2.3.1.4. Phương pháp nghiên cứu theo mơ hình ngoại sinh:
Mơ hình gây rối loạn chuyển hóa lipid máu ngoại sinh: Áp dụng mơ hình của Nassiri và cộng sự có điều chỉnh hàm lượng acid cholic và PTU theo nghiên cứu của Nguyễn Trọng Thông và cs [88].[89]:
Chuẩn bị hỗn hợp dầu cholesterol: mỗi lần cân 50g cholesterol. Đun nóng cách thuỷ 200ml dầu lạc, cho cholesterol vào, khuấy đều cho tan hết, để nguội, cho thêm 5g acid cholic và 2,5g propylthiouracil, cuối cùng cho thêm dầu lạc vừa đủ 500ml. Trong 1ml hỗn hợp dầu cholesterol chứa: 0,1g cholesterol; 0,01g acid cholic và 0,005g propylthiouracil.
Chuột cống được chia thành 5 lô, mỗi lô 10 con, các lô được uống thuốc trong 4 tuần như sau:
- Lô 1 (lô chứng sinh học): hàng ngày chuột chỉ uống nước cất với cùng thể tích nhóm uống thuốc.
- Lơ 2 (lơ mơ hình): hàng ngày chuột được uống hỗn hợp dầu cholesterol 1ml/100g chuột, sau đó 2 giờ cho uống nước cất 1ml/100g chuột.
- Lô 3 (lô uống Atorvastatin): hàng ngày chuột được uống hỗn hợp dầu cholesterol 1ml/100g chuột, sau đó 2 giờ uống Atorvastatin liều 10 mg/kg.
- Lô 4 (lô trị 1): hàng ngày chuột được uống hỗn hợp dầu cholesterol 1ml/100g chuột, sau đó 2 giờ uống “Hạ mỡ NK” liều 0,25g /kg/ngày (tương đương
liều lâm sàng trên người, tính theo hệ số 6):
N7 N8
Uống nước cất hoặc thuốc thử “Hạ mỡ NK” Tiêm màng bụng P- 407/NaCl 0,9% Định lượng TC, TG, LDL-C, HDL-C N1
- Lô 5 (lô trị 2): hàng ngày chuột được uống hỗn hợp dầu cholesterol 1ml/100g chuột, sau đó 2 giờ uống “Hạ mỡ NK” liều 0,75g /kg/ngày (liều gấp 3 liều lâm sàng).
Tiến hành cân kiểm tra trọng lượng chuột ở tất cả các lô tại thời điểm trước và sau 2 tuần, 4 tuần của thí nghiệm. Vào ngày đầu tiên, ngày thứ 15 (sau 2 tuần) và ngày thứ 29 (sau 4 tuần) của thí nghiệm, chuột trong các lô cho nhịn ăn qua đêm. Lấy máu đuôi của chuột và tiến hành định lượng TC, TG, HDL-C. LDL-C được tính theo cơng thức Friedewald: LDL-C = TC – (HDL-C) – (TG/2,2) (mmol/L) [13].
Nước+ nước Lô 1( n= 10)
0 2 4 Tuần Dầu cholesterol+ nước
Lô 2( n= 10)
0 2 4 Tuần Dầu cholesterol+ Atorvastatin Lô 3( n= 10) 0 2 4 Tuần Dầu cholesterol+ Hạ mỡ NK 0,25g/kg Lô 4( n= 10) 0 2 4 Tuần Dầu cholesterol+Hạ mỡ NK 0,75g/kg Lô 5( n= 10) 0 2 4 Tuần Chú thích: : lấy máu