Dựa theo các yêu cầu kỹ thuật của GPM WHO, PIC/S, EU [9],[20],[21] và cơ sở vật chất hiện trạng của nhà máy, quy trình vệ sinh được đề nghị như sau:
Nguyên tắc dọn quang, vệ sinh
Hai sản phẩm khác nhau có cùng hoạt chất
Hai sản phẩm khác nhau có nhiều hoạt chất, hoạt chất của sản phẩm sau phải bao gồm hoạt chất của sản phẩm trước.
Sản phẩm 1 (hoạt chất A) Sản phẩm 2 (hoạt chất A) Dọn quang Dọn quang Sản phẩm 1 (hoạt chất A) Sản phẩm 2 (hoạt chất A, hoạt chất B) Dọn quang Vệ sinh
Hai sản phẩm khác nhau có cùng hoạt chất, 1 sản phẩm có tá dược màu (hoặc tá dược mùi), sản phẩm cịn lại khơng có:
Hai sản phẩm khác nhau có hoạt chất khác nhau:
Thực hiện dọn quang
Thu dọn, mang tất cả hồ sơ, sản phẩm trước ra khỏi khu vực cần dọn quang. Hút sạch bụi phòng và thiết bị.
Thực hiện vệ sinh
Vệ sinh dụng cụ không tiếp xúc trực tiếp với sản phẩm (rổ nhựa sử dụng cho đóng gói cấp 2, kiện nhựa, khay đếm lọ thuốc tiêm...)
Đem các dụng cụ đến nơi vệ sinh chung:
Dùng vòi nước sinh hoạt xịt rửa cho sạch bụi. Sản phẩm 1
(hoạt chất A, tá dược không màu)
Sản phẩm 2
(hoạt chất A, tá dược màu)
Dọn quang
Vệ sinh
Sản phẩm 1
(hoạt chất A, tá dược không mùi)
Sản phẩm 2
(hoạt chất A, tá dược mùi)
Dọn quang Vệ sinh Sản phẩm 1 (hoạt chất A) Sản phẩm 2 (hoạt chất B) Vệ sinh Vệ sinh
Dùng khăn nhúng dung dịch xà phòng lau khắp bề mặt các dụng cụ.
Rửa lại bằng nước sinh hoạt 3 lần, mỗi lần 3-5 phút đến khi sạch chất tẩy rửa.
Dùng súng hơi thổi ráo.
Sấy trong tủ sấy dụng cụ ở nhiệt độ 65 oC trong thời gian khoảng 90 phút. Các dụng cụ bằng nhựa dễ bị biến dạng bởi nhiệt thì để trên giá phơi đến khi khơ.
Sau khi khơ, cho các dụng cụ vào bao plastic, cột kín, gắn nhãn tình trạng dụng cụ sạch và chuyển về bảo quản tại các phòng theo qui định chung. Đối với thùng inox chứa viên, bột: sử dụng natri lauryl sulfat 1% làm chất tẩy rửa
Dùng vòi nước sinh hoạt xịt rửa cho sạch bụi.
Dùng khăn nhúng dung dịch natri lauryl sulfat 1% lau khắp bề mặt.
Rửa lại bằng nước sinh hoạt 3 lần, mỗi lần 3-5 phút đến khi sạch chất tẩy rửa.
Tráng lại bằng nước tinh khiết 3 lần, mỗi lần 3-5 phút.
Lau khơ, đậy nắp, gắn nhãn tình trạng dụng cụ sạch và chuyển về bảo quản tại các phòng theo qui định.
Trước khi sử dụng lau lại bằng cồn 70%.
Vệ sinh dụng cụ tiếp xúc trực tiếp với sản phẩm (thau, rổ inox sử dụng trong cấp 1, muỗng, giá xúc, rây tay .....)
Đem các dụng cụ đến nơi vệ sinh chung:
Dùng khăn rửa sạch bột bám bằng nước sinh hoạt.
Dùng khăn nhúng dung dịch natri lauryl sulfat 1% lau khắp bề mặt các dụng cụ (riêng rây dùng bàn chải nhúng dung dịch tẩy rửa chà sạch các lổ rây).
