- Nguyên lý vận hành: Nước thải được phân phối từ dưới lên, qua lớp bùn kỵ khí,
2.2.1. Quy trình tạo chế phẩm BKMA
Hình 2.1. Các bước tạo chế phẩm BKMA
Bước 1: Kiểm tra bùn giống BKM trước nhân nuôi
Bùn giống BKM được duy trì trong bình Schott kỵ khí, được kiểm tra hoạt tính sinh methane (phương pháp xác định hoạt tính sinh methane riêng của bùn) và
số lượng methanogen (phương pháp MPN sử dụng nước biển nhân tạo, cơ chất acetate).
Bước 2: Nuôi tăng sinh bùn BKM
- Tổ hợp vi sinh vật BKM được ni tăng sinh trong bình Scott 2 lít chứa 1,5 lít nước biển nhân tạo (đã loại oxy bằng sục khí N2) và 10% dịch lên men cám gạo làm cơ chất. BKM gốc được bổ sung vào bình ni theo tỷ lệ 10%, bình ni sau đó được đặt tại 37C trong thời gian 7 – 10 ngày cho tới khi ổn định hoạt tính sinh methane (80% trong pha khí).
- Dịch cám gạo lên men gồm nước biển nhân tạo và cám gạo (10% w/v), khử trùng ở 121oC trong 25 phút. Vi sinh vật lên men trong tổ hợp BKM được sử dụng làm giống và bổ sung vào bình ni theo tỷ lệ 5% thể tích. Bình lên men được đặt ở nhiệt độ 35 ± 2C trong thời gian 5 ngày, sau đó được đánh giá chất lượng thơng qua giá trị pH, hàm lượng COD và tổng lượng VFA. Dịch được bảo quản tại 4C để sử dụng cho các thí nghiệm ni bùn.
Bước 3: Thu sinh khối
Vi sinh vật sinh trưởng trong bình ni tạo hạt bùn lắng xuống đáy. Xả khí biogas sinh ra trong bình ni và để lắng, loại phần nước phía trên, thu cặn bùn.
Bước 4, 5, 6: Tạo hạt vi bao tế bào trong alginate
- Trộn dịch tế bào với dung dịch Na-alginate 4% (đã loại oxy bằng sục khí N2) theo tỷ lệ 1:1.
- Tạo hạt gel bằng cách nhỏ hỗn hợp dịch nuôi/alginate vào dung dịch CaCl2 5,5% trong điều kiện khuấy và sục khí N2 liên tục.
- Đậy kín bình đựng hạt gel, để tĩnh trong 1 giờ để ổn định hạt. - Rửa hạt gel 1 – 2 lần bằng nước biển nhân tạo đã loại oxy. - Đánh giá hoạt tính của vi sinh vật trong hạt gel.
Bước 7: Bảo quản chế phẩm
- Bảo quản hạt gel chế phẩm BKMA trong nước biển nhân tạo trong bình kín khí có nắp cao su và kẹp nhơm, giữ ở nhiệt độ phịng.