CHƢƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Đặc điểm sinh học của chủng Streptomyces orientalis 4912
Chủng S. orientalis 4912 đƣợc tuyển chọn từ bộ sƣu tập chủng giống vi sinh vật của phịng Cơng nghệ lên men, Viện Cơng nghệ sinh học. Kết quả nghiên cứu chọn lọc xạ khuẩn sinh vancomyxin cho thấy đặc điểm ƣu việt của chủng 4912 là tính ổn định về khả năng phát triển và sinh kháng sinh qua thời gian bảo quản. Vì vậy, chủng xạ khuẩn này đƣợc sử dụng để nghiên cứu quy trình lên men sản xuất vancomyxin phù hợp điều kiện Việt Nam.
3.1.1. Đặc điểm nuôi cấy
Chủng S. orientalis 4912 đƣợc ni trên các mơi trƣờng (MT) thạch có thành phần dinh dƣỡng khác nhau. Đây là các MT nuôi cấy đặc trƣng để phân loại các chủng xạ khuẩn. Đặc điểm nuôi cấy của chủng S. orientalis 4912 trên các MT đƣợc trình bày ở bảng 3.1. Kết quả cho thấy, sau 14 ngày nuôi, KTKS của chủng S. orientalis 4912 trên các MT khác nhau đều là màu trắng. Sau đó xạ khuẩn hình thành bào tử nên bắt đầu có sự thay đổi màu sắc, trên MT Gauze 1 và ISP-6, KTKS chuyển sang màu đỏ, trên MT Gauze 2 và ISP-4, KTKS chuyển sang màu vàng nhạt, trong khi vẫn giữ nguyên màu trắng trên MT 48 và MT khoai tây. Chủng 4912 phát triển tốt trên MT Gauze 1 và Gauze 2. Trên các MT, chủng S. orientalis 4912 không sinh sắc tố tan.
Bảng 3.1. Đặc điểm nuôi cấy của chủng S. orientalis 4912 MT Sinh trƣởng Màu KTCC Màu KTKS Sắc tố tan
Gauze 1 +++ Đỏ - vàng nâu Trắng đỏ Khơng có
Gauze 2 +++ Nâu vàng Trắng vàng Khơng có
ISP 1 +++ Trắng Vàng kem Khơng có
ISP 2 ± Trắng Vàng nhạt Khơng có
ISP 4 ± Trắng vàng Trắng vàng Khơng có
ISP 6 +++ Nâu vàng Trắng đỏ Khơng có
ISP 9 ± Trắng Nâu nhạt Khơng có
48 ++ Xám Trắng Khơng có
79 ± Trắng Vàng sáng Khơng có
Khoai tây ++ Nâu vàng - đỏ Trắng Khơng có
Ghi chú: +++: sinh trưởng tốt; ++: sinh trưởng bình thường; ±: sinh trưởng kém
Hình 3.1. Khuẩn lạc của chủng S. orientalis 4912 trên MT 48 3.1.2. Đặc điểm hình thái
Chủng S. orientalis 4912 đƣợc nuôi cấy trên MT Gauze 1 ở nhiệt độ 28oC trong 7-14 ngày, sau đó làm tiêu bản quan sát dƣới kính hiển vi. Hình dạng khuẩn ty và bào tử của chủng S. orientalis 4912 đƣợc thể hiện ở hình 3.2 và 3.3.
Hình 3.3. Hình dạng khuẩn ty và chuỗi bào tử của chủng S. orientalis 4912
của chủng S. orientalis 4912 (x 15.000)
Kết quả quan sát dƣới kính hiển vi điện tử cho thấy, chủng S. orientalis 4912 có khuẩn ty khá lớn mọc đan xen với nhau. Bào tử kết thành chuỗi dạng lƣợn sóng, và đƣợc hình thành ở đầu của các chuỗi. Trên mỗi chuỗi có khoảng từ 15-20 bào tử. Bào tử có dạng hình trụ, hình trứng, kích thƣớc 0,5-1 x 2-3 μm, bề mặt bào tử xù xì (kiểu Wa). Quan sát bằng mắt thƣờng thì thấy đó là các đám màu vàng xám.