a) Đánh giá định tính khả năng kháng khuẩn
- Đặt mẫu lọc tinh có tẩm nano và khơng tẩm nano vào giữa đĩa thạch PCA đã chuẩn bị sẵn, dùng kéo nén xuống để miếng lọc tiếp xúc với mặt thạch. Đặt vào tủ nuôi cấy, ủ trong thời gian từ 24h đến 48h ở nhiệt độ 37oC.
+ Lần 1: Sau 24h đưa ra đánh giá trực quan mật độ vi khuẩn xuất hiện trên 2 đĩa thạch, chụp kết quả.
+ Lần 2: Sau 48h đưa ra đánh giá trực quan mật độ vi khuẩn xuất hiện trên 2 đĩa thạch, chụp kết quả.
b) Đánh giá định lượng khả năng kháng khuẩn
Quy trình thực hiện của thí nghiệm được đưa ra dựa trên quy trình đã sử dụng để đánh giá vi sinh có trong các mẫu thực phẩm và mỹ phẩm [6], nhằm đánh giá mối tương quan về lượng vi khuẩn, nấm tồn tại trên màng lọc tinh phủ nano bạc và màng lọc tinh không phủ nano bạc.
- Đong 10 ml nước muối sinh lý và nước RO vào 2 ống nghiệm;
- Cho dụng cụ thí nghiệm, mơi trường ni cấy PCA, ống nghiệm chứa nước muối sinh lý và nước RO vào hấp khử trùng trong 1h.
- Cho mẫu vải lọc tẩm nano bạc vào 2 ống nghiệm; lắc ống nghiệm 10 lần, mỗi lần 5s bằng máy lắc Vortex, 1ml dịch chiết vi sinh cho vào nuôi cấy trong đĩa petri. Đặt vào tủ nuôi cấy ở nhiệt độ 37oC. Đọc kết quả sau 24h và 48h.
- Làm tương tự với mẫu vải lọc không tẩm nano bạc (mẫu đối chứng). - Cách đếm và xử lý kết quả: tương tự như mô tả trong mục 2.3.2 b).
2.3.3 Đánh giá khả năng xử lý khơng khí của bộ tiền lọc
+ Hóa chất: - Mơi trường PCA để phân lập tổng vi khuẩn hiếu khí (VKHK) và môi trường Sabouraud để phân lập nấm.
+ Dụng cụ: - Đĩa petri, pipet, kéo, đèn cồn, bông không thấm…,
- Tủ nuôi cấy vi sinh FFC 90E VELP, nồi hấp tiệt trùng 25X-2 (Mỹ), tủ sấy Memmert (Đức), cân phân tích DJ-300TW (Nhật);
- Thiết bị đo bụi Kanomax - Model 3443 (độ chính xác 1/1000) do Nhật Bản sản xuất ;
- Thiết bị lấy mẫu khơng khí Flora của Nga (hình 2.5) ; - Thiết bị chạy thử nghiệm hình hộp chữ nhật bằng PVC.
2.3.3.1. Khả năng giữ bụi của bộ tiền lọc phủ nano bạc * Tiến hành:
- Mắc túi nilong ở đầu ra của thiết bị;
- Bật thiết bị làm sạch khơng khí và chạy ổn định trong khoảng 15 – 20 phút. - Dùng máy KANOMAX đo nồng độ bụi trong khơng khí trước khi đi vào thiết bị (chính là nồng độ trong khơng khí mơi trường xung quanh). Đo lặp lại 3 lần. - Đặt máy KANOMAX bên trong túi nilong để đo nồng độ bụi tại ngay đầu ra của thiết bị, đo lặp lại 3 lần.
- Tính hiệu suất xử lý theo công thức sau ( vao ra) *100 vao C C H C (%)
Trong đó: Cvào: Nồng độ trung bình đầu vào (mg/m3); Cra: Nồng độ trung bình đầu ra (mg/m3).
- Tiến hành khảo sát hiệu suất đo bụi ở các vận tốc khí khác nhau của thiết bị:
v1 = 0,51m/s; v2 = 1 m/s; v3 = 1,5 m/s; v4 = 2m/s.
2.3.3.2 Khả năng khử khuẩn khơng khí của bộ tiền lọc phủ nano bạc * Phương pháp lấy mẫu: Sử dụng phương pháp đặt đĩa thạch hút khơng khí
tiếp xúc với mặt thạch để phát hiện và đếm số vi khuẩn có trong 1 m3 khơng khí. Tùy từng đối tượng vi khuẩn mà lựa chọn các môi trường đặc trưng khác nhau, môi trường sau khi pha chế, khử trùng và làm nguội đến 45°C được đổ ra đĩa petri, mỗi đĩa khoảng 12 – 15 ml trong điều kiện vô trùng. Các đĩa thạch này được bảo quản và chuyển đến vị trí cần lấy mẫu. Mẫu sau khi lấy được bảo quản, vận chuyển về phịng thí nghiệm và ni cấy trong tủ ấm 24 - 48 giờ, sau đó đọc kết quả. Dựa vào số lượng khuẩn lạc đếm được trên đĩa thạch sau 24 và 48h, xác định được mật độ vi khuẩn (tính theo cfu) có trong 1 m3 khơng khí.