Phân tích cấu trúc của các chât tổng hợp ức chế calpain cho thấy có sự xuất hiê ̣n của các vòng thơm. Kể từ khi sự hiê ̣n diê ̣n của các vòng thơm có ảnh hưởng sâu sắc về cấu trúc (cả phân tử và siêu phân tử ) và các tính chất (hóa học, vâ ̣t lý, cơng nghê ̣ và sinh học ) của các hợp chất hữu cơ , các dẫn xuất pep tit-biphenyl có chứa vòng thơm ở chuỗi peptit đã được mở rô ̣ng nghiên cứu . Theo báo cáo của Bernar do và
các cộng sự các dẫn xuất này c ó khả năng ức chế calpain I , đă ̣c biê ̣t dẫn xuất 42 là
mô ̣t trong những chất ức chế ma ̣nh nhất cho đến nay với IC50 = 87pM (Hình 20).
Từ các tài liệu tham khảo và trên cở sở các phân tích nêu trên, có thể thấy rằng, phương án để tởng hợp được các dẫn xuất peptit-biphenyl trên cơ sở khung biaryl là hoàn toàn khả thi. Các đại phân tử thu được hứa hẹn có nhiều ứng dụng trong hóa học,sinh ho ̣c , nhằm tạo ra hợp chất mới có khả năng đóng vai trò như một peptit nhằm tạo tiền đề cho các nghiên cứu về hoạt tính sinh học và ứng dụng của chúng trong lĩnh vực tìm kiếm thuốc mới.
Chính vì vậy, trong luận văn này, chúng tơi đề xuất phương pháp tổng hợp các peptit-2,2‟-biphenyl có chứa các acid amin hoă ̣c chuỗi peptit ngắn giống nhau và khác nhau ở (C2) và (C2‟) (Hình 21, Hình 22).
Hình 21: Phương pháp tởng hợp các peptit-2,2‟-biphenyl đối xứng
CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM
Tất cả phản ứng được thực hiện dưới mơi trường khí nitơ. Hóa chất tinh khiết được mua từ Aldrich. Dichloromethane tinh khiết được mua từ Fischer sau đó làm khơ bằng P2O5 trước khi sử dụng. Phổ cộng hưởng từ được đo trên máy BRUKER 500 MHz Asend tại Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN, sử dụng TMS là chất chuẩn nội, CDCl3 và DMSO (d6) làm dung môi.
2.1 Tổng hơ ̣p các peptit-2-2’-biphenyl đối xƣ́ng
Tổng hợp [1,1'-biphenyl] -2,2'-dicarboxylic acid (5) : 5 g (36,5 mmol) của
axit anthralinic được hòa tan trong 15 mL nước và 9,2 mL HCl đặc. Hỗn hợp được giữ ở 0-5 °. 35 mL dung dịch của NaNO2 2,63 g (38 mmol) được nhỏ giọt từ từ trong 30 phút. Trong một bình khác, 12,6 g (50,5 mmol) CuSO5 được hòa tan trong 50 mL nước và khuấy trong 10 phút, dung dịch được giữ lạnh bằng nước đá, 21 mL NH4OH được thêm vào và khuấy ở 0°C. Dung dịch của NH2OH được chuẩn bị bằng cách hòa tan 3,65g(51,2 mmol) NH2OH.HCl trong 8,5 mL NaOH 6N, sau đó được thêm vào dung dịch đồng. Dung dịch muối Diazoni được thêm từ từ vào dung dịch đờng, phản ứng duy trì ở 10°C. Sau khi nhỏ giọt hết, dung dịch phản ứng được khuấy thêm 5 phút sau đó đun sơi và trung hòa cẩn thận với 25 mL HCl đặc. Sản phẩm thô được lọc hút và kết tinh lại thu được 2,74 g (62%) chất rắn màu vàng. Nhiệt độ nóng chảy 225-228°C.
