2.2 .Vật liệu nghiên cứu
2.2.1 .Vật liệu
2.3. Phương pháp nghiên cứu
2.3.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng của ánh sáng đèn LED lên sự nhân nhanh chồi cây chuối già Cavendish sau 3 lần cấy chuyền. nhân nhanh chồi cây chuối già Cavendish sau 3 lần cấy chuyền.
Mục đích thí nghiệm: khảo sát ảnh hưởng của ánh sáng đèn LED lên sự nhân nhanh
chồi chuối Cavendish.
Đối tượng thí nghiệm: Mẫu chồi chuối in vitro, do phịng Cơng nghệ tế bào thực
vật - Viện Sinh học nhiệt đới cung cấp.
Môi trường nuôi cấy: môi trường MS bổ sung nước dừa 10% (v/v), 30 g/L đường
sucrose, 7.5 g/l agar và 5 mg/l BA. Dụng cụ ni cấy trong bịch chịu nhiệt có chứa 40 ml mơi trường.
Cách tiến hành: cụm chồi có kích thước 0.2 – 0.5 cm của mẫu chuối già lùn ở lần
cấy chuyền thứ 4 (L4), lần cấy chuyền thứ 5 (L5) và lần cấy chuyền thứ 6 (L6) được tách thành các chồi riêng lẻ cấy vào môi trường MS bổ sung nước dừa 10% (v/v), 30 g/l đường sucrose, 7.5 g/l agar và 5 mg/l BA. Sau đó được ni cấy ở điều kiện chiếu sáng đèn LED HortiPower với 3 điều kiện ánh sáng khác nhau huỳnh quang, P1S3 và P1S5. Thí nghiệm được bố trí theo kiểu đơn yếu tố, 3 nghiệm thức với 3 lần lặp lại, mỗi nghiệm thức 10 bịch, mỗi bịch 10 mẫu.
Chỉ tiêu và cách thức theo dõi:
39
Chiều cao chồi: đo xác định chiều cao chồi (cm) từ vị trí gốc lên tới đỉnh ngọn.
Số lá: đếm số lá hình thành trên chồi (số lá/chồi)
Khối lượng tươi: cân xác định khối lượng tươi (g) của từng mẫu cấy trong bịch.
Khối lượng khô: sấy khô mẫu tươi ở 500C trong 48 giờ sau đó cân chính xác khối lượng khô (g).
Hàm lượng chlorophyll: hàm lượng chlorophyll được xác định bằng máy chlorophyll Meter CL-01 (Hansatech).
2.3.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của ánh sáng đèn LED lên sự phát
triển cây chuối già Cavendish nuôi cấy in vitro.
Mục đích thí nghiệm: khảo sát ảnh hưởng của ánh sáng đèn LED lên sự
phát triển của cây chuối già Cavendish nuôi cấy in vitro.
Đối tượng thí nghiệm: Mẫu chồi chuối in vitro, do phịng Cơng nghệ tế bào
thực vật - Viện Sinh học nhiệt đới cung cấp.
Môi trường nuôi cấy: môi trường MS bổ sung nước dừa 10% (v/v), 30 g/L
đường sucrose, 7.5 g/l agar, 0.4 g/l than hoạt tính. Dụng cụ nuối cây trong bịch chịu nhiệt có chứa 40 ml mơi trường.
Cách tiến hành: chồi cây chuối già lùn ở lần cấy chuyền thứ 6 (L6) được
cấy vào môi trường MS bổ sung nước dừa 10% (v/v), 30 g/l đường sucrose, 7.5 g/l agar, 0.4 g/l than hoạt tính. Sau đó được ni cấy ở điều kiện chiếu sáng đèn LED HortiPower với 3 điều kiện ánh sáng khác nhau huỳnh quang, P1S3 và P1S5. Thí nghiệm được bố trí theo kiểu đơn yếu tố, 3 nghiệm thức với 3 lần lặp lại, mỗi nghiệm thức 10 bịch, mỗi bịch 10 mẫu.
Chú thích:
- L4: lần cấy chuyền thứ 4 - L5: lần cấy chuyền thứ 5 - L6: lần cấy chuyền thứ 6
40
Chiều cao của cây: đo xác định chiều cao (cm) cây từ vị trí gốc lên tới đỉnh ngọn.
Số lá: đếm số lá hình thành trên cây (số lá/cây) Số rễ: đếm tổng số rễ trên cây (số rễ).
Chiều dài rễ: đo xác định chiều dài (cm) từ vị trí ra rễ đến chóp rễ
Khối lượng tươi: cân xác định khối lượng tươi (g) của từng mẫu cấy trong bịch.
Khối lượng khô: sấy khô mẫu tươi ở 500C trong 48 giờ sau đó cân chính xác khối lượng khơ (g).
Hàm lượng diệp lục tố (chlorophyll): hàm lượng chlorophyll được xác định bằng máy chlorophyll Meter CL-01 (Hansatech).
Bố trí nghiệm thức ứng với từng loại đèn
Bảng 2.1. Loại bóng đèn ứng với từng nghiệm thức
STT Nghiệm Thức Loại Đèn
1 NT1 HQ
2 NT2 P1S3
3 NT3 P1S5
Chú thích:
HQ: đèn huỳnh quang với cường độ 24.6 μmol m-2s-1
P1S3: đèn LED với cường độ 51.8 μmol m-2s-1
P1S5: đèn LED với cường độ 53.6 μmol m-2s-1