Rửa lại bằng nước sinh hoạt 3 lần, mỗi lần 3-5 phút đến khi sạch chất tẩy rửa.
Tráng lại bằng nước tinh khiết 3 lần, mỗi lần 3-5 phút.
Dùng súng hơi thổi ráo.
Sấy trong tủ sấy dụng cụ ở nhiệt độ 65 oC trong thời gian khoảng 90 phút.
Sau khi khô, cho các dụng cụ vào bao plastic, cột kín, gắn nhãn tình trạng dụng cụ sạch và chuyển về bảo quản tại các phòng theo qui định chung.
Vệ sinh thiết bị
Thực hiện vệ sinh theo hướng dẫn vệ sinh và kiểm tra vệ sinh chuyên biệt của từng máy.
Vệ sinh cân điện
Ngắt điện, dùng khăn sạch nhúng nước sinh hoạt, vắt thật ráo, lau mặt cân, đĩa cân, xung quanh cân và phía dưới cân từ 2 - 3 lần đến sạch.
Lưu ý:
+ Đối với các cân nhỏ có các khe hở, dùng cọ mềm quét sạch bột rơi ở các khe hở của đĩa cân trước khi lau.
+ Thao tác vệ sinh thật nhẹ nhàng, không được di chuyển cân khi vệ sinh, nếu có di chuyển thì phải hiệu chuẩn lại cân theo qui trình.
Vệ sinh phòng
Dùng máy hút bụi, hút sạch bụi bám ở tường, kính, bàn, ghế, nền (áp dụng cho các phòng sản xuất).
Trần:
Dùng cây lau xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau trần từ 1-2 lần cho sạch
Vệ sinh mặt kính hộp đèn: dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau bên ngồi mặt kính hộp đèn đến khi sạch.
Miệng thổi: dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau bề mặt miệng thổi từ 1-2 lần cho sạch.
Dùng khăn sạch hoặc cây lau xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau tường từ 1-2 lần cho sạch, chú ý các góc cạnh của tường và các ổ cắm điện.
Miệng hút: tháo miếng chặn miệng hút, lọc chân tường G3 (nếu có) ra. Dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau đường ống miệng hút, lau từ 1-2 lần đến khi sạch. Dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau miếng chặn miệng hút đến sạch. Lắp lọc G3 dự phòng vào miệng hút, sau đó lắp lại miếng chặn miệng hút.
Riêng lọc G3: đem xuống nơi vệ sinh chung, dùng vòi nước sinh hoạt xịt rửa khung lọc, bề mặt hai bên lọc cho sạch bụi. Dùng khăn nhúng xà phòng lau xung quanh khung lọc. Xịt rửa lại bằng nước sinh hoạt cho sạch xà phòng, để ráo nước và đem sấy khô ở 65 o
C trong khoảng 2 giờ. Sau khi khơ, cho vào bao plastic, cột kín, gắn nhãn, đem về bảo quản ở phòng dụng cụ sạch.
Kính
Dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau sạch kính từ 1 - 2 lần, chú ý các góc của khung kính.
Dùng bình xịt chứa cồn 70% xịt phun sương lên kính, dùng khăn khơ lau sạch lại từ 1-2 lần cho đến khi kính bóng và trong.
Bàn, ghế
Dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau mặt bàn, hộc và chân bàn khoảng 1-2 lần đến khi sạch. Đối với ghế dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau mặt ghế và chân ghế đến khi sạch. Chú ý các góc ở chân ghế và chân bàn.
Nền
Dùng cây lau xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau nền từ 1 - 2 lần đến khi sạch. Lưu ý: đối với các phịng sản xuất có nhiều bụi, thực hiện vệ sinh trần, tường, kính, nền, bàn, ghế phải lặp lại thao tác lau từ 3 lần trở lên đến khi thật sạch.
Gỡ miếng chắn inox ra khỏi phễu thoát nước.
Dùng bàn chải nhúng nước xà phịng chà sạch miệng phễu thốt nước, miếng chắn inox, chà nhiều lần đến khi sạch. Nếu khơng sạch có thể dùng nước tẩy để tẩy rửa cho sạch.
