acetone extract from leaves of
[54] Dixit P., Khan M.P., Swarnkar G., Chattopadhyay N., and Maurya R. (2011), "Osteogenic constituents from Pterospermum acerifolium Willd. flowers"
Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, vol. 21, no. 15, p. 4617–4621.
[55] Nahar N., Khan M. S. H., Mosihuzzaman M., Rashid M. A. (2015), "Neolignan and megastigmane glycosides from the leaves of Pterospermum semisagittatum" Original articles, vol. 60, p. 72–74.
[56] Li H., Huang G., Liu B., Liu Y., Zhan R., Chen (2014), "A new naphthol from the twigs and leaves of Pterospermum yunnanense" Nat. Prod. Res, vol. 28, no. 19, pp. 1539-1543.
[57] Li S., Shi Y., Shang X.Y., Cui B.S., Yuan Y., Chen X.G., Yang Y.C., Shi J.G., (2009), "Triterpenoids from the roots of Pterospermum heterophyllum Hanc"
Journal of Asian Natural Products Research, vol. 11, no. 7, pp. 652-657.
[58] Yang L., Liu R., Fan A., Zhao J., Zhang Y., He J. (2020), "Chemical Composition of Pterospermum heterophyllum Root and its Anti-Arthritis Effect on Adjuvant-Induced Arthritis in Rats via Modulation of Inflammatory
Responses" Front. Pharmacol, vol 11, pp.1-13
[59] Chopra R. N., Nayar S. L., Chopra I. C. (1956), Glossary of Indian Medicinal Plants, New Delhi, India: Council of Scientific & Industrial Research
[60] Dixit P., Chand K., Khan M.P., Siddiqui J.A., Tewari D., Ngueguim F.T., Chattopadhyay N., Maurya R. (2012), "Phytoceramides and acylated phytosterol glucosides from Pterospermum acerifolium Willd. seed coat and their osteogenic activity" Phytochemistry, vol. 81, pp. 117-125.
[61] Li H., Huang G., Liu B., Liu Y., Zhan R., Chen Y. (2014) "A new naphthol from the twigs and leaves of Pterospermum yunnanense" Natural Product
Research: Formerly, pp. 1539-1543.
[62] Basnet B. K., Siwakoti M. (2018), "Pterospermum truncatolobatum Gagnepain (Sterculaceae): A new addition to the flora of Nepal" Banko Janakari, vol. 28, no. 1, pp. 48-49.
[63] Paul T. K. (2013), "Pterospermum truncatolobatum Gagnepain [Sterculiaceae] – an addition to the floral of Myanmar" Pleione, vol. 7, no. 2, pp. 571-573.
[64] Lopez-Vallejo F. et al. (2011), "Integrating virtual screening and combinatorial chemistry for accelerated drug discovery", Comb Chem High Throughput
Screen. Vol.14, no.6, pp. 475-87.
[65] Kitchen D. B. et al. (2004), "Docking and scoring in virtual screening for drug discovery: methods and applications", Nat Rev Drug Discov, vol.3, no.11, pp. 935-49
[66] Kikuchi K. et al. (2013) “Structure-specific endonucleases Xpf and Mus81 play overlapping but essential roles in DNA repair by homologous recombination”