Tổng hợp 6,6'-dimethyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-dicarboxylic acid (6): 5 g (33 mmol) của 2-amino-3-methylbenzoic acid đươ ̣c cho thêm vào 16,5 ml NaOH 2,5 M và 70 mL nước. Hỗn hợp được khuấy và gi ữ ở 0-4°C trong 10 phút sau đó NaNO2
(2,73 g, 39,6 mmol) được thêm vào và khuấy trong 15 phút. 30 ml của dung dịch HCl 4M đươ ̣c nhỏ gio ̣t từ từ trong 30 phút và giữ ở 0-5°C. Hỗn hợp phản ứng được khuấy thêm 20 phút để đảm bảo muối diazoni đã được hình thành . Trong một bình khác, 12,5 g (50 mmol) CuSO5 được hòa tan trong 50 mL nước và khuấy trong 10 phút, dung dịch được giữ lạnh bằng nước đá, 21 mL NH4OH được thêm vào và khuấy ở 0°C. Dung dịch của NH2OH được chuẩn bị bằng cách hòa tan 3,39 g (57
mmol) NH2OH.HCl trong 9,5 mL NaOH 6N, sau đó được thêm vào dung dịch đồng. Dung dịch muối Diazoni được thêm từ từ vào dung dịch đờng, phản ứng duy trì ở 0°C. Sau khi nhỏ giọt hết, dung dịch phản ứng được khuấy thêm 30, duy trì nhiê ̣t đô ̣ dưới 10°C sau đó đun sơi trong 30 phút và làm lạnh về nhiệt độ phòng rồi trung hòa cẩn thận với 37,5 mL HCl đặc. Sản phẩm thô được lọc hút và kết tinh lại thu được 2,5 g chất rắn màu vàng. Sản phẩm thô được kết tinh lại bằng EtOH và sau đó làm la ̣nh về nhiê ̣t đô ̣ phòng , lọc hút trên phễu buchner rồi làm khô ở 100°C thu đươ ̣c 0.54 g (12%) chất rắn màu vàng. Nhiệt độ nóng chảy 220-230°C.
Tổng hợp [1,1'-biphenyl] -2,2'-dicarbonyl dichloride (7): (5) (2 g, 8,26 mmol) đươ ̣c nhỏ cho thêm 6 ml SOCl2 và đun hồi lưu trong 3h rồi làm la ̣nh về nhiê ̣t đo ̣ phòng. Thionyl clorua được làm bay hơi dưới áp suất thấp thu được chất rắn màu vàng. Sản phẩm thô (7) thu đươ ̣c với hiê ̣u suất cao (100%) mà không cần tinh chế.
Tổng hợp 6,6'-dimethyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-dicarbonyl dichloride (8): (6)
(2 g, 7,4mmol) đươ ̣c nhỏ cho thêm 6 ml SOCl2 và đun hồi lưu trong 3h rồi làm la ̣nh về nhiê ̣t đo ̣ phòng. Thionyl clorua được làm bay hơi dưới áp suất thấp thu được chất rắn màu vàng . Sản phẩm thô (7) thu đươ ̣c với hiê ̣u suất cao (100%) mà không cần tinh chế.
Quy trình chung để tổng hợp các peptide -biphenyl (phƣơng pháp 1): các muối HCl của các dẫn xuất acid amin (1.1 đương lượng) được hịa tan dung mơi DCM khan và thêm vào dung di ̣ch Et3N (1.5 đương lươ ̣ng) dưới Nito trơ. Thêm vào
dung dịch biphenyl diclorua acid đã được hòa tan trong 20 mL DCM. Sau khi phản ứng kết thúc, dung dịch được rửa bằng HCl 0,01N, chiết lại bằng DCM và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2].