Dùng nước sinh hoạt rửa phễu thoát nước, miếng chắn đến khi sạch xà phòng.
Lắp lại miếng chắn inox vào phễu thoát nước.
Đối với các phịng sản xuất có phễu thốt nước: Định kỳ hằng tuần vào ngày thứ 6 hoặc trước khi sản xuất trở lại đổ dung dịch javel 25% hoặc troclosene sodium 0,025%.
Tần suất và trách nhiệm
- Đối với các phòng sản xuất: nhân viên sản xuất vệ sinh khi thay đổi mặt hàng (ngoại trừ các phòng thuộc cấp sạch D của dây chuyền sản xuất thuốc tiêm, vệ sinh khi hết 1 lô sản xuất).
- Đối với các phòng trung gian, phòng bảo quản dụng cụ sạch, phịng chuẩn bị bao bì 1: nhân viên tạp vụ (hoặc nhân viên sản xuất được phân công) vệ sinh tường, kính, nền vào ngày cuối tuần, vệ sinh miệng thổi, miệng hút, bề mặt hộp đèn vào ngày thứ 2 đầu tháng.
Lưu ý:
+ Khi sản xuất những sản phẩm có màu, có thể dùng vịi nước sinh hoạt để xịt rửa trực tiếp tường, kiếng, nền, nhưng phải bao bọc cửa để nước không tràn ra hành lang gây nhiễm cho khu vực khác. Và phải bao bọc lại các ổ cắm điện trước khi xịt rửa. + Trường hợp toàn bộ nhà máy ngưng sản xuất (nghỉ lễ, nghỉ tết, nghỉ để sửa chữa nhà máy) trong khu vực sạch cấp D, khi có kế hoạch sản xuất lại thì tiến hành vệ sinh phòng như trên, nhưng phải lau tường, nền bằng dung dịch xà phịng, sau đó mới lau, rửa lại bằng nước sinh hoạt đến khi sạch xà phòng.
Dùng khăn sạch xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau sạch xe nâng, xe kéo. Chú ý lau sạch cả các bánh xe.
Pallet: (vệ sinh sau khi sử dụng)
Dùng khăn xả nước sinh hoạt, vắt ráo, lau mặt trên, các lỗ pallet, mặt dưới, lau từ 2 - 3 lần đến khi sạch.
Đối với các pallet dính nhiều bụi bột (các pallet mang trực tiếp vơ phịng sản xuất), phải mang các pallet đến nơi vệ sinh chung, dùng khăn và bàn chải chà rửa với dung dịch xà phòng, rửa sạch xà phòng bằng nước sinh hoạt. Dùng súng hơi thổi ráo và đem sấy khô ở nhiệt độ khoảng 65 oC trong 2 giờ hoặc để khơ tự nhiên. Sau đó chuyển về bảo quản ở phòng dự trữ.
CHƢƠNG 4. BÀN LUẬN
Hiện nay, các nhà máy sản xuất kháng sinh cephalosporin đều chưa có qui trình chính thức lấy mẫu, bảo quản mẫu và xử lý mẫu để định lượng cephalexin trong các mẫu kiểm tra vệ sinh. Việc định lượng cephalexin trong thuốc là tương đối dễ nhưng để định lượng cephalexin trong các thiết bị bề mặt, nước thải với nồng độ chỉ vài ppm đòi hỏi việc lấy mẫu phải mang tính đại diện, việc bảo quản mẫu phải đảm bảo được độ ổn định của mẫu, qui trình xử lý mẫu phải cho hiệu suất thu hồi cao, ổn định và cuối cùng qui trình định lượng phải có độ nhạy cao, cho kết quả chính xác và ổn định (phụ lục 8). Trong quá trình nghiên cứu, quá trình phết mẫu cephalexin từ các thiết bị bề mặt bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố như:
+ Tăm bông, gạc lấy mẫu nên chọn những vật liệu trơ với cephalexin. + Tẩm ướt tăm bông với nước trước khi phết mẫu.
