IV. LÀM TIÊU BẢN CỐ ĐỊNH
3. Các bước tiến hành
- Làm tiêu bản
Dùng que cấy lấy nước vô trùng để làm 3 vết bôi trên lame (hai đầu và giữa lame).
Dùng que cấy lấy một chút sinh khối làm vết bôi theo thứ tự sau:
Bên trái lame là B.subtilis
Bên phải lame là E.Coli
Ở giữa lame là B.subtilis trộn lẫn vớiE.Coli
Để khô vết bôi trong không khí hoặc cố định nhẹ trên đèn cồn. - Nhuộm tiêu bản:
Đặt 3 miếng giấy lọc lên 3 vết bôi
Nhuộm tiêu bản bằng thuốc nhuộm tím kết tinh qua giấy lọc trong 1 phút.
Nhuộm lugol trong 1 phút
Rửa nước
Tẩy cồn trong 30 giây, để nghiêng tiêu bản, nhỏ từ từtừng giọt cồn cho đến khi tan hết màu
Rửa nước
Nhuộm bổ sung Fuchsin hoặc safranin từ 10 – 30 giây Rửa nước
Làm khô và soi tiêu bản với vật kính dầu - Kết quả:
Vết bôi trộnB.subtilis + E.Coli có màu hồng lẫn màu tím Vết bôi củaE.Coli màu hồng - gram âm
Hình 14: Các bước nhuộm gram
Hình 15: Kết quả sau khi nhuộm gram
CÂU HỎI VÀ BÀI TẬP
1) Thựchành làm tiêu bản giọt ép đối với vi khuẩn E.Coli. Vẽ hình và chú thích các đặc điểm quan sát được.
3) Làm tiêu bản nhuộm màu A.niger. Vẽ hình và chú thích các cơ quan mang bào tử của chúng
4) Trình bày nguyên tắc và ý nghĩa của việc nhuộm kép. 5) Nêu tên các loại thuốc nhuộm sử dụng trong nhuộm gram 6) Trình bày của nguyên tắc nhuộm gram