Quy trình chung cho phản ƣ́ng tổng hợp amit : các acid amin đư ợc hòa tan trong DCM dưới Nito trơ .Thêm vào dung di ̣ch Et3N khô (1,5 đương lươ ̣ng) rồi làm
lạnh tới 0°C trong 30 phút. 1,2 đương lượng DCC và 20% DMAP( tính theo trọng lươ ̣ng của DCC) được thêm vào. Phản ứng được giữ ở 0°C trong 1 giờ và khuấy
qua đêm ở nhiệt độ phòng. Sau khi phản ứng kết thúc, dung dịch được rửa bằng HCl 0,01N, chiết lại bằng DCM và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 4:1].
Quy trình chung phá bảo vê ̣ N -CBz: các dẫn xuất được bảo vệ bằng CBz
được hòa tan trong dung môi EtOAc: MeOH (4:1). 5% mol Pd/C được thêm vào. Hỗn hợp phản ứng được dẫn khí H2 trong 6 giờ. Sau khi phản ứng kết thúc, dung dịch được lọc qua phễu lọc xelit và làm bay hơi dung môi dưới áp suất thấp thu sản phẩm thô. Sản phẩm được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại bằng sắc kí cột.
Tởng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(([1,1'-biphenyl]-2,2'-
dicarbonyl)bis(azanediyl))diacetate (13): HCl.Gly.COOMe đươ ̣c thêm vào dung dịch của (7) trong dung môi DCM khan sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptide-biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thơ được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (55%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(([1,1'-biphenyl]-2,2'-
dicarbonyl)bis(azanediyl))diacetate (14): HCl.Ala.COOMe đươ ̣c thêm vào dung dịch của (7) trong dung môi DCM khan sử du ̣ng quy trình chung để tởng hợp các peptide-biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thơ được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (60%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(([1,1'-biphenyl]-2,2'-
dicarbonyl)bis(azanediyl))(2S,2'S)-bis(4-methylpentanoate) (15):
HCl.Leu.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của (7) trong dung môi DCM khan sử dụng quy trình chung để tổng hợp các peptide -biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (63%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Methyl (2'-(((2S,3R)-3-hydroxy-1-methoxy-1-oxobutan-2- yl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2-carbonyl)-L-allothreoninate (16):
sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptide -biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (26%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(([1,1'-biphenyl]-2,2'-
dicarbonyl)bis(azanediyl))(2S,2'S)-bis(3-phenylpropanoate) 17:
HCl.PheAla.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của (7) trong dung môi DCM khan
sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptide -biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thơ được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (53%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(([1,1'-biphenyl]-2,2'-
dicarbonyl)bis(azanediyl))(2S,2'S)-bis(3-phenylpropanoate) (18):
HCl.Pro.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của (7) trong dung môi DCM khan sử dụng quy trình chung để tổng hợp các peptide -biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (67%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p benzyloxy )carbonyl)-L-proline (19): 1 g (8,69 mmol) của Proline được hòa tan trong 20 mL dioxan và 20 mL dung dịch K2CO3 bão hòa, hỗn hợp được làm lạnh ở 0° C. 3,19 mL (9,75 mmol) benzyl cloromat được thêm từng giọt trong 1 giờ. Hỗn hợp khuấy ở nhiệt độ phòng trong 5 giờ. Sau khi phản ứng kết thúc, hỗn hợp được trung hòa bằng HCl 1M, chiết lại với EtOAc và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp thu được2,12 g sản phẩm, hiệu suất 98%.
Tổng hơ ̣p benzyl 2-((1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)carbamoyl)- 1H-pyrrole-1-carboxylate (20): acid (19) và Phenylalanin metyl este được hòa tan
trong dung môi DCM khan sử du ̣ng quy trình chung cho phản ứng tổng hợp amit đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 4:1] thu được (70%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p methyl 3-phenyl-2-(1H-pyrrole-2-carboxamido)propanoate (21): (20) đươ ̣c hòa tan trong dung môi EtOH/MeOH sử du ̣ng quy trình chung phá bảo vê ̣
N-CBz nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại bằng sắc kí cột (85%).