+ Khi phết mẫu cần phết mạnh và kỹ để lấy được bụi cephalexin bám dính trên bề mặt và cần phết tồn bộ bề mặt.
Trường hợp chưa thể phân tích ngay sau khi lấy mẫu thì nên dùng dung mơi nước để pha mẫu. Nhưng ngay cả trong dung mơi nước thì q trình phân hủy vẫn xảy ra nên điều kiện bảo quản lạnh hoặc tối được ưu tiên, vì nó giúp làm chậm q trình phân hủy. Một vẫn đề cần lưu ý nữa là mẫu phải được bảo quản trong bình kín để tránh bị nhiễm bẩn và nhiễm vi sinh. Do đó cần định lượng cephalexin trong các mẫu nước thải càng sớm càng tốt (nước thải có nguy cơ nhiễm vi sinh rất cao). Kết quả khảo sát từ nghiên cứu này cho thấy cần định lượng cephalexin trong vòng 35 giờ sau khi lấy mẫu nước thải từ phân xưởng sản xuất kháng sinh beta-lactam của cơng ty Imexpharm.
Các qui trình định lượng cephalexin bằng HPLC-PDA, HPLC-UV đều được kiểm tra tính phù hợp hệ thống, khảo sát tính đặc hiệu, khoảng tuyến tính, LOD và LOQ. LOQ của phương pháp HPLC-PDA khoảng 1 ppm so với phương pháp LC-MS khoảng 4 ppb.
Cephalexin là kháng sinh thuộc nhóm -lactam. Do đó việc vệ sinh sau sản xuất khá
đơn giản, chỉ cần dùng các chất tẩy rửa có tính ái nhân (NaOH hoặc EtOH, MeOH) là có thể phá hủy vòng -lactam. Dung dịch NaOH 5% hoặc EtOH 70% nên được sử
dụng để vệ sinh sau quá trình sản xuất vì:
+ NaOH 5% có tính kiềm khơng q cao, khơng gây nguy hiểm cho nhân viên vệ sinh. + EtOH 70% có thể hịa tan tốt cephalexin hơn EtOH nguyên chất.
+ MeOH là chất gây độc cho cơ thể người khi tiếp xúc hoặc khi xả thải ra môi trường sẽ gây ơ nhiễm mơi trường.
Việc tính giới hạn cho phép về ô nhiễm, nhiễm chéo kháng sinh cephalexin và nồng độ tối thiểu gây dị ứng được xem xét và tính tốn cho từng trường hợp cụ thể trong sản xuất
Trường hợp phổ biến nhất, dựa vào giới hạn chung không quá 10 ppm [15]
của bất kỳ sản phẩm nào sẽ xuất hiện trong sản phẩm khác.
MAXCONC = 10 ppm = 0,001%
MBS: là khối lượng lô sản xuất sau.
- Nếu lơ sản xuất sau có khối lượng 100 kg (100.000.000 mg). Như vậy:
Khi diện tích tiếp xúc của thiết bị sản xuất với bột thuốc là 5 m2 thì giới hạn cho phép là 1000 mg/5 m2 = 1000 mg/50.000 cm2 = 0,5 mg/25 cm2.
Khi cho tăm bơng phết mẫu vào 10 ml nước thì giới hạn tối đa cho phép là 50 ppm. Do hiệu suất thu hồi là 90% nên giới hạn cho phép trên mẫu phết là 50 x 90% = 45 ppm. Với qui trình định lượng cephalexin trên hệ thống HPLC-PDA hoặc HPLC- UV có LOQ khoảng 1 ppm nên hồn tồn có thể định lượng được cephalexin.
- Nếu lô sản xuất sau chỉ là 10 kg và diện tích tiếp xúc của thiết bị sản xuất với bột thuốc là 50 m2 thì giới hạn cho phép trên mẫu phết là 0,45 ppm. Trong trường hợp này,
qui trình định lượng cephalexin bằng kỹ thuật LC-MS với LOQ khoảng 4 ppb sẽ phù hợp hơn.