Tởng hơ ̣p 2-(1-((benzyloxy)carbonyl)-1H-pyrrole-2-carboxamido)-3- phenylpropanoic acid (22): (20) được hòa tan trong 40 mL methanol và 40 mL NaOH 2M. Hỗn hợp phản ứng được khuấy trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng. Sau khi phản ứng kết thúc, sản phẩm được trung hòa bằng HCl 2M, chiết lại với EtOAc và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp thu được sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (90%).
Tổng hơ ̣p benzyl 2-((1-(((R)-1-methoxy-1-oxopropan-2-yl)amino)-1-oxo-3- phenylpropan-2-yl)carbamoyl)-1H-pyrrole-1-carboxylate (23): (22) và alanin metyl este đươ ̣c hòa tan trong dung môi DCM khan sử du ̣ng quy trình chun g cho phản ứng tổng hợp amit đã nêu trên . Hỗn hợp sản phẩm thơ được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 4:1] thu được (27%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p (2R)-methyl 2-(3-phenyl-2-(1H-pyrrole-2- carboxamido)propanamido)propanoate (24): (23) đươ ̣c hòa tan trong dung môi EtOH/MeOH sử du ̣ng quy trình chung phá bảo vê ̣ N -CBz nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại bằng sắc kí cột (85%).
Tởng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(((2S,2'S)-1,1'-([1,1'-biphenyl]-2,2'- dicarbonyl)bis(pyrrolidine-1,2-diyl-2-carbonyl))bis(azanediyl))(2S,2'S)-bis(3- phenylpropanoate) (25) : (21) đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của (7) trong dung môi
DCM khan sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các pe ptide-biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên . Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (80%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(((2S,2'S)-2,2'-(((2S,2'S)-1,1'-([1,1'-biphenyl]-2,2'- dicarbonyl)bis(pyrrolidine-1,2-diyl-2-carbonyl))bis(azanediyl))bis(3-
phenylpropanoyl))bis(azanediyl))(2S,2'S)-dipropionate (26): (24) đươ ̣c thêm vào dung dịch của (7) trong dung môi DCM khan sử du ̣ng quy trình chung để tổng
hơ ̣p các peptide-biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (63%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Dimethyl 2,2'-(((2S,2'S)-2,2'-(((2S,2'S)-1,1'-(6,6'-dimethyl-[1,1'- biphenyl]-2,2'-dicarbonyl)bis(pyrrolidine-1,2-diyl-2-
carbonyl))bis(azanediyl))bis(3-phenylpropanoyl))bis(azanediyl))(2S,2'S)-
dipropionate (27) : (24) đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của (8) trong dung môi DCM
khan sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptide-biphenyl (phương pháp 1) đã nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex 3:2] thu được (58%) chất rắn màu vàng.
2.2 Tổng hơ ̣p các peptit-2-2’-biphenyl không đối xƣ́ng
Quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit -biphenyl: Anhydric
diphenic (1 đương lươ ̣ng) được thêm vào h ỗn hợp của các acid amin metyl este và Et3N (1,5 đương lươ ̣ng ) trong dung môi DCM khan ở nhiê ̣t đô ̣ phòng . Hỗn hơ ̣p đươ ̣c khuấy qua đêm . Sau khi phản ứng kết thúc , dung dịch được rửa bằng HCl 0,01N, chiết lại bằng EtOAc và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp . Hỗn hợp sản phẩm thô được sử du ̣ng luôn cho các bước tiếp theo mà không cần tinh chế la ̣i.
Tổng hơ ̣p 2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2- carboxylic acid (29): HCl.Gly.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của anhydit (28)
trong dung môi DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit-biphenyl nêu trên. Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực
tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (92%).
Tổng hơ ̣p (S)-2'-((1-methoxy-1-oxopropan-2-yl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]- 2-carboxylic acid (30): HCl.Ala.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của anhydit
(28) trong dung môi DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit-biphenyl nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà không cần tinh chế lại (92%).
Tổng hơ ̣p (S)-2'-((1-methoxy-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)carbamoyl)-[1,1'- biphenyl]-2-carboxylic acid (31): HCl.Leu.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của
anhydit (28) trong dung môi DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit -biphenyl nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được
sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (98%).
Tổng hơ ̣p (S)-2'-((1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)carbamoyl)-[1,1'- biphenyl]-2-carboxylic acid (32): HCl.PheAla.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của anhydit (28) trong dung môi DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit -biphenyl nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (99%).
Tổng hơ ̣p (R)-2'-((3-(benzylthio)-1-methoxy-1-oxopropan-2-yl)carbamoyl)- [1,1'-biphenyl]-2-carboxylic acid (33): Benzyl-cysteine methyl ester hydrochloride đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch của anhydit (28) trong dung môi
DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit -biphenyl nêu trên. Sau khi phản ứn g hỗn hợp sản phẩm thô được sử dụng trực tiếp cho bước
chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (89%).
Tổng hơ ̣p (S)-2'-(2-(methoxycarbonyl)pyrrolidine-1-carbonyl)-[1,1'- biphenyl]-2-carboxylic acid (34): HCl.Pro.COOMe đươ ̣c thêm vào dung di ̣ch củ a anhydit (28) trong dung môi DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các mono amit peptit -biphenyl nêu trên . Sau khi phản ứng hỗn hợp sản phẩm thô được
sử dụng trực tiếp cho bước chuyển hóa tiếp theo mà khơng cần tinh chế lại (90%).
Quy trình chung để tổng hợp các Peptit -biphenyl (phƣơng pháp 2): HOBt (1,3 đương lươ ̣ng ), Et3N (1,5 đương lươ ̣ng ), EDCI (1,3 đương lượng ) được thêm lần lươ ̣t vào dung di ̣ch của mono acid (1 đương lượng ) và muối HCl của các acid amin khác (1,3 đương lượng) in dung môi DCM khan ta ̣i nhiê ̣t đô ̣ phòng . Hỗn hợp phản ứng được khuấy từ 10-18 giờ và theo dõi bằng sắc ký lớp mỏng (TLC). dung dịch được rửa bằng HCl 0,01N, chiết lại bằng DCM và nước, làm khô bằng Na2SO4 rồi làm bay hơi dưới áp suất thấp. Hỗn hợp sản phẩm thơ được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hex].
Tởng hơ ̣p Methyl (2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2- carbonyl)-L-alaninate (35): HCl.Ala.COOMe, EDCI, HOBt đươ ̣c thêm vào dung dịch của (29) trong DCM khan, sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptit - biphenyl (phương pháp 2) nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hexane] thu được (78%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Methyl (2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2- carbonyl)-L-leucinate (36): HCl.Leu.COOMe, EDCI, HOBt đươ ̣c thêm vào dung dịch của (29) trong DCM khan , sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptit - biphenyl (phương pháp 2) nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hexane] thu được (84%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Methyl (2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2- carbonyl)-L-allothreoninate (37): HCl.Threo.COOMe, EDCI, HOBt đươ ̣c thêm
vào dung dịch của (29) trong DCM khan, sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptit-biphenyl (phương pháp 2) nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hexane] thu được (76%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Methyl (2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'-biphenyl]-2- carbonyl)-L-phenylalaninate (38): HCl.PheAla.COOMe, EDCI, HOBt đươ ̣c thêm
vào dung dịch của (29) trong DCM khan, sử du ̣ng quy trình chung để tổng hợp các peptit-biphenyl (phương pháp 2) nêu trên. Hỗn hợp sản phẩm thô được tinh chế bằng sắc kí cột [EtOAc: Hexane] thu được (26%) chất rắn màu vàng.
Tổng hơ ̣p Methyl S -benzyl-N-(2'-((2-methoxy-2-oxoethyl)carbamoyl)-[1,1'- biphenyl]-2-carbonyl)-L-cysteinate (39): HCl.Gly.COOMe, EDCI, HOBt đươ ̣c