Dựa vào liều điều trị thông thường (mg/ngày):
( ) ( )
( )
Ví dụ: Sau khi sản xuất thành phẩm cephalexin, tiến hành sản xuất thành phẩm cefuroxim. TDD (liều điều trị thông thường) của cephalexin và cefuroxim là 1000 mg/ngày. Khối lượng lô sản xuất cefuroxim là 100 kg.
Nếu diện tích tiếp xúc của thiết bị sản xuất với bột thuốc là 5 m2 thì giới hạn cho phép trên mẫu phết là 450 ppm. Qui trình HPLC-PDA định lượng cephalexin hồn tồn phù hợp.
Dựa vào nồng độ tối thiểu gây dị ứng
Nồng độ tối thiểu gây dị ứng ở người của nhóm cephalosporin là 2 mg/ml = 2000 ppm [7], [8]
. Nếu diện tích thiết bị tiếp xúc với người sản xuất là 100 cm2 thì giới hạn cho phép cephalexin trên thiết bị là 2000 ppm/100 cm2 tương đương với 500 ppm/25 cm2. Như vậy giới hạn cho phép trên mẫu phết là 450 ppm. Qui trình HPLC-PDA định lượng cephalexin hoàn toàn phù hợp.
Dựa vào LD50 (Lethal Dose 50):
LD50 của Cephalexin trên chuột là 5000mg/ kg [24]
Trường hợp sản phẩm sản xuất tiếp theo là 10 kg Cefuroxim.
( ) ( ) ( )
SF: hệ số an toàn, khác nhau tùy thuộc vào đường dùng. Chỉ số 200 được sử dụng khi áp dụng cho thuốc sử dụng đường dùng ngồi.
Nếu diện tích tiếp xúc của thiết bị sản xuất với bột thuốc là 5 m2 thì giới hạn cho phép trên mẫu phết là 787.5 ppm. Qui trình HPLC-PDA định lượng cephalexin hoàn toàn phù hợp.
CHƢƠNG 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1. KẾT LUẬN
Đề tài đã đã hoàn thành mục tiêu đề ra của luận văn, với các kết quả như sau:
- Khảo sát qui trình định lượng cephalexin bằng HPLC-PDA và HPLC-UV-Vis theo Dược điển Việt Nam IV và theo Viện Kiểm nghiệm thuốc TP. Hồ Chí Minh. Kết quả khảo sát cho thấy qui trình đạt tính phù hợp hệ thống, có tính đặc hiệu, khoảng tuyến tính rộng với hệ số tương quan cao, LOD và LOQ thấp và nằm dưới mức giới hạn cho phép của cephalexin trong mẫu phết bề mặt (5 x 5 cm) và mẫu nước thải. - Khảo sát qui trình định lượng cephalexin bằng LC-MS dựa theo tài liệu tham khảo.
Kết quả khảo sát cho thấy qui trình đạt tính phù hợp hệ thống, khoảng tuyến tính ở mức nồng độ ppb với hệ số tương quan cao, LOD và LOQ cao và có thể thay thế cho qui trình định lượng cephalexin bằng HPLC-PDA/UV-Vis khi nồng độ cephalexin trong mẫu phết bề mặt và trong mẫu nước thải dưới 1 ppm.
- Khảo sát độ ổn định của cephalexin trong các dung mơi hịa tan khác nhau, trong mẫu nước thải từ nhà máy và trong các điều kiện bảo quản khác nhau. Kết quả khảo sát cho thấy cephalexin nên được chiết bằng nước, mẫu phân tích nên được bảo quản ở 5 oC và nên định lượng cephalxin trong vòng 7 ngày.
- Xây dựng qui trình xử lý mẫu phết bề mặt kim loại, nhựa và mẫu nước thải. Qui trình xử lý mẫu có hiệu suất thu hồi cao, đơn giản, không mất nhiều thời gian, khơng
địi hỏi thiết bị chun dụng và có thể thực hiện tại phân xưởng sản xuất kháng sinh beta-lactam.
- Xây dựng qui trình lấy mẫu, bảo quản mẫu theo yêu cầu kỹ thuật của GPM WHO, PIC/S, EU và cơ sở vật chất hiện trạng của nhà máy.